组织工程用水凝胶材料.pdf

V o l 17 20 04 年 12 月 功能高分子学报 Jo u r n alo fF u netion alPolyme r s l 七 少刀J 自 笼浅琴 月 舫祥 宽 组织工程用水凝胶材料 朱文林 段世锋 丁建东 复旦大学高分子科 学系 聚合物分子工程教育部重点实验室 上 海 200 4 3劝 摘要 综述了目前用于组织工程支架 材料的水凝胶 包括胶原和明胶 透明质 酸盐 海藻酸盐 琼脂糖和壳 聚糖等天然水凝胶 聚丙烯酸及 其衍生物 聚 氧化乙烯及其衍生共聚物 聚 乙烯醇 聚磷 睛和 合 成 多肤等合成 水凝胶 并 介绍了可注射性 组织 工程水凝胶 关键词 组织 工程 细胞支架 水凝胶 生 物医用材料 可注射 性 中图 分类号 06 3文献标识码 A 文章编 号 1 8一935 7 2 4 4一 68 一 9 组织工 程学应用 细胞生物学和工程 学原理和方法 从认 识正 常和病理组织结构和功能的关系出发 研究开发生物替代品 以恢复 维 持或改善受损组织和器官的形 态和功能 达 到修 复重 建的目的 它的 出现标志着医学将走出器官移植的范 畴 步 人制 造组 织 和器 官的新时代厂 一3 组织 工程学的 关键技术 之一是制备具 有生物相 容性且可降解吸收的细胞支架 作 为组织工程 细胞 支架 的一大类材料是水凝 胶叫 水凝胶可 定义为在 水中溶胀并 保持大量 水分而 又不溶解的聚合 物 由于聚合物网络中充琢有人 量的水分 使得 整个材料具备了一种流体的性质 这 与充盈有大量水性 液体的机 体组织极其相似 柔软 润湿 的表面以及与组织的亲和大大 减少了材 料对周围组织的刺 激性 使得 水 凝胶聚合物具有良好的生 物相容性 组织工程用水 凝胶按照其来源 可分为天然和合成两大类 天然水凝 胶包括明胶 胶原 纤 维蛋自 透明质酸盐 海藻 酸盐 琼脂糖和壳聚糖等 人工合成 水凝 胶包 括聚丙 烯酸及其衍生物 聚氧化乙烯及 其衍生共 聚物 聚乙烯醇 聚磷睛和 多肤等 本文就上述 水凝胶 在组织工 程 中的应用分 别进行阐述 l 天然水凝胶 1 1 胶原和 明胶 胶原广泛存 在于哺乳动物的皮 肤 骨 软骨和肌 键等组织中 是人体 内数量最多的一种天然聚合物 组成胶原的氨基 酸容易被 细胞受体识别 具 有 良好 的生物相容 性 同时 在体 内容 易被胶原 蛋 白酶酶解 因而胶原是一种应用广泛 的天然生物材料 胶原的物理凝胶 具有热可逆性 力学强度较差 因而在川作 组织工程 支架材料的研究 中 大多数采用化学 交联的胶原 如 采用 戊二醛交 联 几 或者采用 二苯磷酞氮 交联 6 等 从而提高凝胶 的力学 性能 但 由于胶原 批次 间 的差 异 性 能重 复性 差 力学性能不强等缺点 其应用受 到一定程度 的限制 目前胶原 蛋 白主要 用于皮肤匡 血 管 8 一 肝脏 一 了 小肠 等组织 器官的修 复重建 明胶为胶 原 的变性 产物 分 为A B 两大类 A 类 明胶 是 胶原经酸处理的产物 B 类明胶是胶 原经碱处理 的产物 Y a m am o t 等仁 采用 明胶 用作生长因子的释 放载体 以促进组织工程化新生组织 收稿日期 200 4一0 7一22 基金项目 国家自然科学基金 N o 2982510 9 N o 201740 06 N o 2022 1 402 N o 2 3 7 401 5 两个基 地 项日 高 等学 校青 l 教吵 教学和科研奖励基金 9 7 3项目 N o G199 90 543 0 6一0 3 863项目 N o 2004AA2 1517 卜海市科技发 展 从 金以及重 点实验卞 高级访问学者基金资助 第一作者简介 朱文 197 1一 男 湖南辰溪人 博士研究生 研究方向 生物医用高分子 材料 组织土 程 E 一n 1 l i l zll w l扣 ey0U co m 通 讯联系人 丁建东 男 教授 博导 研究领域 生物医用 高分子材料 组 织工程 药物缓释 E 一m a i l d d ln 已 fu d 阴 一d 690 朱文 段世锋 丁建东 中血管的形成 1 2 纤维蛋白 纤维 蛋白是血液成份之一 在组织工程 中可用作 自身的组 织修 复支架材 料 由于来源于自体 因而 本身或其降解产物无毒性 或产生炎症反应 室温下 由于凝血 酶的作 用 纤维蛋 白原发生酶 聚合反应得 到纤维蛋 白凝 胶 2二 纤 维蛋 白凝胶 可用于骨骼 肌 1 s 平滑 肌 们 软 骨沁 