新药申报资料文件系列 原料来源、含量限度、外观性状、鉴别、检查、含量测定资料文件.doc

目 录10-1原料来源10-2含量限度10-3外观性状10-4鉴别10-5检查 10-6含量测定中文名称：*片汉语拼音：Yansuan Feisuofeinading Pian 英文名称：Fexofenadine Hydrochloride Tablets10-1原料来源 *原料：由北京德众万全药物技术开发有限公司合成部提供，批号：040524 *对照品：由北京德众万全药物技术开发有限公司合成部提供，纯度：99.91%。 *自制样品片：批号：20030401，20030402，20030403。10-2含量限度本品的规格为30mg，根据中国药典2005年版二部对口服固体制剂含量限度的一般要求，将本品含*（C32H39NO4HCl）的含量限度定为标示量的90.0%110.0。10-3外观性状目测，检查*片三批样品的外观性状，结果见表10-1。表10- 1 *片的外观性状检查结果样品批号外观性状20030401白色薄膜衣片，除去薄膜衣后显类白色。20030402白色薄膜衣片，除去薄膜衣后显类白色。20030403白色薄膜衣片，除去薄膜衣后显类白色。结论：本品为白色薄膜衣片，除去薄膜衣后显类白色。10-4鉴别10-4-1氯化物鉴别取本品细粉适量（约相当于*10mg），加水10ml超声溶解后，滤过，取续滤液滴加稀硝酸使成酸性后，将析出的白色沉淀滤过除去，取滤液加硝酸银试液即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸，沉淀复生成。此可鉴别作为本品的鉴别反应。另取*片的辅料混合物，做空白对照试验。结果空白不发生以上现象。见表10-2。表10- 2 氯化物鉴别反应结果表批号200304012003040220030403空白辅料结果正反应正反应正反应负反应结论：*片三批样品显正反应，空白显负反应。10-4-2紫外分光光度法取本品细粉适量（约相当于*60mg），置100ml量瓶中，加乙醇振摇使*溶解，并稀释至刻度，滤过，取续滤液适量，加乙醇稀释制成每1ml含60mg的供试品溶液，按处方比例称取相当量的空白辅料，同法配制。另取*对照品适量，加乙醇溶解并稀释制成每1ml中含60mg的溶液，作为对照品溶液，照分光光度法（中国药典2005年版二部附录 A）在200400nm的范围内扫描紫外光谱。*对照品及三批样品的紫外吸收光谱见附图10-110-4，辅料的紫外吸收光谱见附图10-5，数据见表10-3。表10- 3 *片紫外吸收波长样品批号最大吸收波长(nm)12对照品210.2258.620030401210.0258.620030402210.0258.620030403210.0258.6结论：*片三批样品与对照品紫外吸收一致。空白辅料溶液基本无吸收。但由于*在200400nm的范围内吸收较弱，不宜作为本品的鉴别项列入质量标准。10-4-3高效液相色谱法在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。对照品及三批样品HPLC图见附图10-610-9。保留时间结果见表10-4。表10- 4 样品HPLC图主峰的保留时间样品批号主峰保留时间(min)对照品13.1672003040113.2602003040213.3352003040313.285结论：*片三批样品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间相一致。7-5检查7-5-1溶出度因本品的紫外吸收较弱，故采用HPLC法测定本品的溶出度。1. 方法 照溶出度测定法（中国药典2005年版二部附录X C第二法）测定。1.1仪器与试剂 ZRS-8智能溶出试验仪（天津大学无线电厂制造） 岛津LC-10ATVP泵 岛津SPD-10AVP紫外可见光多波长检测器 TL9900色谱数据工作站 色谱柱 迪马Diamonsil-C18 柱（5mm，250mm4.6mm） 磷酸二氢钠（分析纯，北京红星化工厂，批号000420） 磷酸（分析纯，北京市益利精细化学品有限公司，批号000325） 甲醇（色谱纯，天津西华特种试剂厂）1.2测定法 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸（110）调节pH值至2.5-甲醇（41: 59）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按非索非那定计算应不低于3000。 取本品，以水为溶剂，照溶出度测定法（中国药典2005年版二部附录X C第二法）测定，转速为每分钟75转，依法操作，在45分钟取溶液5ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取*对照品适量，精密称定，用水超声溶解并定量稀释制成每1ml中约含33ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部V D），取上述两种溶液各10ml注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算出每片中*的溶出量。限度为标示量的80%，应符合规定。2. 