甲状腺激素自身抗体(抗T3.pdf

甲状腺激素自身抗体 抗T3 T4 放射免疫分析 上海第二医科大学附属瑞金医院内分泌代谢病临床医学中心 上海内分泌代谢病研究所 200025 李凤英 顾丽群 陈夏英 金 燕 陈淑贤 张 群 邱宏霞 杨静仁 赵咏桔 陈名道 摘要 目的 本实验主要建立内源性甲状腺激素自身抗体 抗T3 T4 放射免疫分析的检测方法 方法 用125I标记T3 T4衍生物作为示踪剂 血清样本与T3 T4衍生物 125I T3 T4衍生物 在室温16h孵育 用抗人 IgG二抗分离抗体抗原复合物 测定放射性活度 结果 125I标记T3 T4衍生物与人血清T3 T4自身抗体特异 性结合 健康人群中甲状腺激素自身抗体阳性检出率为1107 甲状腺功能异常组甲状腺激素自身抗体阳性 检出率为1414 甲状腺功能亢进组1315 甲状腺功能减退组1512 甲状腺激素自身抗体阳性血清标本 经加入非标记T3或T4 血清中T3或T4自身抗体可被中和 T3或T4自身抗体滴度较原滴度明显下降 P 0105 用PEG沉淀法去除血清中免疫球蛋白 高水平的FT3 FT4均明显下降 P 01 05 结论 本文结果提 示 正常人群中甲状腺自身抗体阳性的发生率较低 甲状腺功能异常患者中甲状腺激素自身抗体阳性检出率达 1414 内源性甲状腺激素自身抗体对FT3 FT4的测定存在干扰 结果常与临床表现不一致 经PEG将免疫 球蛋白去除后 重新评估了血清中FT3 FT4的含量 其结果与TSH趋于一致 关键词 放射免疫分析 甲状腺激素自身抗体 A Newly Developed RIA for Thyroid Hormone Autoantibodies THAAb Li Fengying Gu Liqiong Chen Xiayin et al Clinical Center for Endocrine and Metabolic Disease Shanghai Institute of Endocrine and Metabolic Disease Ruijin Hospital Shanghai Second Medical University Shanghai 200025 Abstract Objective To report a newly developed RIA for THAAb from this laboratory Methods The tested serum samples were cultured with labelled thyroid hormone analogus 125I T3 125 I T4 for 16 hours Antigen antibody complex wasprecipitated with anti human IgG immune precipitation method and radio activity determined Results The mean positive rate of THAAb in healthy euthyroid controls n 186 was only 1 07 The mean positive rate in patients with thyroid disorders was 14 4 mean rate 13 5 in hyperthyroid subjects n 118 and mean rate 15 2 in hypothyroid sabjects n 72 The serum THAAb titer could be markedly lowered after adding non labelled thyroid hormones P 0 05 After PEGprecipitation the original false high levels of FT3and FT4would be significantly lowered P x 2s为抗甲状腺激素自 身抗体 T 3 T4 阳性 112 对象 实验共分三组 11 一般体检无异常的健康人群 临床及实验室生化检查均无甲状腺功能异常 186名 女79 男 107 年龄 30 86 岁 21 甲状腺功能异常患者 共190 714 放射免疫学杂志2004年第17卷第6期J of Radioimmunology2004 17 6 例 女166 男24 其中甲状腺功能亢进组118例 女101 男 17 甲状腺功能减退组72例 女55 男7 年龄 5 78 岁 31 不同孕期妇女91例 RF因子阳性 150 86例 女76 男 10 ANA 抗核抗体 阳性 320 17例 女17 年龄 17 85 岁 以上患者均来自上海市瑞金医院门诊就诊病人 