组织 工程等领域 纤维 蛋 白凝 胶也可与其 他天然 凝胶混 合使用 如采用胶原一纤 维蛋白混合凝胶用作关 节软 骨细胞支架 司 在体外 生理环境下培养 3周后 软骨细胞分 泌n型胶原 并形成 有弹性和一定强度的组 织工程人工软骨 1 3 透明质酸盐 透 明质酸盐为 细胞 外基质之一 是由氨基 葡聚糖 GAG 组成的一 种多糖 其 化学结 构式 如图 l所 不 场a iu r 垃c 留i ch itosa n Fig 1Chemie alstru etur eofhyaluro niea eid ehito s an an d s o dium alginate 透明质酸可以与多种酞脐化合物 l v 幻 如 3 3 一二硫代双 丙酸二酸脐 1 3 5 一苯 三狡酸三酞麟 聚乙二 醇 一二胺 四丙 酸四酞麟等通过共 价交联形 成水凝 胶 透 明质酸 盐水凝 胶在体内的降解 由透 明质 酸酶 酶 解过程 来完成 透 明质酸水凝胶 在组织工程领 域 中已广泛应 用在人工皮肤 叼 伤口愈合 z 0 以及 软骨细 胞培养 1 等方面 1 4 琼脂糖 琼脂 糖是一种从海藻 中分离 出来的多糖化合物 琼脂糖凝胶具有热可逆性 在冷水 中溶胀 在加热 条件下凝胶 溶解 琼脂 糖的这种 物理凝胶为 双螺旋结构卿 相连区域为 多链聚集而成 因而在 凝胶本 体 内存在大量网络结构 这种物理凝胶的网孔大 小以及凝胶的强度与琼脂糖在水溶液 中的浓度有关 一浓 度越低 网孔越大 凝胶强度越 小卿 将壳聚糖共价连 接 到琼脂糖 凝 胶上 发 现 明显有助于轴突 的生 长田2 采用CD P GYIG S R多 肤改性 的琼脂 糖拟用作细胞外基质 可诱导神经突的生长脚 1 5 壳聚糖 壳聚糖又名N 一脱 乙酞几丁质 其中含有不到 4 0 的N 一乙 酞基 一 D 一氨基 葡糖 其化 学结构 式亦 如 图 1所示 壳聚糖通 过与离子 的相 互作用嘟 或用戊 二醛交联田 可形 成凝胶 壳聚糖 的叠 氮衍生物 用 紫外光 引发交联可形 成凝胶吻 壳聚糖的化学结构 同天然 的氨基葡糖相 似 因而具有良好的生物相容 性和低毒性 其降解可通 过酶解过程 如几丁质酶 或溶菌 酶来完 成 但由于壳聚糖含有胺基和比较高的 结晶度 因而很难溶解于一般的有机溶剂和中性 的水介质 中 但在酸性溶液中溶 解 因此许多研究 者通 过改性的方法以解决其溶 解 度的问题卿口 因为其 良好的生物相 容 性 壳 聚糖已用作组织 工程 软骨支 架 如Ma tt h ew 等咖 川通过冷冻干燥制备了多孔的壳聚糖支架 并考察了温度对 孔结构以及多孔支架 力学性 能的影响 姚康德 等叫也 对冷冻干燥 法制备的壳 聚糖多孔支架 进行了深人研究 1 6 海藻酸盐 海藻酸盐 是另一种从褐 藻 中分离出来的天然多糖 其化 学结 构式亦 如图 1所示 由于其 良好的生 组织工程用水凝胶材料 物相容性 低毒性和价格的相对低廉 被 广 泛地 应用在 药 物和组织 工 程等医疗 领 域 s z 33 在 二价 离 子 如C aZ十 M犷 B aZ S r 等存在下海 藻酸盐形 成凝胶哪 尽管海 藻酸盐有许多 的优 点 但由于二价 离 子很容易 与凝胶周 围介质环境 中 的离子 发生交换 且这 一过程很 难控制 也无法避 免 因而凝 胶在离子介 质环境 中易溶解 失 去凝胶 的特性 在一 定程度 上限制了海 藻 酸盐凝 胶 的应 用 除此之 外 由于其 具有 强的亲水性 海藻酸盐对蛋 白质粘附较 差 缺乏对细胞 特 异性吸附位 点 许多 研 究者对海藻 酸进 行改 性 如Mo on e y 等 s s 研究了 R G D A rg G l y 一A sp 共价 连接 到海 藻 酸盐凝胶 以改进 其对 骨骼肌 细胞 的粘 附性 促进其增殖 C o he n 等嘟 研究了经冷冻干燥法 制备的 由Ca 交 联形成 的海 藻酸 盐多孔 支架 由 于其对 细胞的粘附力差 在植入肝细胞体外 培养2 4 h后发 现 9 0 的细胞 发生 团聚 细胞 成球形 但继续 培养 4d后 细胞分 泌纤维粘连蛋白 表明尽管肝 细胞不粘 附海藻 酸盐 水 凝胶 但细 胞 能正常表 达其功 能 相比而言 骨细胞与海藻 酸盐水 凝胶 的相 容性较好 2 合成水凝胶 2 1 聚丙烯 酸类及其衍生物 聚甲基丙烯酸2 一经 乙酷 PHEMA 是 一类研究比较多的水凝胶 3 7 化学结构式如 图2所 示 CH 3 壬CH Z一C头 C 一戒二H Z一C