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氧化合成己二酸的HPLC成分分析摘要：本文利用反相高效液相色谱（RP-HPLC），在选定的工作条件下，使氧化合成己二酸各组分得到分离，用紫外检测器检测己二酸和戊二酸。方法简捷、快速、准确度高。关键词：反相高效液相色谱 己二酸 戊二酸近年来，以环己烯为原料，催化氧化合成己二酸的研究引起了人们越来越多的关注。产物的定量定性显得尤为重要。工业上己二酸一般采用酸碱滴定法，酚酞作指示剂。本实验所要处理的物系中既含有己二酸又含有戊二酸。酸碱滴定法只能测定出酸的总含量，而无法得出己二酸和戊二酸各自的准确数值，因此不能采用酸碱滴定的方法。寻找简捷、快速、准确度高的检测方法成为首要任务。1 仪器与试剂Waters 2695高效液相色谱仪 岛津2998紫外检测器 色谱工作站甲醇 色谱纯；超纯水；磷酸二氢钾、磷酸、戊二酸、己二酸均为分析纯。2 实验方法2.1 色谱条件色谱柱：waters SymmetryShieldTM RP18反相色谱柱（150 mm4.6 mm i.d.,5m）；柱温：35；检测波长：206 nm；流速0.8 mL/min；进样量：10 L。2.2实验条件缓冲溶液：配制浓度为0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液，用磷酸调至PH=2.1。流动相：将配置好的缓冲溶液与甲醇以85:15体积比混合，然后用0.45 m的滤膜减压过滤。标准溶液：用流动相配置不同浓度的己二酸戊二酸混合溶液， 0.45 m的滤膜过滤。样品溶液：用流动相配制一定浓度的待测样品，0.45 m的滤膜过滤后备用。通过自动进样器进样，色谱工作站记录并进行分析处理。实验完毕后，用高纯水及甲醇冲洗柱子。3 结果与讨论3.1 检测波长的确定用190900 nm紫外-可见光对标准溶液进行扫描，结果表明有机酸在206 nm附近有较大的吸收，重复性好，不受流动相中其他物质的干扰，故实验均采用206 nm波长进行检测。3.2 流动相选择缓冲溶液与甲醇以85:15体积比混合，然后用0.45 m的滤膜减压过滤作为流动相。采用该混合溶液做流动相PH值稳定，同时该混合流动相用0.45 m的滤膜过滤可以防止缓冲溶液结晶堵塞色谱柱。而缓冲溶液和甲醇通过四元梯度泵混合作流动相难以达到这种效果，因为水相的缓冲溶液遇到有机相的甲醇容易结晶。3.3 标准曲线的建立序号己二酸质量/g戊二酸质量/g10.20.0120.40.0230.60.0340.80.0451.00.05表1 标准溶液的配制图1 己二酸的标准曲线图2 戊二酸的标准曲线羧酸线性范围g/L回归方程相关系数R2己二酸210y=504867x-660960.9994戊二酸0.1 0.5y=509338x-5473.70.9993表2 己二酸和戊二酸的回归方程按表1准确称量己二酸、戊二酸，精确到0.0001 g。用流动相溶解，定容至100 mL。配成五种不同浓度的标准溶液，分别进样10 L进行色谱分析。线性回归处理峰面积Y与有机酸含量X（g/L）的关系。回归方程列于表2中，所有物质的相关系数均大于0.999，表明线性关系良好。3.4 精确度的验证图3 保留时间变化图准确称量己二酸，用流动相溶解配成标准溶液，连续进样10次进行色谱分析。从图3和图4可见，保留时间和测定的含量都在一定范围波动。经过计算保留时间的极差是0.09%，浓度的测定极差是0.58%。表明该方法测定的重复性良好。图4 浓度变化图3.5 准确度的验证为了验证该方法的准确度，我们进行了酸碱滴定。精确称量己二酸标样于250ml具塞锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇匀使其完全溶解。加3-5滴10g/L酚酞指示液，用氢氧化钠标液【C(NaOH)=0.1mol/L】滴定至溶液呈微（浅）红色，并至少保持30s。同时取50ml水做空白试验。己二酸含量的平均值是99.35%。同时我们用高效液相色谱法测定的含量平均值是99.43%。由此可见该方法准确可靠。3.6 加标回收率实验准确称量己二酸标样和样品，用流动相溶解配成五种不同浓度的标准溶液，分别进样10 L进行色谱分析。测定的加标回收率分别为98.39%、97.13%、96.75%、97.51%和98.53%均大于96%（一般加标回收率为95%105%），说明该方法有一定应用价值。4 结论实验结果表明，利用反相高效液相色谱同时测定己二酸及戊二酸的方法简便、快捷，具有较好的准确度和精密度，可为氧化合成己二酸成分分析提供可靠的数据。参考文献1 王向宇等，环己烯催化氧化制己二酸的HPLC研究，郑州大学学报，20