113 统计学处理 采用常规统计学方法 均数 标准差 标 准误 t检验 x2检验 各变量之间的关系用直线相关分析 2 结果 211 血清稀释度 血清用血清稀释液以1 5 1 10 1 20 1 40稀释 结果血清1 5稀释的浓度与125I标记T3 T4衍生 物100 l 125I T4 或125I T320000cpm 的结合率最高 随 着稀释倍数的增加 结合率下降 见图1 212 正常值 取 x 2s T3 T4结合率 8 为抗体阳性 正 常健康人群的阳性率为1107 2 186 甲状腺功能亢进组 1315 17 118 甲状腺功能减退组1512 11 72 见表1 图1 血清稀释曲线 表1 不同组别抗甲状腺激素自身抗体的发生率 组别总例数阳性例数阳性率 抗T4自身抗体 例 抗T3自身抗体 例 抗T3 T4双阳性 例 8 8 健康人群 甲亢 甲减 186 118 72 2 17 11 1 07 13 5 3 15 2 3 3 1 9 1 17 11 注 甲亢组与健康人群组比较P 0101 甲减组与健康人群组比较P 150 ANA阳性组 320 91 86 37 5 58 0 99 3 77 0 96 3 47 0 74 5 21 0 74 3 64 0 85 3 56 0 50 T41610ng 管 另一组不加未标记的甲状腺激素衍生物T3 T4 与标记的甲状腺激素衍生物T3 T4室温过夜 PEG W6000 1215g L分离 沉淀物用 计数仪测定标记物活性 结果显示 T3 T4抗体阳性血清标本 加未标记的甲状腺激 素衍生物T3116ng 管 T41610ng 管与血清标本抗体吸附中 和反应后 其T3 T4抗体滴度明显下降 P 0101 P 01 001 阴性血清无变化 见表3 214 特异性结合试验 取不同孕期妇女 RF因子阳性 ANA 抗核抗体 阳性血清与标记的甲状腺激素衍生物 T3 T4室温过夜 结果显示 各组所测结果与正常对照组的阳 性率基本一致 该标记物与其他免疫球蛋白没有交叉反应 与血清T3 T4抗体呈特异性结合 见表2 215 精密度 取T3 T4抗体阳性 弱阳性 强阳性 阴性血清 标本 分别测定6个平行样品 读取结果 计算批内CV 批间试验同时取阴性 弱阳性 强阳性3个血清标本 每周检 测一次 共4次 读取结果 计算批间CV 见表4 表3 吸附中和试验 组别 T3Ab 不加T3标准 x s 加T3标准 x s T4Ab 不加T4标准 x s 加T4标准 x s 抗体阳性组 n 8 抗体阴性组 n 8 15 98 7 20 3 3 88 1 3 1 93 0 95 3 99 0 75 20 12 8 00 3 3 3 63 0 71 2 10 0 30 2 93 0 62 注 3加 T3标准组 1 6ng 管 与不加标准组比较P 0 01 3 3加T4标准组 16 0ng 管 与不加标准组比较P 0 001 表4 平均批内批间变异系数 CV 标本号n T3Ab x sCV T4Ab x sCV 批内 批间 1 2 3 1 2 3 6 6 6 6 6 6 1 5 0 1 5 8 0 37 22 1 0 75 5 4 0 49 2 5 0 12 21 8 1 47 6 7 6 5 3 4 9 1 7 4 6 7 7 8 0 34 19 8 0 69 32 3 1 25 7 3 0 72 15 9 0 64 31 7 0 56 4 3 3 4 3 9 10 4 0 4 1 3 讨论 在放射免疫分析中 标记物与样品待测物进行竞争结合 814 放射免疫学杂志2004年第17卷第6期J of Radioimmunology2004 17 6 抗体活性中 当甲状腺激素自身抗体存在待测样品中 标记 物可能与甲状腺自身抗体产生非特异性结合 产生或高或低 不真实的甲状腺激素测定结果 导致临床错误的诊断及不恰 当的治疗 因此有关甲状腺激素自身抗体 抗T3 T4 的研 究 主要集中在这些物质在甲状腺激素免疫法测定中与标记 物产生非特异性结合 在THAAb阳性标本血清中加入过量未标记T3 T4可 显著抑制标记的甲状腺激素衍生物和抗T3 T4自身免疫球 蛋白抗体的结合 表明本试验所用标记的甲状腺激素衍生 物和体内T3 T4自身抗体具有特异性结合 证实抗甲状腺激 素自身抗体的产生是针对甲状腺激素T3 T4而发生的自身 免疫反应 究竟产生抗T3 T4抗体的免疫原是何物 目前 还不清楚 有学者认为是变性的甲状腺球蛋白 本文检测的 T3 T4自身抗体阳性患者 其血清中都存在高滴度的 TPOAb TGA TMA抗体 但没有线性相关性 它们之间是 否存在内在关系 还有待于进一步的证实 甲状腺自身免疫疾病患者体内存在着许多自身免疫抗 体 