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淋巴细胞亚群分析的临床应用 北京协和医院免疫科赵丽丹 如何测定 结果分析 1 淋巴细胞总数 T淋巴细胞计数NK细胞计数B淋巴细胞2 CD4 T细胞比例及计数CD8 T细胞比例及计数CD4 T CD8 T比例3 第二信号受体CD284 细胞免疫异常激活 报告单 外周血淋巴细胞 T淋巴细胞 NK细胞 外周血淋巴细胞亚群 CD16 CD56 T辅助细胞 CD3 CD19 T8细胞 B淋巴细胞 CD4 CD8 Na veT CD45RA CD45RO MemoryT CD45RA CD45RO CD95DRCD38 CD4 CD8 活化标志 细胞毒T细胞 抑制型T细胞 CD28 CD28 增殖标志 Ki 67 体液免疫和细胞免疫 产生抗体 中和胞外病毒 细菌外毒素 B细胞的发育 B细胞在风湿病中的免疫效应 活化的B细胞1抗原呈递 提供共刺激信号 活化T细胞 2产生自身抗体 介导II型 III型超敏反应 3调节其他免疫细胞如DC4产生的致炎性细胞因子 TNF 肿瘤坏死因子 IL 6 白介素 6 Lymphotoxin 淋巴毒素 IFN 干扰素 Anti DNAAnti SSA RA滑膜中的B淋巴细胞 RA关节滑膜可出现弥漫性或滤泡样淋巴细胞浸润 甚至可形成生发中心 其中的B细胞可分化为浆细胞并产生RF 免疫缺陷病 X连锁无丙种球蛋白血症XLA外周血和淋巴组织中B细胞减少或缺失 Ig缺乏男性婴幼儿 6 9月发病 反复化脓性感染普通变异性免疫缺陷病CVIDIgG显著低下 B细胞减少或正常 na veT减少青壮年 反复化脓性呼吸道感染选择性IgA缺陷 选择性IgG亚类缺陷高IgM综合征 继发 肿瘤 药物 营养不良 X连锁重症联合免疫缺陷SCIDT细胞和NK细胞减少 B细胞可正常新生儿 婴幼儿 病毒 PCP 念珠菌 败血症 理想的B细胞靶向治疗应为清除病理性B细胞和 或促进保护性B细胞的扩增和功能 Anti CD20 抗CD20单抗治疗 淋巴细胞亚群监测在抗CD20单抗治疗中的临床指导意义 初始治疗B细胞显著增多 应用价值 CD4 T细胞显著减少 应用风险 治疗中的监测B细胞清除效应 预测治疗效果 临床效果与B细胞清除相关 长寿命浆细胞 随访中的病情监测B细胞恢复 病情复发 强化治疗 感染风险化脓菌 NK细胞 杀伤肿瘤细胞 病毒感染细胞 胞内寄生菌 分支杆菌 利什曼原虫 李斯特菌 真菌 寄生虫 自身免疫性疾病时降低 病毒感染时升高表面标志物 CD3 CD16 CD56 NK细胞 T淋巴细胞 从基础到临床 T淋巴细胞 CD3 TCR复合体 识别MHC 抗原肽复合物CD3 CD4 辅助性T细胞 Th 分泌细胞因子 调节免疫应答CD3 CD8 细胞毒T细胞 Ts 杀伤靶细胞 抑制功能 双重识别 MHC限制性 MHC II CD4 MHC I CD8 I类分子表达于所有有核细胞表面 提呈内源性抗原 病毒 胞内病原体 肿瘤 II类分子表达于专职APC 胸腺上皮细胞 提呈外源性抗原 胞内病原体 病毒 立克次体 结核杆菌 布氏杆菌 沙门氏菌 李斯特菌 军团菌 新型隐球菌 原虫 肿瘤免疫抗移植排斥 第二信号分子CD28 功能标记 T细胞活化的双信号 TCR MHC 抗原肽 CD28 B7 T4细胞亚群及免疫效应 体内免疫功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理 病程 预后 监测 指导临床治疗方案 淋巴细胞亚群 从基础到临床 如何看淋巴细亚群检测报告 B细胞 T细胞和NK细胞比例和绝对计数 自身免疫病 肿瘤 免疫缺陷病 药物 感染风险 疗效评估 T4和T8细胞比例和计数Na