ANKOM纤维分析仪操作手册.doc

ANKOM220型纤维分析仪一、仪器使用操作规程1. 蒸煮 打开电源开关。用温度控制器的“”“”键，设定蒸煮温度为100。（注：此值一般已经设定，无需更改） 将盛有样品的滤袋装在样品架上，置入仪器的蒸煮罐中，加入15002000mL所需溶液,使没过样品。 按下“AGITATE”键（蓝灯亮）和“HEAT”键（红灯亮），开始搅拌和加热（确保搅拌良好），锁紧上盖。 待温度上升到设定温度时，按“T1”键（或“T2”“T3”“T4”键），用“C”键回零，再用“H”“M”“S”键分别设定时、分和秒。按“START”启动定时器。 带定时器报警后，再次按下“AGITATE” （蓝灯灭）和 “HEAT” （红灯灭）键，停止搅拌和加热。 慢慢打开排液阀，排出罐内液体，然后打开上盖。注意：先排液，后开盖。2. 洗涤 关闭排液阀，加入8090蒸馏水，没过样品，搅拌5mim。 换水洗涤23次。3. 关闭电源。二、分析方法（一）粗纤维的测定1.试剂a. 硫酸溶液：（0. 12750.005）molL-1（每100mL 蒸馏水含硫酸（H2SO4）1.25g）:吸取比重1.84的浓硫酸6.89mL，注入800 mL水中，冷却后稀释至1000 mL。b. 氢氧化钠溶液：（0.3130.005）molL-1（每100mL 蒸馏水含氢氧化钠（NaOH）1.25g）： 迅速称取分析纯氢氧化钠12.5g，溶于100 mL水中，准确定容至1000 mL。a. 丙酮：无色，无挥发残渣。注意：配制硫酸溶液时，要将硫酸缓慢加入水中；处理酸碱溶液时要戴上防护器具。2.仪器a. ANKOM220纤维分析仪b. F57专用滤袋c. 封口机d. 干燥器e. 实验室常规仪器3.测定步骤a. 装袋(每批24个) 称取滤袋质量(m1) 称取1.0g（0.05 g）风干样品（样品需粉碎通过1mm筛孔）(m2)，装入滤袋。同时称取空白滤袋质量(C1) 距滤袋边缘0.5cm处封口b. 脱脂 将盛有样品并封口的滤袋，置于500mL的广口瓶中，加入丙酮没过样品，摇动10次，浸提10min，弃去丙酮。用新鲜丙酮重复此操作至脱脂完全。将盛有样品的滤袋风干（约5min），然后均匀地铺展滤袋中的样品。c. 酸煮 将样品摆放到样品架上，放入ANKOM220纤维分析仪的消煮罐中，加入19002000mL的硫酸溶液，设定消煮温度为100，按下搅拌和加热按扭，确保搅拌良好后，锁紧上盖，待温度上升到100时，启动定时器，定时45min。d. 水洗 待定时器鸣叫后，停止搅拌和加热，打开排液阀将酸液排出。注意：一定要先排液后开盖。关闭排液阀，打开上盖，加入19002000mL热蒸馏水（90100），锁好上盖（不必太紧），搅拌35 min，排液。重复洗涤2次以上。e. 碱煮 加入19002000mL的氢氧化钠溶液，设定消煮温度为100，按下搅拌和加热按扭，确保搅拌良好后，锁紧上盖，待温度上升到100时，启动定时器，定时45min。f. 水洗 同步骤d。g. 丙酮洗 取出样品，轻轻挤压使水流出，置样品于250mL 烧杯中，加入丙酮没过样品，浸泡23 min取出，轻轻挤压使丙酮流出，风干样品。h. 烘干称重 将风干后的样品于105的烘箱中干燥24h，取出置于干燥器中降至室温后称重(m3) 注意：放入烘箱前应确保丙酮挥发干净。i.灰化称重 将干燥称重后的样品置于预先恒重（m4）的坩埚中，于550马福炉中灰化2h，取出于干燥器中冷却至室温称重（m5）4.结果计算测定步骤装样煮后干燥灰化后样品编号袋重样重样+袋坩埚灰份+坩埚样品m1m2m3m4m5空白C1-C3C4C5CF(风干基础)% = ( m3- m1)（C3-C1）-（m5- m4）-（C5- C4）100/ m2(三) 中性洗涤纤维的测定1. 