方法的建立2.1 *片溶出度测定检测波长的确定 取*对照品适量，加水，超声，溶解，加磷酸盐缓冲液定量稀释制成每1ml中约含6mg的溶液，照分光光度法（中国药典2005年版二部附录 A）在200400nm的波长范围内扫描，扫描结果见附图10-10。 取*片辅料混合物适量，同法配制，在200400nm波长范围内扫描，结果见表10-5和附图10-11。表10- 5 *对照品及辅料的紫外扫描结果名称max（nm）*对照品218.8空白辅料-结论：*对照品在210nm波长处有较大吸收峰而空白辅料在此波长处无吸收，辅料不干扰本品的溶出度测定。2.2 溶出条件的确定（1） 色谱条件同*原料药有关物质项下。（2） 溶出介质溶出介质为水，溶出介质的HPLC图见附图10-12。（3） 空白辅料的干扰性试验取*片的空白辅料适量，置200ml的量瓶中，加水超声并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液10ml，注入液相色谱仪，见附图10-13。在空白辅料的HPLC图谱上无色谱峰出现，*片的空白辅料不干扰其溶出度的测定。 结论：*片溶出度测定的色谱条件定为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸（110）调节pH值至2.5-甲醇（41:59）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按非索非那定计算应不低于3000。2.3 溶出介质的筛选根据*原料药的理化性质研究结果，*微溶于水，易溶于碱性介质，不溶于酸。因此，用0.1mol/L盐酸溶液、磷酸盐缓冲液（pH6.8）和水为溶出介质，进行介质筛选。*片在不同介质中的溶出度测定结果见表10-6，测定条件为：桨法，75转/分，介质为900ml。检测波长210nm。表10- 6 溶出介质筛选结果（%）介质时间(min)123456平均值SD水588.9790.2990.3490.5289.6990.6490.080.701094.5294.3693.8993.6894.5295.0194.330.512095.0194.8694.7595.1295.3495.3395.070.253095.6996.2596.3295.8796.3596.4796.160.324596.8797.8296.5397.5597.3497.6297.290.516098.6899.1699.7599.2798.3898.6798.990.51盐酸溶液0.1mol/L562.5662.3863.8663.4562.8962.3762.920.981081.8982.0382.3182.4381.7882.0482.080.302086.7585.3786.2186.2986.3987.2486.380.723090.8991.3991.8290.7691.6491.4291.320.464592.6492.6893.5493.5292.6992.7292.970.476094.6893.8293.5494.6694.3494.2694.220.48磷酸盐缓冲液(pH6.8)590.2389.5888.6789.3789.2789.6989.470.581091.8991.8192.5292.6491.5892.3492.130.472095.3294.8995.6995.6095.8294.7595.350.463096.8296.3596.2396.8597.2197.5196.830.514597.8297.3198.0298.2197.5497.6197.750.346098.9899.0198.3198.8299.3099.2198.940.36结论：实验结果表明，由于*微溶于水，易溶于碱性介质，几乎不溶于酸，用磷酸盐缓冲液（pH6.8）作为溶出介质时，45分钟溶出完全；用水作溶出介质时，溶出速率较慢，但45分钟溶出97.29%，溶出完全；用盐酸溶液作为溶出介质时，60分钟溶出94.22%，磷酸盐缓冲液（pH6.8）与水经过45分钟均能完全溶出。故我们优先选定900ml的水作为溶出介质。2.4 篮法、桨法的筛选分别以篮法（转速为100转/分）和桨法（转速为50转/分），介质均为水进行溶出方法筛选，测定结果见表10-7。表10- 7 溶出度方法筛选结果（%）方法时间(min)123456平均值SD桨法568.7268.5667.4267.8968.5967.8868.180.761079.1279.6981.2680.5680.8980.2980.300.982089.8989.7289.3488.7688.3989.4089.250.643091.3390.3291.4691.6791.2390.9891.170.524592.8693.1293.5393.4192.6793.6193.200.416093.8994.2193.6894.6895.6894.8694.500.78篮法567.5466.9867.8567.3467.6266.9867.390.521076.2677.3377.8278.2176.8977.9177.400.942088.6488.6289.3487.9288.3488.4088.540.533090.2490.5690.8291.2891.2089.9190.670.594591.3491.6791.8992.5192.3491.8291.930.476092.5693.5292.8792.5493.1092.4692.840.44结论：由表10-7看出篮法100转/分和桨法50转/分溶出数据相差不大，桨法溶出速率略高于篮法，对于片剂溶出方法选用桨法时易于观察溶出现象，故我们选用桨法，但根据前面桨法75转/分经45分钟溶出97.29%，而桨法50转/分经45分钟溶出93.20%，所以我们选用桨法75转/分，以900ml水作介质，测定*片的溶出度。