HZ一OH PH EMA CH 3 毛CH Z一C头 C0 NH CH 3一CH一CH3 PNIPAA m H O毛CH ZC HZO头H PEO H eH CHZ 去 He H Z m eH ZCHZ H 毛CH Z一C H 头 PE PP PE O Fig 2Chemieal str u etureofP H E MA PN IPA Am PEO PEO PP仔PEO an dPV A PHEMA已广泛应用 在医疗领 域如用作隐形眼镜和药 物控释体系嘟 组织 工程 领域 中 采用冷冻 干燥或粒子浸 出的方法 制备多孔 的 PHEMA 水 凝 胶 用作 软 骨组 织 重建 支 架材 料 3 9 PHEMA 在生 理 环境下不能 降解 因此Me yv i s 等 0 合成 了葡 聚糖改 性 的 PHEMA 水 凝胶 该水凝胶 可以通 过 酶解 的作 用在体内完全降解 Pa rk 等阳 还制备了寡聚乳 酸接枝 改性 的 PHEMA 水凝胶 聚N 一异丙基丙烯 酞胺 PNI PA Am 是另一类 聚丙烯酸类水凝胶 化学结构式 如 图 2 所示 该水凝 胶是热可逆的 其特点在于一 定浓度 的PNI PAA m水溶液存在一 个低 临界共 溶温 度 LCS T 当温度高 于 LC ST 时 溶液发生相转变 形 成物理凝 胶 PNI PAAm 凝胶 的 LC ST 大约在 3 2 左右 接近人体温 度 利用这 一特性 PNI PAAm凝胶已被用在药 物控释闭 等领域 在室温或 低 温下可将 PN I PAA m水 溶液同细胞混合均匀 然 后通过注射的方法将 PN I PA Am水 溶 液同细胞的混 合液 植人 到 预修复 部位 在体温下 PNI PA Am 水溶液 凝胶化将 细胞固定 通过 与周 围组 织 的养分和废 物 的交 换 细 胞迁 移 增 殖 分化 分泌胞外摹质并逐渐形 成新 组织 4 3 一们 N 一异 丙 基丙烯酞胺同丙烯 酸 甲基 丙 烯酸等 共聚水 凝胶用 于培养细胞 以及软骨和胰腺 组织 工程嘟 6 但 PN I PAA m水凝胶 在体内不 能降解 且乙烯 基 单体和交联 剂分子都有毒性 有致癌致 畸 的可能性 H u h等阳 在P NI PA Am上接枝共聚葡 聚糖后 该 共 聚物在磷酸缓冲溶 液 中仍然具有温敏性且可降解 因而可随着 温度变 化调整其降解速率 2 2 聚 权化乙烯及 其衍生共 聚物 聚氧化乙烯 PEO 由于其良好的生 物相容性和低 毒性 已经 被美国食品和药 物管理 局 FDA 批 准 朱文 段世锋 丁建东 应用 于医疗领域 其化学 结构式亦如图 2 所示 聚氧化乙烯具有高度的亲水性 可由环氧乙烷经开环聚 合得 到 通过将P EO丙烯酞化后 使得其分子 主链两端带 上双键 制 成 PEO 大单 体 然 后采 用紫外光 引发该 大单体水溶液得 到PEO水凝胶附 也可在PEO大单体中引人 一经基 酸 使得交联 的P EO水凝 胶可水解团 通 过与二环己基碳二 亚胺 DC C 反应 在 PEO 水 凝胶 中引人A la P r 一G l y Le u 多肤序 列 使得改性后的PEO水凝胶在体内容易酶 解 可用作组织修复支架咖 采用星形 PEO 聚合 物通 过 辐射交 联在分子链上共价 连接半乳糖 制备单糖改性 的PEO水凝胶 在凝胶表 面植人肝细胞后 肝细胞 呈现 出对糖的特异性粘附 s l 为改善细 胞对 PE G 水凝胶的粘附性 Ma n n 等脚 合成了多 肤改性以及 用 作改善细胞 特异性吸附的R G D改 性 的PE G水 凝胶 用作 组织 工 程细胞支 架模拟 细胞外基 质 发 现 平滑肌细胞在多肤改性 的水凝胶酶 解过 程 中以及在 R GD 改性 的水凝胶 中仍然保 持细胞 活性 细胞 发 生迁 移 增殖并且分泌胞外基质 许 多PEO与其他单体的共聚物被应 用在药物 释放领域陶 叼 其中研究 和应用较多 的一类 是PE O 和PPO 聚氧化丙烯 三嵌段共聚物 PE仔PP仔PEO 该类 聚合物商品名为 Plu r o n i 或Pol o xamers 根 据其分子量大小和 PEO 含量 的不同 该嵌 段共聚物一定浓 度的水溶液在体温下能 形成物 理凝 胶 体系 发生 了相转 变 在低温下 体系呈均相 的溶液状态 在高温下 体 系形成胶束 层状 或者柱状相结构 且相 互形成物理交 联网络 利用 这一特点 许多研究者将 PE仔PP仔PEO 三嵌段 共聚物用在 药物释放 体 系 