试剂a. 中性洗涤液：称取18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠（Na2B4O710H2O）同放入1000mL烧杯中，加少量水加热溶解后，再加入30.0g十二烷基硫酸钠和10.0 mL 三甘醇和乙二醇乙醚。称取 4.65g无水磷酸氢二钠，置于另一烧杯中，加少量水，微微加热溶解后倾入第一个烧杯中，用蒸馏水稀释至1000mL。此溶液pH在6.97.1（pH一般不需要调整。）b. 耐高温-淀粉酶: 340,000UmL-1的活性（1个单位活性表示能将1mg可溶性淀粉用30min水解）c. 无水亚硫酸钠d. 丙酮：无色，无挥发残余物。2. 仪器（同粗纤维的测定）3. 测定步骤a. 装袋 称取 (0.50.05) g风干样品（样品需粉碎通过1mm筛孔）(m2)，装入滤袋。同时, 称取空白滤袋质量(C1)。距滤袋边缘0.5cm处封口。a. 脱脂 样品含有大豆产品或脂肪含量5%，脱脂方法同粗纤维的测定； 烘烤大豆要用丙酮浸泡12h。b. 消煮 加入19002000mL中性洗涤液于消煮罐中，如果一批消煮的样品数量少于24个，为保证洗涤液完全浸没滤袋，至少应加入1500mL洗涤液。加入无水亚硫酸钠（0.5g/50mL ND）和4.0mL耐高温-淀粉酶。将样品架置入消煮罐中，锁紧上盖。按下搅拌和加热按扭，定时75min，待温度升到100时，启动定时器，倒计时。c. 水洗：同粗纤维的测定。d. 丙酮洗：同粗纤维的测定。e. 烘干称重：同粗纤维的测定。 注意：放入烘箱前应确保丙酮挥发干净.4结果计算测定步骤装样煮后干燥样品编号滤袋质量样品质量袋+样质量样品m1m m2空白C1C2NDF%(原样基础) = (m2 - m1)-( C2- C1) 100/ m(二) 酸性洗涤纤维的测定1. 试剂a. 酸性洗涤剂溶液：称取20g十六烷三甲基溴化胺（CTAB），溶于1000mL已标定过的 0.50molL-1硫酸溶液中，加热搅拌使其溶解。b. 0.50molL-1硫酸溶液：取49g (约27mL)浓硫酸，慢慢加入已装有500 mL水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶中，加水至刻度，标定。c. 丙酮：无色，无挥发残余物注意事项；同粗纤维的测定2仪器a.ANKOM220纤维分析仪b.F57专用滤袋c.封口机d.干燥器e. 其他实验室常规分析设备3测定步骤a. 装样 (每批24个) 称取滤袋质量(m1) 称取0.5g（0.05 g）风干样品（样品需粉碎通过1mm筛孔）(m2)，装入滤袋。同时称取空白滤袋质量(C1)距滤袋边缘0.5cm处封口（同粗纤维的测定）b.脱脂：样品含有大豆产品或脂肪含量5%，脱脂方法同粗纤维的测定； 烘烤大豆要用丙酮浸泡12h。c.酸煮（同粗纤维的测定）d.水洗（同粗纤维的测定）e.丙酮洗（同粗纤维的测定）f.烘干称重（同粗纤维的测定）注意：放入烘箱前应确保丙酮挥发干净4结果计算测定步骤装样煮后干燥样品编号滤袋质量样品质量袋+样质量样品m1m m2空白C1C2ADF%(原样基础) = (m2 - m1)-( C2- C1) 100/ m（四） 酸性洗涤木质素（ADL）的测定1 试剂72%硫酸：取734.69mL浓硫酸，倒入200mL水中，冷却后稀释1000mL。2 步骤a. 酸泡 测定完ADF后，接着将干的滤袋放入3000mL的烧杯中，加72%硫酸没过样品（约250mL）。 注意：滤袋（样品）必须完全干燥，否则样品将被炭化，影响测定结果。放一个2000mL的烧杯于其中，上下按动搅动样品30min。浸泡3h。b. 水洗 用90100蒸馏水洗至中性。c. 丙酮洗（同前）d. 烘干称重m3 105 4he. 灰化