2.5 *片溶出度测定的线性范围取*对照品约25mg，精密称定，置250ml量瓶中，用水稀释，超声，冷却，用水稀释到刻度，摇匀；分别精密量取上述溶液用水稀释配制成1.0mg/ml、5.0mg/ml、10.0mg/ml、20.0mg/ml、30.0mg/ml、40.0mg/ml、50.0mg/ml、60.0mg/ml、80.0mg/ml的溶液，上述溶液分别量取10ml，注入液相色谱仪，记录峰面积，结果见表10-8。表10- 8 *片溶出度测定的线性范围考察结果浓度(g/ml)峰面积(104)1.092.55.0443.510.086920.0174530.0259740.0347950.0439660.0531280.07035 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作线性回归，得到线性方程：A=88.104C-12.187，r=0.9999。标准曲线图见附图10-14。结论：*浓度在1mg/ml80mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。2.6 *片溶出度测定的回收率试验取*对照品适量，精密称定，并按处方比例加入辅料混合物，加入水，振摇使主药溶解，并加水稀释，制成浓度分别约为27mg/ml、33mg/ml、40mg/ml的溶液。三种浓度各配制三份。另精密称取*对照品适量，同法制成每1ml中约含33mg的对照品溶液。分别取上述溶液10ml注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算回收率。结果见表10-9。表10- 9 *片溶出度测定的回收率试验结果编号加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均值(%)RSD(%)127.427.40100.099.510.58226.526.2098.87325.625.5199.65132.031.7499.1999.320.57232.532.1298.83333.433.3899.94142.041.9699.9099.890.11241.641.61100.0340.340.2199.78结论：在三个不同的浓度下，*片在水的回收率均在98102范围内，回收率符合要求。2.7 *片溶出度测定的精密度试验取含量测定项下细粉（约相当于*33mg），置于100ml量瓶中，加水超声，使主药溶解，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取此溶液1ml至10ml量瓶中，加水稀释至刻度，配成每1ml含*33mg的溶液，配制六份。另精密称取*对照品适量，同法制成每1ml含*33mg的对照品溶液。分别取上述溶液10ml注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。计算结果见表10-10。表10- 10 *片溶出度测定方法的精密度试验样品重(mg)含量(%)平均含量(%)RSD(%)129.199.8699.530.44129.399.35129.498.86128.999.32129.1100.1129.599.67结论：用高效液相色谱法测定*片的溶出度，精密度测定结果的RSD2%，符合测定要求。2.8 *片溶出度测定溶液的稳定性试验 取本品溶出度测定项下溶液，并分别于0、4、12、24小时测定吸收度，计算平均值及RSD，结果见表10-11。表10- 11 *片溶出度测定溶液的稳定性试验结果测定时间（小时）含量（%）平均含量（%）RSD（%）099.6899.610.23499.831299.292499.64结论：*片溶出度测定项下溶液放置4，12，24小时的含量相对标准偏差小于2%，说明*片溶出度测定溶液稳定，可用于溶出度测定。3. 溶出度测定结果及溶出度均一性曲线测定条件：桨法，75转/分，900ml水为溶出介质，370.5。三批试制样品的溶出均一性测定结果见表10-12，溶出曲线见附图10-1510-17。表10-12 *片溶出度测定结果批号时间(min)123456平均值SD20030401588.6588.7388.6289.1289.0388.4588.770.291094.5494.3495.0894.6493.9894.2894.480.402097.3497.2497.2296.8996.5196.9797.030.323098.2998.3898.5997.9297.6998.0998.160.334599.6898.9298.8999.6999.7399.3499.380.3960100.299.57100.599.43100.1100.8100.100.5320030402589.6488.6189.2487.2888.6788.7988.710.901094.3495.0894.2194.6893.9894.6694.490.422097.0596.0896.8