以提高药物在体内的渗透性 在组织工程 方面 由于物理凝胶 的力学强度较差 PEGPPGPEO 三嵌段 共 聚物水凝胶 主要用于软组 织的修复 如软骨饰 5司 等 由于该嵌 段共聚物在体内无 法降解 且具有 较 强的亲水性 不 易与蛋 白和细胞粘附 因此合成出许多 两嵌段 三嵌段甚至多嵌段 的PEO一PL A类共聚 物围 这些嵌段 共 聚物水溶液具有 温敏性 以大块凝胶 3 4 5幻 或微粒状呻 用于包裹生物活性分子或药 物 采用 注射的方法植入体内 或是将这些 嵌段共聚物 交联 聚合形成 化学网络 结构 包裹 细胞 用作组 织 工程支架 60 2 3 聚乙烯醉 聚乙烯醇 PV A 分 子 链上含有 大量的经基 因而具有 良好 的水 溶性 化学 结 构 式 如 图 2 所 示 PvA 水凝胶可采用戊二醛 s l 电子束 6 2 等引发化 学交 联 的方法制备 也 可以通 过多 次冷冻干 燥呻 的 方法得到 通 过对 PV A 化学 改性 可使得 P VA 分子链侧基带上可化学 交联 基 团 如采用 氨基丁醛 二 乙基乙缩醛改性 的PV A通过紫外光 引 发形 成PVA水凝 胶包 裹人真 皮成 纤维细胞琳 体外培养 2 周 后 细胞仍保持活性 并分泌胞外 基质蛋白如 经基脯氨酸 用R G DS A rg G l y As P 一Se r 改性PV A水 凝胶 后 成纤维细胞 在凝 胶表面贴 附 铺展 Ko ba y a s h i等哪 等用R G D S改性PV A 凝胶以加强 角膜上 皮细 胞对此材料 的粘 附性 2 4 聚磷睛 聚磷睛在生理 条件下可降解 因而可能在众多的医疗领域中获得 广泛 的应用 6 6 其降解不同于 a 聚醋 聚酸酥 聚原 酸酷等以主链 断裂为 主的合成高分子生物材料 而是侧基 的断裂团 根据侧基 的不同 聚磷腊有不同的结构形 式 如聚 芳香 烷基 一磷睛 6 s 聚 氨基 酸 醋 一磷 腊 6 0 以 及具有温敏性 的聚 甲氧基 聚乙二醇 一磷睛 明等 聚磷睛凝胶可分为非离子和离子型两大类 非 离子 型聚磷睛侧基含有葡糖基或丙三基田件离子型聚磷腊侧 基含 有二价离子 因而 可用 在对 pH 或离 子敏 感环境下对蛋 白质药物控释 厂 叼 聚磷睛可应用 骨骼肌 的再 生协 包埋杂交瘤 细胞郎 等 2 5 多肚 蛋 白质是构成生物体组织和器官的主要成分 人们对模拟天然蛋白合成多 肤进行了深 入 的研究 目前多肤合成 的标准方法是 固相合成法 近些年来 通过基因工 程方法 也得 到了一些 具有 天然多 肤序 列的聚氨基酸 如Ca pP en 等哪 以具有预定序列 结构的 DNA 为模板 将其插 人基因工 程化的细菌染 色体中 合成 出结构能裁剪的 弹性 硬度 降解性等性质可调控的多肤 利用此方 法 Tir r e ll等 等合 成 出丝状蛋白 并将G l y 甘氨 酸 一A l a 丙氨酸 序列引人这些合成蛋 白中 得到 对 pH 或温度敏感 的且 可逆的凝胶 川 还有 人合成了以天然 弹性蛋白序列Gly 甘氨酸关Va l 撷氨 酸 一P r o 脯氨酸 一G l 汀 甘 氨酸 为重复单元的聚氨基酸 并指 出在 组织 工程 中可用作细胞外基质呻 妇 但上述 技 术在 经济上不 组织工程用水凝胶材料 适合大规模批量 生产 也 很难根据需 要获得 不 同性质 的聚氨基 酸 3 可注射性材料与高分子凝胶 组 织工程支 架按照塑形特点可分为 预塑 形多 孔支架材 料 8 l s z 和可注射性材料 8 s 前者是 将生物 材料在体外预先制成具有与 预修复的组织或器 官缺损 部位类似的特定形 状 且具有孔 结构的三 维多孔 细胞支架 s 然后植人 细胞 进行组织构 建 再通 过手术的方法将构建植 人体内缺损 部位 由于预修复 的组织或器 官缺损形 状复杂且非常 不规则 因此很难做到预 塑形的支架其形状 与修复部 位完全 吻合 且 制备预塑形 多孔支架 工艺过程较复 杂 另外需 通过手术 的方法植人构建 很容易造成植人部位的手术创 伤及并发炎症 同预 塑形多孔 支架材 料相比 可注射水凝胶材料有其明显的优越性 通 过注射的方法将 具有一定流 动性的生 物材料植人体内 很容易充满整个具有不 规则形状 的缺损部位 手术创伤非常微 小 且易于操作 但可注射性材料力学强度 较差 一般只能用作软组 织 伤口愈合的修复 高分子水凝胶 是 一种 很好的注射 性材料 聚合物 水凝胶网络中充斥大量的水分 在结构上 与机体组 织相似 具有 