最常见有抗甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺微粒体抗体 抗甲状腺过氧化物酶抗体 抗TSH受体抗体以及抗甲状腺 激素抗体 抗T3 T4 3 5 其中抗甲状腺激素自身抗体 抗 T3 T4 与其它一些甲状腺激素自身抗体相比在甲状腺疾病 的发生率较低 这些抗体的生物活性还不清楚 许多学者认 为 抗甲状腺激素自身抗体 抗T3 T4 不影响甲状腺功能 但自身抗体的存在可干扰甲状腺激素的免疫法测定 影响激 素测定的真实性 特别是用第二抗体分离抗原抗体复合物 其结果可引起假性增高 常与临床表现不一致 本文结果提示 正常人群中甲状腺自身抗体阳性的发生 率较低 甲状腺功能异常患者中甲状腺激素自身抗体阳性检 出率达1414 国外报道 甲状腺激素自身抗体阳性在甲状 腺功能异常患者的发生率差异很大从10 40 这些差别 主要是试验对象分组的不同 标记物所用的天然或类似物也 是有差异的 本文的结果与大多数的报告相近 参考文献 1 Kohse KP Wisser H Antibodies as a source of anal ytical errors J Clin Chem Clin Biochem 1990 28 881 2 Sakata S Nakamura S Miura K Autoantibodies a gainst thyroid hormones or iodothyronine Ann intern Med 1985 103 579 3Beever K Bradbur y J Phillips D et al Highly sensitive assays of autoantibodies to thyroglobulin and to thyroid peroxidase Clin Chem 1989 35 1949 4 Vol pe R Autoimmune endocrinopathies aspectsof pathogenesis and the role of immune assays investigation and management Clin Chem 1994 40 2132 5 Feldt Rasmussen U Anal ytical and clinical perfomance goals for testing autoantibodies thyroperoxidase thyroglobulin and thyrotropin receptor Clin Chem 1996 42 160 2004 11 03收稿 瘦素与2型糖尿病患者微血管病变关系的探讨 大连医科大学附属第二医院核医学科 116027 曹慧玲 郭冬梅 摘要 目的 探讨瘦素与2型糖尿病患者微血管病变的关系 方法 对照组 糖尿病无微血管病变组及糖 尿病微血管病变组各30例 其中糖尿病微血管病变组包括糖尿病肾病25例 糖尿病视网膜病变12例 同时合 并DN与DR者7例 检测血清瘦素 胰岛素及血糖浓度 分析瘦素水平与其它指标的相关性 结果 对照组 无微血管病变组及微血管病变组血清瘦素浓度分别为 7 120 21 11 l L 7 195 31 78 g L及 10 126 41 37 g L 糖尿病微血管病变组显著高于无微血管病变组 t 2 18 P 01 05 及对照组 t 2 71 P 0101 而后 两者间无显著差异 瘦素浓度与体重指数 胰岛素呈正相关 r 0 29 P 0105 r 0 34 P 0 01 结论 糖 尿病微血管病变组血清瘦素浓度升高 瘦素与糖尿病微血管病变的发病密切相关 关键词 糖尿病微血管病变 瘦素 Study on the Relationship Between Serum Levels of Leptin and Microangiopathy in Patients with Type 2 Diabetes Cao Huiling Guo Dongmei Department of Nuclear Medicine the Second Af f iliated Hospital of Dalian Medical University Dalian 116027 Abstract Objective To evaluate the relationship between serum levels of leptin and microangiopathy in patients with type 2 diabetes Methods Fasting serum leptin with RIA insulin with RIA and fasting blood glucose with oxidase method levels w