996.7397.2195.9796.660.533098.3598.7698.8797.6898.5597.8298.340.504599.3499.9799.5799.67100.299.8799.770.3160100.5101.2100.399.87100.399.63100.300.5420030403589.2488.5489.6787.3788.9788.2288.670.921094.3995.0794.3894.6493.8994.7294.520.422097.1397.8296.7296.2397.2196.5996.950.583098.5598.7098.3497.7898.3997.0998.140.614599.2499.3699.9799.59100.599.6799.720.4660100.4101.0101.299.8799.9399.57100.330.66结论：三批*片45分钟溶出度均在90%以上。溶出度曲线均一性良好。10-5-2有关物质采用高效液相色谱法，对本品有关物质的检查方法进行研究，照中国药典2005年版二部附录 D测定。1. 仪器与试剂、色谱条件见原料药项下。2. 溶剂*微溶于水，选择流动相为溶剂。溶剂的HPLC图见附图10-18。3. 系统适用性试验3.1*片破坏性试验取本品10片，研细，分别称取5份相当于*4mg的细粉，置10ml具塞试管，分别加入破坏试剂：（1）酸破坏样品：加1.0mol/L盐酸1ml，放置3天，用1.0mol/L氢氧化钠溶液调pH至中性，加流动相稀释至10ml，摇匀，滤过。（2）碱破坏样品：加1.0mol/L氢氧化钠溶液1ml，放置3天，用1.0mol/L盐酸溶液调pH至中性，加流动相稀释至10ml，摇匀，滤过。（3）氧化破坏样品：加30%双氧水1ml，放置3天，加流动相稀释至10ml，摇匀，滤过。（4）光照破坏样品：在4500lx500lx照度下照射3天，加流动相稀释至10ml，摇匀，滤过。（5）高温破坏样品：在105放置3天，加流动相稀释至10ml，摇匀，滤过。分别量取上述续滤液5ml，注入液相色谱仪，结果见附图10-1910-23。从图中可以看出，在该色谱条件下，各种降解产物对主峰的检测无干扰。测试结果见表10-13。表10- 13 破坏试验测试结果表名称保留时间(min)相对保留时间酸破坏样品杂质12.6000.20酸破坏样品*13.0001.00碱破坏样品杂质12.8000.21碱破坏样品*13.0671.00氧化破坏样品杂质16.0520.47氧化破坏样品杂质26.7020.52氧化破坏样品杂质37.3750.58氧化破坏样品杂质49.9340.78氧化破坏样品杂质510.9470.86氧化破坏样品*12.7781.00高温破坏样品杂质118.4670.43高温破坏样品*12.9331.00光照破坏样品杂质118.3670.43光照破坏样品*12.8331.00结论：根据以上测试结果可以看出，各降解产物与*主峰之间分离度良好。3.2 空白辅料的干扰试验 称取*片处方量的空白辅料，用流动相配制（相当于*0.4mg/ml），滤过，量取续滤液20ml，注入色谱仪，记录色谱图，色谱图见附图10-24。空白辅料在保留时间2.4min处有一小峰，对*片的有关物质检查无干扰。结论：系统适用性试验表明，上述色谱条件适合*片有关物质检查。因此，将有关物质的色谱条件定为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸（110）调节pH值至2.5-甲醇（41:59）为流动相；检测波长为210nm。理论板数按非索非那定计算应不低于3000。4. 测定法取本品细粉适量（约相当于*20mg），置50ml量瓶中，加流动相适量，超声使*溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释100倍作为对照溶液。取对照溶液20ml注入色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%。再取供试品溶液20ml注入色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。三批样品有关物质测定结果见表10-14，三批样品的自身对照溶液及有关物质色谱图见附图10-2510-30。表10- 14 有关物质检查结果批号200304012003040220030403有关物质（%）0.200.210.25结论：本品三批样品的有关物质均小于1.0%。10-5-3片重差异照中国药典2005年版二部附录A片剂项下方法检查。取本品20片，精密称定总重量，求出平均片重与片重差异，三批样品结果见表10-15。