良好的 生物相容性 如前所述 水凝胶 的形成通 常是通过化学键 氢键 离 子键 结晶区或疏 水相互作用将亲水的聚合物 分子链交联得到 通过氢键 离子键 结 晶区或疏水相互作用等物理方 法交联得 到 的水凝胶 其最 大特 点是 凝胶过程 的可逆性 称为 物理凝胶 或 可逆凝胶 通 过化学键交联 而得到 的水凝胶是一 种永久性 凝胶 即凝胶过程 不可逆 根 据对外界刺激的响应 水凝胶可分为两 类 一类 是 普通水凝 胶 一类 是智能水凝胶 普 通水凝 胶 通常对 电荷 p H 温度 光电或其他刺 激不特别敏感 智能水凝胶则相反 往往 对 pH 温度 光电等很小 的变化 凝胶体积有较大 的变 化 s s 疏水基团和电荷性往 往对于水凝胶的体积相 变有 重要影 响 在组 织工程和药 物释放体系 中是研究和应 用较 多 的是高温 收缩型水凝胶 即具有 LC S T 低于 L C ST时凝 胶体系呈膨胀状态 聚合物分子链伸展 高于 LC ST 时聚合 物分子链 段 间疏 水作用变强 网络结 构 收 缩 凝胶体系呈收缩状态 因而可在低于 LC ST 温度下将凝胶水溶液 同生物 活性 分子 如细 胞或 蛋白质 类药物等混合均匀 然后 通过注射的方法将 混合溶 液植人体内 在体温 高于 LC ST 下水溶液凝胶化将 生物活性分子 固定 从而发挥其生 理功 能 8 s 一8 8 另一类可 注射性高分子水凝胶 是普通 水凝胶 如聚乙二醇 聚乙烯醇等 将改性 后 的高分子 同生物 活性分子混合溶液通过 注射的方法 植人体内 然后 通过可见 或紫外 光照引发 改性 的高分子化学 交联 形 成网络结构将 生物活性分子固定 由于光 引发化学交联水凝胶具有可操作 性和相对低毒性 近些 年来 引起了许多科研工作者 的重视 3 La n g e r 等 s s 将 PEO大单体溶液通 过注射的方法植人皮 下 研究 经 皮萦外和可见光光照引发PEO大单体溶 液形成凝胶 采用 不 同厚度 的人体皮肤和猪的皮肤为模型 研 究结 果表明 采用可 见光 经皮 引发光 聚合反应比紫 外光更 有效 对于 1 5m m 厚 的皮肤 而言 在可见 光 照 10 0 5 后 P EO 大单体转化率达 到 8 0 将 PE O 大单体溶液 同牛软骨细胞混合后 通过 注射 的方法 植 人裸 鼠皮 下 紫外光 照 3mi n 引发P EO水凝胶 的形成 7周后 发现有新生软骨组织 并 分泌胶原和氨基 葡聚糖 G A G 等细胞外基质 Hu b b e U等 s 0 研究了人包皮 成纤 维 细胞 在光 引发交联 的 多肤 改性 的聚 乙二醇水凝胶表面 的粘附铺展情况 他们发 现无 多肤 改性 的水凝 胶表 面 细胞的粘 附力很 差 仅有 5 的成纤维 细胞 在其表面铺展 当采用R GD多 肤改性后 R G D在 凝胶 表面 浓 度为1 0火 10一 2 mo l m Z 时 有5 0 的细胞铺展开 浓度 为 1 ox 1 0 一 m o l m 时细胞 在凝胶表 面则不 能铺展 有 趣 的是 当采 用 同样浓度 的无生物活性 的 R DG 改性水凝胶 成 纤维 细胞未能在其表面铺展 4 展望 水凝胶因其良好的生 物相容性已被广泛 地应用在 组织 工程 领域中 用 作 生长因子 控制 释放载体和 69 4 朱文 段世锋 丁建东 细胞支架材料 天然高分 子水凝胶细胞亲和性较好 但由于材料 来源 的不 同 材 料批次 间 的差异 明显 材料性能重 复性差 结构与性 能可调范 围窄且 力学性能很难满足不 同条件下的医学要求 合成高分子水 凝胶结构和性 能可精细的调控 且 重复性好 易于加工 力学性 能较好 又可大规模生产 但细胞 的亲和 性较差 因此将两 者的优点结合起来同时制备具有生物 活性的且符合不同条件要求的水凝胶细胞支架 将在组 织工程研究领域里受到更为广泛的重视 通 过注射的方法植 人细胞支架将是组织工程研究的一 个新 方向 参考文 献 Lang e r R V a e a nti JP T i s s ue e ngine er ing J S cien e e 1993 2 60 9 20一92 6 L a nge r R Ide a s a r e lik e hildr en J T e ehnolog y R e view 199 9 102 74一77 商庆新 曹谊林 张涤生 生物工程领城的崭新前沿 组织工程 口 第一届全国组织工程学术交流会论文汇编 上海 1999 