大肠埃希菌及克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶的检测及耐药性分析.doc

大肠埃希菌及克雷伯菌产超广谱内酰胺酶的检测及耐药性分析【摘要】目的：研究3 a中大肠埃希菌、克雷伯菌ESBLs的检出率及对常用抗生素的耐药情况。方法：对2001年2003年分离的837株大肠埃希菌、207株克雷伯菌用标准纸片扩散确证法检测其ESBLs产生率。采用KB法进行药敏检测。结果：2001年、2002年、2003年大肠埃希菌产ESBLs分离率分别为12.27、15.90、30.85；克雷伯菌产ESBLs分离率分别为23.88、28.81、30.00；产ESBLs株对头孢菌素类、氨基糖苷类、氟喹喏酮类、耐药率均高于非产ESBLs菌株。亚胺培南仍然为最有效的抗生素。结论：近年来大肠埃希菌、克雷伯菌产ESBLs菌株逐年升高。应加强ESBLs在革兰阴性杆菌中的检测。采取有效措施控制产ESBLs菌的感染。 【关键词】 克雷伯菌 大肠埃希菌 耐药性 超广谱内酰胺酶 超广谱β内酰胺酶(ESBLs)主要产于大肠埃希菌及克雷伯菌。ESBLs能水解绝大多数的头孢菌素类、青霉素和单酰胺类抗生素，且对氨基糖苷类、氟喹诺酮类和磺胺类交叉耐药。已成为细菌的突出问题。近年来，克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株逐年增多，细菌的流行和交叉感染现象时有报道。而不同地区流行的基因型、耐药性也不尽相同。对2001年2003年本院分离的大肠埃希菌、克雷伯菌ESBLs产生率的药敏情况进行总结，以其对临床治疗提供指导。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集2001年、2002年、2003年分离的患者各类标本。包括痰液、血液、尿液、脓液、胆汁等质控菌株，肺炎克雷伯菌ATCC700603和大肠埃希菌ATCC25922。主要仪器和试剂：细菌鉴定用法国梅里埃ATB微生物鉴定仪；药敏实验纸片为OXOID公司的产品。培养基MH琼脂由OXOID公司提供。 1.2 方法 ESBLs检测采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)1999年推荐酶抑制剂增强纸片扩散法1。用纸片扩散法(kB法)进行常规药敏检测，药敏结果判断及质量控制采用美国NCCLs1999年标准。 1.3 统计学方法 WHONET5软件系统。 2 结 果 临床分离细菌共879株大肠埃希菌和207株克雷伯菌。2001年、2002年、2003年大肠埃希菌ESBLs分离率分别为12.27、15.90、30.85；克雷伯菌ESBLs分离率分别为23.88、28.81、30.00(见表)。 产ESBLs、大肠埃希菌、克雷伯菌株对氨基糖苷类、头孢菌素类、氟喹诺酮类耐药程度明显高于非产ESBLs大肠菌株及克雷伯菌株(见表、表)。表 大肠埃希菌与克雷伯菌产ESBLs株的百分率大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类药物的耐药性均呈增高趋势(见表、表)。 3 讨 论 随着三代头孢菌素的广泛使用，产ESBLs菌株临床检出率逐年增高。由于ESBLs的基因编码位于质粒上，可以通过转化、转导、接合转移等多种方式在不同细菌间传递。因此易造成流行。尤其是多重耐药性的出现，常导致临床抗生素治疗的失败和病程迁延1。从3 a中ESBLs阳性率可看出，大肠埃希菌、克雷伯菌的ESBLs检出率均已高达30以上。对经济不发达地区来说应引起高度重视。 药敏分析表明，产ESBLs菌株对头孢菌素类、氨基糖苷类、单酰胺类抗生素耐药性明显高于非产ESBLs菌株。产ESBLs菌株仅对碳青酶烯类、头孢菌素及其三代头孢菌素与β内酰胺酶抑制剂复合物敏感。其中亚胺培南仍然为最有效的抗生素，耐药结果与国内外报道相同2，3。本文结果显示大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs株对头孢吡肟的耐药率高于表 2001年2003年大肠埃希菌产ESBLs株与非产ESBLs株耐药率比较表 2001年2003年克雷伯菌产ESBLs株与非产ESBLs株耐药率比较 其他地区的报道4，有待于进一步探讨。从药敏结果可看出产ESBLs菌株对部分β内酰胺酶抑制剂复合物的敏感率有下降趋势。原因有待进一步研究。从产ESBLs菌株的耐药表型推测本地区主要流行CTXM株，有待分子流行病学研究分析。 从表、表大肠埃希菌、克雷伯菌非产ESBLs对各类抗菌药物的耐药率逐年提高上可看出，广谱抗生素氟喹诺酮类环丙沙星、左氧氟沙星耐药率已达到80以上，而且3 a中有逐年上升的趋势。这与临床医生经验选药，对广谱抗生素氟喹诺酮的大量应用可能有关。快速、准确、合理的检测病原菌并提供可靠的药敏试验结果是降低耐药菌产生的重要途径。同时也提醒临床医生要重视病原菌的检测及药敏试验结果的分析。【参考文献】 1沈定霞，周贵民.产超广谱内酰胺酶细菌的研究进展J.国外医学临床生物化学与检验学分册，1999，20(1)：2426.2Quale JM，Landman D，Bradford PA et al.Molecular epidemiology of a citywide outbreak of extended of extendedspectrumbetalactamaseproducing klebsiella pneumonia infectionJ.Clin Infect Dis，2002，35(7)：834841.3倪语星.质粒介导的超广谱内酰胺酶的耐药问题及检测J.中华检验医学