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文档简介

1. 电泳的含义带电的胶粒或大分子在外加电场中，向带相反电荷的电极作定向移动的现象称为电泳。显然带电粒子的大小，形状，所带的静电荷多少以及介质的pH，粒子强度粘度等都会影响粒子的电泳速度,从电泳现象可以获得胶粒或大分子的结构，大小和形状等有关信息。2. 电泳仪种类(1) Tiselius电泳仪 在提赛留斯电泳仪中，首先在bb以下部分装上待测溶胶，然后将cc部分与bb部分平移，对准，使管道接通。在cc与bb之间装上超滤液，在bb处有清晰界面，接通上面的直流电源，电泳开始。在电泳过程中可以清楚地观察到界面的移动。如果胶粒带正电，负极一边的溶胶液面升高；如果胶粒带负电，则情况刚好相反。(2) 界面移动电泳仪 在界面移动电泳仪的中间漏斗装上待测溶胶，U型管上端装电极，底部两个活塞的内径与管径相同。实验开始时，打开活塞，使溶胶进入U型管，液面略高于活塞时，关上活塞，并把活塞上部的溶胶吸走，并小心的加入分散介质，使两壁液面等高。接通电源，小心打开活塞，观察液面的变化。根据通电时间和液面升高或下降的刻度，可以计算电泳速度。若是无色溶胶，必须用紫外吸收或其它光学方法读出液面的变化，否则这种方法不好用。另外要选择合适的介质，使在电泳过程中，始终保持清晰的界面。(3) 显微电泳仪 显微电泳仪方法简单，测定快速，胶体用量少，可以在胶粒本身所处的环境里测定，电泳速度和电势。但该方法只限于显微镜可分辨的质点，一般在200nm以上。 装置中电极用铂黑电极或其它可逆电极，观察管用玻璃制成， 以便用显微镜直接观察。电泳池是封闭的，电泳和电渗会同时进行，所以物镜观察的位置要选在电渗流动刚好与反向流动相抵消的位置,即称为静置层的位置。这时观察到的胶粒运动速度能代表真正的电泳速度。(4) 区带电泳 区带电泳是将惰性的固体或凝胶作支持物，在其上面进行电泳，从而将电泳速度不同的各组成分离。区带电泳实验简便易行，分离效率高，样品用量少，是分析和分离蛋白质的基本方法。 最初用滤纸作为载体的称为纸上电泳，实验时先将一厚滤纸条在一定的pH缓冲液中浸泡，取出后两端加上电极，在滤纸中央滴少量待测溶液，电泳速度不同的各组分即以不同速度沿纸条运动，经一段时间后，在纸条上形成距起点不同距离的区带，区带等于样品中的组分数。将纸条干燥并加热，将各蛋白质组分固定在纸条上，再用适当方法，进行分析。 如果用淀粉凝胶，琼胶，或聚丙烯酰胺等凝胶作为载体，则称为凝胶电泳，将凝胶装在玻管中，电泳后各组分在管中形成圆盘状称为圆盘电泳。如果将凝胶扑在玻板上进行的电泳称为
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