1一9 姚康德 尹玉姬 组织工程相关生物材料 M 北京 化学工业出版社 200 3 4 9 一69 R ault l Frei v H u c A etal E valu ationof dif fe re ntchem ie al m ethods f o r r o s二linking ol lagen gel fil m sandspo nge s J J M ate r S ciM ate r M ed 199 6 7 2 15一2 2 1 Chev al lay B Abdul 一Mala k N H erbage D M o us e f ibrobla stsinlon term eultu r e w ithin e ol lage nthree dir n ensio n alseaf f o l ds In 月u e nee o f cr os slinking 喇th diph印y lpho spho ry a zideo n m at石xr eorga niz atso n gro w t h and bios thetieand proteolytie a etivities J JB i om e dMa 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9 14 474一489 Pe rkaC Spitze r RS S c hultzO etal M atri片m ix ede ultur e Newm ethodology f o reho ndroeyteeultu r ea ndprepa ratio nofe arti lag etran spla nts J JB iom ed M ate r R e 20 0 0 49 305一311 YeQ H ubbellJA T u6na M etal Fib五ng ela sathr e e dim ensionalmatrixinea rdiov a s eulartis s u eengin e er i 昭 J E u r JC a r dio一Thor a e S u啥 200 0 1 7 5 87一59 1 Ika riY Fu jikaw a K S chw a rtz sM et 1 lpha 一 一pr oteina s e inh ibito r alpha 一 一antie hym otrypsin o ralpha 2 一mae roglobulin 15 requir ed forv a s e ularsmo oth mus elee ellspr eading in thr e合dimensionalf ibr in gel J JB iolChem 20 0 0 275 1 279 9一12805 M einhart J Fu sse neg ger M H obling W Stabilizatio n of f ibr i n eho ndroevtec onstruets fo r c ar tilag re e onstru etion J A n n pla st Sur g 1 9 99 42 673一678 池光范 候宜 章培标 等 胶原 一纤维蛋白混合凝胶对关节软骨细胞合成分泌 n型胶原的组织学形响研究 C 第三届全国组 织工程学术会议盛第一届中国 国际组织工程会议论文集 成都 200 2 1 78一 18 0 V e re r uysse K P M are c akDM Pre st俪eh GD etal Syn the sisa nd in vitro degr ada tionofn ew polyv 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deh y d e e ro ss link ed ehitos an gelandtheir ef fe etso n 而 er o sphe r e spr epa r atio n an d dr ug r ele a s e J Ca rbohydrPolym 20 0 0 41 389一3 9 6 28 o no K s a itoy Ishiha ra M etal Pho toe ros slinkable hito sana sa biologie ala dh e sive J JB iom ed Mate