乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义.doc

乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义乙型肝炎病毒（HBV）基因型分为AH八个型，不同基因型与病情的严重程度、预后、抗病毒治疗效果等方面都可能有一定的相关性1-3。本文对上海市165例乙肝患者的HBV基因型分布及与病情严重程度的关系，进行了初步的研究。另外，HBV的前C区变异会影响抗病毒药物的选择及治疗的效果，本文就HBV基因型与这些变异及病毒的复制能力是否相关，进行了探讨。 材料与方法 1.研究对象：165份血清标本来自上海市传染病医院的住院和门诊乙肝患者，包括114例慢性乙型肝炎（CHB），26例慢性重型乙型肝炎（CHG），22例肝硬化（LC），2例急性乙型肝炎（AHB），1例肝癌（HCC）。疾病的诊断依据2000年全国病毒性肝炎和肝病会议拟订的方案。并从上述收集的部分标本进行HBV血清学标志物、前C区1896位变异及HBVDNA定量检测。 2.方法：HBV基因型检测：以特异性引物套式PCR法检测不同的HBV基因型4。取部分不同基因型的扩增产物进行测序分析，证实二种分型方法的结果一致。 前C区变异检测：以特异性引物PCR法进行检测，部分结果也经测序证实。 HBVDNA载量测定：以TaqMan探针实时荧光PCR法定量检测。 3.统计学处理：用卡方检验分析所得的数据。 结果 1.HBV感染者的基因型分析结果：从表1可以看出，A型1例（0.6%），B型55例（33.3%），C型105例（63.6%），D型2例（1.2%）A/B和B/C混合型各1例（0.6%，0.6%），没有发现E、F、G、H型及其混合型。基因型在不同临床型患者中的分布情况其总体构成比中，LC与CHB患者的基因型分布有统计学差异，C型在CHB和LC患者中所占百分比明显高于B型，分别为61.4%比36.8%（P0.01）和90.9%比9.1%（P0.001）。CHG患者的基因型分布无显著差异。因HCC、AHB患者病例数少难以进行统计学分析。仅有的2例AHB患者均为D型。 2.乙肝患者的HBV基因型与血清标志物分析结果：在CHB中，B与C基因型比较，HBeAg、抗HBe的检出率间的差异在统计学上无显著性，而HBeAg/抗HBe双阳性的检出率B型高于C基因型，分别为9.5%和4.3%（P0.05）。在CHG患者中，B与C基因型相比，HBeAg、抗HBe和HBeAg/抗HBe双阳性检出率的差异在统计学上有显著性，前者以C基因型为主，后两者以B型为主。LC患者在B型中病例数太少，没有统计意义，结果见表2。 3.乙肝患者的HBV基因型与前C区1896位变异，及与HBVDNA定量分析结果：我们以HBVDNA1105Copies/ml作为血清HBV高、低载量的界限，结果见表3。B与C基因型相比，前C区野生株（W）阳性所占的百分比C型明显高于B型（29.1%比12.5%，P0.05）；野生株（W）/变异株(V)混合型所占的百分比B型明显高于C型（72.5%比53.4%,P0.05），变异株（V）以及HBVDNA定量结果在二个基因型间无显著差异。 讨论 经对上海地区乙型肝炎患者的HBV基因型分析，结果显示以C型和B型为主，偶见A型、D型、A/B混合型和B/C混合型，未检出E、F、G、H及其混合基因型，与2001年文献报道稍有出入5。既往流行病学调查显示我国HBV基因型以C型和B型为主，北方以C型为主，南方以B型为主，D型仅见于少数民族地区，无E和F型6。本文检出的2例D型患者均为急性乙型肝炎且有良好转归，在我国D型基因型报道较少，这是否与样本选择的偏差有关，因病例少，不能判定。 多数文献报道基因型与患者病情有一定的相关性，本文也发现乙型肝炎病毒基因型在不同临床型乙肝患者中的分布有统计学差异，其中LC与CHB患者的基因型分布差异具有统计学意义，C型在CHB和LC患者中的检出率明显高于B型，提示C型患者进展为肝硬化的可能性较大。26例CHG中B或C型的检出率无显著差异。有文献报道HCC患者中C型所占比例较高5，本文所检测的患者中HCC仅有1例（A型），因而不能作出分析。 CHB患者中，B基因型中的HBeAg/抗HBe双阳性检出率高于C基因型（9.5%比4.3%）；在CHG患者中，HBeAg的检出率以C基因型为高，抗HBe、HBeAg/抗HBe双阳性的检出率以B型为高，这可能与B基因型较多和较早出现的HBeAg血清转换有关7。进一步结合前C区变异情况分析，前C区野生株/变异株混合型的检出率亦是以B型为高（B型72.5%比C型53.4%），这与文献报道的HBeAg/抗HBe双阳性病例中常伴有前C区变异一致8。有文献报道基因型与前C区和C区的变异有很大的相关性9，本文的结果显示，B基因型前C区1896位变异率（包括野生株/变异株混合型）87.5%比C基因型70.9%高。前C区变异主要为1896位的G突变为A，这种变异可因1858位的多态性而降低，同时1858位的多态性常见于A、C、F基因型10，可进一