表10- 15 *片片重差异测定结果序号200304012003040220030403片重(g)片重差异(%)片重(g)片重差异(%)片重(g)片重差异(%)10.12940.080.1279-0.620.1287-0.7720.1278-1.160.1263-1.860.1292-0.3930.1285-0.620.1253-2.640.13232.0040.1265-2.170.1265-1.710.13413.3950.1291-0.150.1267-1.550.1295-0.1560.1266-2.090.1269-1.400.13090.9370.1275-1.390.1286-0.080.13070.7780.12940.080.12910.310.13131.2390.13050.930.12930.470.1295-0.15100.1284-0.700.13061.480.1268-2.24110.12990.460.13202.560.1287-0.77120.12970.310.13222.720.1259-2.93130.13081.160.1269-1.400.1286-0.85140.13151.700.12980.850.1267-2.31150.13141.620.12920.390.1296-0.08160.13131.550.1286-0.080.1253-3.39170.12950.150.12870.000.13101.00180.1269-1.860.1279-0.620.13312.62190.1267-2.010.1275-0.930.1294-0.23200.1238-4.250.12920.390.12990.15平均片重(g)0.12930.12870.1297由上表结果可知，本品的片重差异符合中国药典的要求。10-6 含量测定10-6-1高效液相色谱法1. 方法研究1.1色谱条件色谱柱：迪马Diamonsil-C18 柱（5mm，250mm4.6mm）流动相：0.05mol/L磷酸二氢钠用磷酸（110）调节pH值至2.5-甲醇（41:59）检测波长：210nm1.2线性关系考察取*约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液适量，用流动相稀释成不同浓度的溶液，精密量取10ml，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表10-16。表10- 16 *标准曲线测定结果编号C(mg/ml)峰面积(104)11059622012083301795440237756035786804782以峰面积对进样浓度计算，作线性回归，得线性方程为：A=59.662C+2.863，相关系数r=1.0000，标准曲线图见附图10-30。结论：*浓度在10mg/ml80mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。1.3 *片含量测定的回收率试验分别取*对照品约24mg、30mg、36mg，精密称定，分别置于100ml量瓶中，按处方比例称取辅料，分别加入量瓶中，加流动相超声使*溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml于10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；另精密称取*对照品适量，加流动相制成每1ml含*约30mg的对照品溶液，量取上述两种溶液10ml注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。计算测得量及回收率。结果见表10-17。表10- 17 回收率测定结果浓度加入量(mg)辅料量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)低浓度24.079.5100.899.970.6024.381.0100.724.480.799.40中浓度30.199.899.7830.099.3100.330.199.599.87高浓度35.9118.299.0036.0119.8100.336.1119.499.57结论：用高效液相色谱法测定*的含量，回收率符合要求。1.4*片含量测定的精密度试验取本品细粉，精密称取适量(约相当于*30mg)，置100ml量瓶中，加流动相超声，使*溶解，并稀释至刻度。摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml于10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；另取*对照品适量，精密称定，用流动相超声溶解并定量稀释制成每1ml含30mg的溶液，分别量取上述溶液10ml注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。结果见表10-18。表10- 18 精密度测定结果编号称重量（mg）含量(%)平均含量(%)RSD（%）1129.499.9599.950.552130.199.523129.399.624129.1100.45129.299.436129.4100.8结论：本法的精密度符合测定要求。1.5 溶液稳定性取本品细粉适量(约相当于*30mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声，使*溶解，并稀释至刻度。摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml于10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，在室温下放置，于不同时间量取10ml注入液相色谱仪，记录色谱图。另按时间同步取*对照品适量，精密称定，用流动相溶解制成每1ml含*30mg的溶液，按外标法以峰面积计算。结果见表10-19。表10- 19 溶液稳定性测定结果放置时间