r R e 200 0 49 2 59 一29 5 29 K ur ita K KO jim a T Shimo j oh M etal syn thesis andsomepr oper t ie s of nonn atur a l r m nopolys aeeha ride s Br anehed ehitinand ehitos an J M aeromole e ules 20 0 0 33 4 7 1 1一4 7 1 6 30 M adihal ly sV M atthew HWT Po ro u sc卜 s an s e a f f o l dsf o rtis sueengin eer ing J Biom ater ials 29 99 20 1 13 3一1 1 42 3 1 s u hJKF M at thew HwT Ap plic a tionof hitos an ba s edpozys ae eha6de biom ate ria一5 in c ar t i一 agetis s u eengin e e五ng re城ew J B iom ater ials 20 0 0 2 1 2589一2598 3 2 shuXZ ZhuKJ s o ng WH N ovelpH一s ensitivecitr ate ross linked hito san filmfo rdr ug o ntr olle dr ele a s e J Inte rJPha r m a 20 01 2 1 2 19一2 8 3 3 D r u尽 JL M o oney DJ Hy dr og els f o rtis s u ee ngin e e ring s c af fold de sig nv a6able s ndap plie atio ns J 氏om ate行als 20 0 3 24 43 37一4 3 51 34 H ubbellJA In j e etable hydrog elcompositions P us Pa tent 6 1 29 7 6 1 2 00 0 3 5 R owley JA M adlam bayanG M o o ney DJ A lgin ate hydr og elsas ynthetieextr a e el lular m atrix m ater ials J Biom ate rials 1 9 99 20 4 5一53 3 6 G lieklisR shapir oL c o hens etal H epatoeyte beha vio r within three dim ensio nalporousalgin ateseaf f o l ds J B i ote ehnol B i o eng 20 00 67 34 4一3 53 37 Flyn n L D a lto n PD Shoiehe t M5 Fiber ter nplatingofpoly 2一h y dr o xyethyl m etha e rylate f o rne uraltis s u eengine e ring J Biom ate rials 20 03 24 42 65一4272 38 LuS X A ns eth K5 Pho topo l帅ed zatio nof multilaminate d poly HEMA hydrogels f o rcontrol ledrele ase J JC o ntr o lle dR e le a se 19 9 9 57 29 1一30 0 39 ox l ey H R C o rkhil lP H TigheBJ etal M a e ropor o us hydrog els f o r biom ediealapplie ations一methodologya nd morphology J Biom ateials 19 9 3 1 4 106 4一10 7 2 40 M eyv is TKL o e S m e d t Se H ennink W E etal Inf l uene eofthe d egr a d ation m eehan ism of hydr ogelsontheirela sti and swelli呀pr ope rtie s dur i ng deg r adation J M