HIF1α蛋白在外阴上皮内非瘤样病变中的表达.doc

HIF1蛋白在外阴上皮内非瘤样病变中的表达作者：刘春艳1,武昕2单位：1.辽宁省沈阳市妇婴医院 产二科，110014;2.中国医科大学附属第一临床医院 妇科，辽宁 沈阳【摘要】目的探讨HIF1α在外阴上皮内非瘤样病变中的表达。方法用免疫组化SABC法检测HIF1α在10例外阴正常皮肤、20例外阴鳞状上皮增生(SH)，20例外阴硬化性苔藓(LS)中的表达情况，同时检测各组织的微血管密度(MVD)。结果外阴正常皮肤组织中无表达，外阴SH中为3.26±0.35，外阴LS中为18.37±2.45，两者比较有统计学意义(P<0.05)。在外阴LS中MVD值为10.34±2.88，低于外阴正常皮肤20.44±3.66, 两者比较差异显著(P<0.05)。与SH中的21.58±2.48相比，差异显著(P<0.05)。结论 外阴硬化性苔癣真皮中微血管密度减少，缺氧诱导HIF1α代偿性增高，可能参与促进血管形成过程。【关键词】 HIF1α 外阴上皮内非瘤样病变; 微血管密度Expression of hypoxiainducible factor1α in vulvar precancer disease LIU Chunyan ,WU Xin.(Shengyang Maternal and lnfant Hospital，Liaoning 110014，China)【Abstract】 Objective To study expression hypoxiainducible factor1α in vulvar nonneoplastic epithelial disorder.Methods Immunohistochemistry method was used to determine the expression of HIF1α and the microvessel density (MVD) in 10 cases of normal vulvar skin, 20 cases of squamous cell hyperplasia, 20 cases of lichen sclerosus.Results The HIF1α was not expressed in normal vulvar skin,with 3.26±0.35 in squmous cell hyperplasia, 18.37±2.45 in lichen sclerosus.Between the two kinds of NNEDV, there as significant difference (P<0.05). The MVD was 10.34±2.88 in the tissues of lichen sclerosis,lower than 20.44±3.66 in normal vulvar skin.There was significant differences between LS and SH (P<0.05).Conclusion HIF1α is highly expressed in hypoxia condition.MVD is reduced in lichen sclerosus, which illustrat existence of microcirculation disorder.The high expression of HIF1α is a kind of compensation.【Key words】 Hypoxiainducible factor1;NNEDV; MVD缺氧诱导因子1(hypoxiainducible factor1，HIF1) 1是目前发现唯一的在特异性缺氧状态下发挥活性的转录因子，由HIF1α和HIF1β组成，其中HIF1α是主要的氧调节亚基。在低氧情况下HIF1α蛋白表达明显增多，与HIF1β亚单位结合形成二聚体HIF1，再与目的基因缺氧反应基因(HRG)结合从而激活目的基因的转录过程。HIF1α有促进血管生成的作用，与肿瘤细胞的凋亡和增殖有关。本研究的目的是检测HIF1α在外阴上皮内非瘤样病变中的表达，探讨HIF1α在外阴上皮内非瘤样病变发生和发展过程中的变化。1 材料与方法1.1 材料 选自中国医科大学附属第一医院病理教研室1998年至2008年经手术切除活检存档的蜡块组织。其中外阴鳞状上皮增生(Squamous hyperplasia,SH)20例，外阴硬化性苔藓(Lichen sclerdus,LS)20例，外阴正常皮肤10例。1.2 方法 采用免疫组化SABC方法。兔抗人HIF1α多克隆抗体(1100)、兔抗人CD34多克隆抗体(180)购自武汉博士德生物技术开发有限公司。