ve细胞和memory细胞比例和计数功能亚群CD4 CD28 和CD8 CD28 激活亚群HLA DR CD38 异常细胞免疫激活提示微生物感染 如HIV CMV和EBV等 激活的程度与感染的严重程度密切相关 CD3 T淋巴细胞 CD3增高 见于甲状腺功能亢进 甲状腺炎 重症肌无力 器官移植后排斥反应 慢性活动性肝炎 瘤型麻风 恶性肿瘤 ALL SLE等CD3减低 见于麻疹后 麻疹脑炎 腮腺炎 流感 带状疱疹 皮肌炎 SLE T4 T8淋巴细胞 CD4增高 见于RA SS等 CD4减低 见于SCID CVID PBC 慢性活动性肝炎 AIDs等 CD8增高 见于乙型肝炎 传染性单核细胞增多症 麻风 AIDs等 CD8减低 见于RA SS等 CD4 CD8 的比值 应用 评价自身免疫失调免疫缺陷监测GVHD 较移植前显著 GVHD风险 正常参考值为1 4 2 5 2 5 细胞免疫功能过度活跃 1 4 病毒感染 恶性肿瘤 CD4 CD81 4 2 5 CD4 CD8 2 5 CD4 CD8 1 4 病毒感染 HIV AIDsEBV 传单 CMV流感HBV 自身免疫病 SLEMS 肿瘤及其他 淋巴瘤白血病实体肿瘤 I型DMGVHD变态反应RA Na veT细胞 CD4 CD45RA CD45RO CD62L Na veT细胞亚群减少容易发生机会性感染CD28 的T4或T8细胞亚群减少的个体容易发生机会性感染CD25分子 HLA DR分子和CD38分子是细胞活化标志 异常的T细胞免疫激活提示病毒感染感染 如HIV CMV和EBV等 移植后CD4 CD8比值较移植前明显增加 则预示可能发生排斥反应 淋巴细胞亚群与疾病 SLE 淋巴细胞总数减少T4细胞减少 T8细胞正常或升高功能亚群CD28 表达减少活动期激活亚群明显增加 移植 移植后的细胞免疫功能评估移植排斥 CD25 表达显著 CD4 CD8 GVHD移植后CMV感染 T4细胞显著下降 T8比例明显增高 CD28表达下降 HLA DR CD38表达升高 NK和B细胞数量降低 CD4 CD8比值 0 2必须停用免疫抑制剂 凶险感染 HIV AIDS 淋巴细胞总数显著减少CD19 CD38 活化B细胞增多主要感染T4细胞 T4细胞持续性下降 功能受损 异常免疫激活 na ve细胞减少 CD28 表达减少 T8细胞正常或升高 晚期也减少 CD38 DR CD95异常升高 且与HIV血浆RNA病毒载量有良好相关性 T4细胞数量的减少 第一期 原发感染期 T4细胞数量一过性迅速减少第二期 无症状期 T4细胞数量持续缓慢减少第三期 AIDS前期 T4细胞数较快速减少 T4细胞数在350 mm3 200 mm3 第四期 AIDS期 T4细胞数再次快速减少 T4细胞数和病毒载量 预测机会性感染 把握治疗时机治疗时机 T4105 ml T4 200 ul 预防性抗PCP治疗 T4细胞数与机会性感染 T4 500 ul 较少出现机会性感染 T4350 500 ul HSV 带状疱疹病毒感染 T4200 350 ul 皮肤霉菌 口腔念珠菌 HSV 带状疱疹T4100 200 ul PCP 隐球菌 弓形体T4 100 CMV 鸟分支杆菌 HIV感染时T4细胞的减少规律 T4细胞 cell mm3 800400 急性感染期 无症状期 艾滋病前期和艾滋病期 CD4 病毒载量 艾滋病人经HAART后的CD4 细胞恢复规律 1 9 0 17 l d CD4 淋巴细胞 0 05 l d 记忆CD4 细胞 0 11 l d NaiveCD4 细胞 0 5 1 4 3 6 9 12 18 50

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