a e romole e ules 200 0 3 3 4 7 1 7一4 7 25 41 LimDw ChoiSH Pa rk T G A newcla s sofbiodegr adable hydrog elsster eoeomplex ed bye n a ntiome石e0 119 0 la etide side ehainsofpoly HEMA 一g一O LA s J M a e r omole eula r R apid Com munic ations 20 00 21 46 4一4 71 4 2 刘峰 卓仁禧 温度及 pH 敏感水凝胶的合成及其在生物大分子控制释放中的应用 J 高分子材料科学与工程 1 9 9 8 1 4 5 4 一62 43 Br azelCS Peppa s N A Puls a tile lo e aldelive ryofthr o m bol丫ti andantithrom boti agentsusingpoly N 一is o propyla e rylam ide 一m eth ae ryliea eid h州r og els J JC o ntrolled Rele a s e 19 9 6 3 9 57一64 44 Ser resA Ba udys M K im5w T emperatu r e nd pH 一s ensitive polyme r sforhum anc aleito nin deliv e珍 J Phar m a R e 2996 1 3 196一20 1 45 StileR A Bu饱har d t w R H ealy KE S the sssandchara ete riz ationofin jeetablepoly N 一is op r o pyla e ryla俐de 一ba s ed hydr ogels thats up por ttis suefo r m a tio n in vitro 口 M ae romole eule s 19 9 9 32 7 3 70一73 7 9 4 6 v er non B G utowska A Ba eYH etal T her m al lyre v e r siblepoly Y Dergels fo r biohybdd a rtifieialpanere a s J M a er o mSym 19 9 6 109 15 5一167 47 H uh K M H a sh i J Y uiN etal syn the sisandehar aete riz ationof de xtr an gr afted 喇th即ly N 一isopropy la eryla皿d N 件 dim ethy卜ae职lam ide J M a e r omolChem Phys 20 0 0 202 613一6 一9 48 Brya n t SJ An s eth K 5 The ef fe etofs e af foldthiekn e s so ntis suee呀inee rede a rtilage in photoe ros slinkedpoly ethylene o石de hydr og els J Biom ater ials 20 01 2 2 6 19一6 26 4 9 S awhneyAs PathakC P H ubbellJA Bioe r od ible hydrog els ba s ed o nphotopolyme五z ed poly ethyleneglye ol 一 一po ly a一hy dro xy aeid dia e诊latem a er o m ers J M a er o m ole cule s 1 9 93 2 6 581一587 50 w e st JL H ub be一 1 JA Pol娜ed c 压om atehals w ithdegr ada tio nsite s f o rpr ote a s e involv edin e el ln ugr atio n J M a er omole eules 199 9 32 24 1一24 4 696 朱文 段世锋 丁建东 Lopin a ST w u G G 石f f i th一e 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