高中生物 第一部分《实验二 微生物的培养和利用》课件1 浙科版选修1.ppt_第1页
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文档简介

实验 分离以尿素为氮源的微生物 实验原理 脲或称尿素 是蛋白质降解的产物 人和其它哺乳动物的尿中都含有尿素 有一些细菌含有脲酶 它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源 选择以尿素作为唯一氮源即可分离出此类微生物 实验方法 制备lb完全营养培养基和尿素为n源的培养基 分别培养土壤中的微生物 在完全营养培养基上菌落多 在尿素为n源培养基上只能生长少数的菌落 即能利用尿素的细菌 设备及用品 1 250ml的三角瓶2个2 有盖试管5支 15mm 150mm 试管架3 培养皿4个4 超净台5 移液器6 玻璃刮刀7 酒精灯8 200ml烧杯1个 步骤 1 制备培养基 在60 左右时 将两只三角瓶中已灭菌的lb固体培养基和尿素固体培养基 在酒精灯旁分别倒入两个培养皿中 在水平的超净台上摇匀 平放至凝固 步骤 2 制备细菌悬液 在无菌条件下 将1g土样加到有99ml无菌水的三角瓶中 振荡10min 即成10 2土壤稀释液 依此法制备10 3 10 4和10 5的土壤稀释液 步骤 3 用涂布分离法分离细菌 取10 4和10 5土壤稀释液各0 1ml 分别加入到lb培养基和尿素培养基中 用玻璃刮刀将菌液涂布到整个平面上 步骤 4 培养细菌 将培养甲倒置 在37度恒温箱中培养24 48h 观察菌落数5 观察 全营养培养基中菌落较多 尿素培养基只有少量菌落 思考与练习 1 为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基 答 琼脂是未被纯化的混合物 内含一定的含n化合物 用琼脂糖替代琼脂后 微生物只能以尿素为唯一n源 利于对细菌的筛选 思考与练习 有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用 此类细菌使废弃物降解形成氨后将其利用 防止尿素在自然情况下高温水解形成氨 并进一步形成一些化合物 使土壤板结 思考与练习 3 有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现 此细菌能分解尿素产生氨 氨为碱性 酚红指示剂在碱性下为红色 标志着存在脲酶水解尿素的作用 红色区域大小代表脲酶活性强弱和含量的多少 思考与练习 4 与全营
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