1.3 结果判定 HIF1α蛋白主要表达在细胞核或细胞浆中，呈棕黄色细颗粒。随机选5个高倍镜视野(40×10)，计数阳性细胞数。微血管密度(MVD)判断标准:按照Weidner等的评判标准进行。1.4 统计学方法 所有数据资料用SPSS13.0进行处理，各组计量资料的结果采用t检验，P<0.05有统计学意义。2 结果2.1 HIF1α蛋白在外阴上皮内非瘤样病变中的表达 HIF1α蛋白表达的细胞在外阴上皮内非瘤样病变中位于真皮浅层。外阴正常皮肤组织中无表达，外阴SH中为3.26±0.35，外阴LS中为18.37±2.45，两者比较有统计学意义(P<0.05)。见表1。表1 HIF1α蛋白在外阴上皮内非瘤样病变和外阴鳞癌中的表达注*P<0.05。2.2 外阴不同疾病中的MVD值 在外阴LS中MVD值为10.34±2.88，低于外阴正常皮肤20.44±3.66, 两者比较差异有显著性(P<0.05)。与SH中的21.58±2.48相比，差异有显著性(P<0.05)。见表2。表2 外阴上皮内非瘤样病变中MVD值3 讨论人原始造血细胞抗原(human hematopoietic progenitor cell antigen，CD34)2是一种跨膜细胞表面糖蛋白，分子量为105120kd。早期研究表明，该抗原在各系造血干/祖母细胞膜上最后消失。随着研究的深入，进一步发现在一些非造血组织如小血管内皮细胞及其他组织中也有高水平表达，并且由于CD34在新生血管内皮中表达远大于非新生血管内皮，使之成为一种新生血管内皮标记物。外阴皮肤黏膜上皮内非瘤样病变(NNEDV)3是女性外阴皮肤和黏膜组织色素改变和变性的一组慢性疾病，过去称为外阴营养不良或外阴白色病变，包括外阴鳞状上皮增生(SH)和外阴硬化性苔藓(LS)等，流行病学调查认为有2%4%的恶变率，临床病理所见有65%外阴癌伴外阴上皮内非瘤样病变。其病因及发病机制至今尚不清楚，可能与免疫、遗传、内分泌及微循环障碍等有关，但其确切的生物学指标知道甚少。HIF是在缺氧时诱导产生的一类转录因子，其家族中最重要的一个因子就是HIF1，是由HIF1α和HIF1β组成的异源二聚体转录因子，其中HIF1α既是HIF1的调节亚基又是活性亚基，它决定HIF1的活性。在常氧条件下, HIF1α由结构中的氧依赖降解结构域(ODD) 控制，并通过泛素蛋白酶小体途径迅速降解，几乎检测不到HIF1α蛋白。但在缺氧和肿瘤细胞中HIF1α在细胞内积聚，并与HIF1β形成二聚体，通过HIF1αC 末端的转录激活区域(CTAD)诱导辅激活蛋白CBP/P300入核，共同形成大分子复合物，并与缺氧反应基因的缺氧反应元件(HRE)上的HIF1结合位点结合，促进缺氧反应基因的转录，引起细胞对缺氧的一系列适应性反应4。本研究中，HIF1α表达最明显的差异表现在外阴LS和SH的检测中，外阴LS中HIF1α蛋白的表达明显的高于SH(P<0.05)。目前研究认为外阴LS病变可能在真皮层，真皮内的血运缺乏导致皮下组织缺氧，纤维变性，匀质化，真皮内血管减少。从本研究的MVD的检测中可以看到LS组织MVD值明显低于正常皮肤 (P<0.05)。提示外阴硬化性苔癣存在微循环障碍5，局部组织缺血缺氧，诱导HIF1α表达增高，通过作用于VEGF等靶因子而促进组织内的血管生成，因为促进血管生成的因素很多，尽管HIF1α、VEGF表达增加，并未见有LS表皮内血管数目增加，这种表达增高可能是一种代偿性的反应。【参考文献】 1 Semenza GL,Wang GL.A nuclear factor induced by hypoxia via de novo protein synthesis binds to the human erythropoietin gene enhancer at a site required for transcriptional activationJ.Mol Cell Biol, 1992, 12(12):54475554.2 Semenza GL,Agani F,Booth G , et al . Structural and functional analysis of hypoxiainducible factor 1J. Kidney Int,1997,51(2): 553555.3 Sonja AD,Maria MY,Roberto NP,et al.Structural basis for Hif1α/CBP recognition in the cellular hypoxic responseJ.Natl Acad Sci USA, 2002,99(8):52715276.4 Richard DE.Barra E.Guthie E, et al.P42/P44 mitogenactivated protein kinasee phosphorylate hypoxiai