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班级：分析09310 姓名：陈涛 学号：14实验十三 硫代巴比妥酸比色法测定山梨酸及山梨酸钾1原理利用自样品中提取出来的山梨酸及其盐类，在硫酸及重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸作用产生红色化合物，其红色深浅与丙二醛浓度成正比，并于波长530nm处有最大吸收，符合比尔定律，故可用比色法测定，反应如下：（略）2试剂。（1）硫代巴比妥酸溶液：准确称取0.5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中，加20mL蒸馏水，然后再加入10mL氢氧化钠溶液（1mol/L），充分摇匀。使之完全溶解后再加入11mL盐酸（1mol/L），用水稀释至刻度。此溶液要在使用时新配制，最好在配制后不超过6h内使用。（2）重铬酸钾-硫酸混合液：以0.1mol/L重铬酸钾和0.15mol/L硫酸以1：1的比例混合均匀配制备用。（3）山梨酸钾标准溶液：准确称取250mg山梨酸钾于250mL容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，使之成为1mg/mL的山梨酸钾标准溶液。（4）山梨酸钾标准使用溶液：准确移取山梨酸钾标准溶液25mL于250mL容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀，使之成为0.1mg/mL的山梨酸钾标准使用溶液。3仪器。(1)721型分光光度计。(2)组织捣碎机。（3）10mL比色管。4分析步骤。（1）样品的处理：称取100g样品，加蒸馏水200mL，于组织捣碎机中捣成匀浆。称取此匀浆100g，加蒸馏水200mL继续捣碎1min，称取10g于250mL容量并中定容摇匀，过滤备用。（2）山梨酸钾标准曲线的绘制：分别吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL山梨酸钾标准使用溶液于200mL容量瓶中，以蒸馏水定容（分别相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0g/mL的山梨酸钾）。再分别吸取2.0mL于相应的10mL比色管中，加2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液，于100水浴中加热7min，立即加入2.0mL硫代巴比妥酸溶液，继续加热10min，立即取出迅速用冷水冷却，在分光光度计上以530nm测定吸光度，并绘制标准曲线。（3）样品的测定：吸取样品处理液2mL于10mL比色管中，按标准曲线绘制的操作程序，自“加2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液”开始依次操作，在分光光计530nm处测定吸光度，从标准曲线中查出相应浓度。5.实验数据： C0.0000000.0000020.0000040.0000060.0000080.00001A0.0000.0120.0180.0210.0230.028试样 吸光度为1.285浓度C=g/ml5结果计算。式中：X1样品中山梨酸钾的含量，g/kg；X2-样品中山梨酸的含量，g/kg；A-试样液中含山梨酸钾的浓度，mg/mL；m称取匀浆相当于试样的质量，g；2用于比色时试样溶液的体积，mL；
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