薄层色谱法操作规程.doc

WA1302009-01第 3页 共 3页起 草： 日期：审 核： 日期：批 准： 日期：生效日期： 签字：拷贝号：变更记载：制定（变更）原因及目的：公司更名。修订号批准日期生效日期002001年5月4日2001年5月11日0102分发部门生产技术部 份质量部QA 份质量部QC 份一 车 间 份二 车 间 份三 车 间 份设备动力科 份物 控 部 份总 经 办 份综 合 部 份薄层色谱法操作规程1. 适用范围：适用于本厂品种薄层色谱检验。2. 职责检验员：严格按照操作规程进行检验。3. 定义薄层色谱法系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料、铝基片上成一均匀薄层,经点样、展开、显色后,再与适宜的对照物质按同法在同板上所得的色谱图相对比,并可用薄层扫描仪进行扫描，用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。4. 仪器与材料4.1. 玻板：除另有规定外,用10cm10cm、10cm15cm、20cm10cm、20cm20cm、5cm20cm的规格，要求光滑、平整、洗净后不附水珠，晾干。4.2. 吸附剂或载体：最常用有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254。用水或0.20.5%羧甲基纤维素钠水溶液适量调成均匀糊状。4.3. 薄层铺板机：自动涂成厚度均匀的薄层。4.4. 点样器:微量进样器(平头)、毛细管。4.5. 展开室:平底或双槽层析缸，盖子须密闭。5. 试药与试液5.1. 0.20.5%羧甲基纤维素钠溶液:称取25g羧甲基纤维素钠,加1升水煮沸溶解,过滤, 静置，用时取上清液。6. 操作方法6. 1.薄层板的制备6.1.1. 手动制板法：将吸附剂1份和水(或0.20.5%羧甲基纤维素钠水溶液)3份在研钵中向一个方向研磨混合,去除表面汽泡后,倒入准备好的玻璃板上,用洁净玻棒涂铺成一个均匀的薄层,再稍加振动,使整板薄层均匀。6.1.2. 薄层铺板机法：先将吸附剂1份和水(或0.2%-0.5%羧甲基纤维素钠溶液)3份置匀浆仪 中混合均匀,将所需规格薄层板置搁板上,用所需层度刮板装入供浆槽口内,将匀好的吸附剂浆液倒入供浆槽内,即时板开关,制板自动开始,制完板后自动停机。6.2. 干燥、活化6.2.1. 将制备好的薄层板，于室温下置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀、平整、无麻点、无破损及污染,于110烘30分钟，冷却后立即使用或置于干燥箱中备用。6.3. 点样除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边1.01.5cm,样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。6.4. 展开 将点好样品的薄层板放入层析缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，待展开到规定距离，除另有规定外，一般为8-15cm，取出薄层板，晾干。按该药品项下的规定检测。6.5. 展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴两条与室一样高宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密闭展开室的盖，使系统平衡。6.6. 结果与判定6.6.1. 若供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，则判检出该对照品斑点。6.6.2. 若供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点不明显或错位或斑点颜色不对应，则应重新取样复试。若复试结果符合6.6.1.项要求，则判检出该斑点。6.6.3. 若供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上无斑点或经6.6.2.复试仍不符合规定,则判未检出该斑点。7. 薄层扫描法：如需用薄层扫描仪对色谱进行扫描供鉴别、检查、含量测定，则可用薄层扫描法。7.1. 定义：系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有吸收紫外光或可见光的斑 点，或经激发后能发射荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。7.2. 操作方法7.2.1. 样品的制备：取样2份，按4.项下进行操作，即得已展开的薄层板。7.2.2. 上机扫描：按该品种项下要求，在薄层扫描仪上进行扫描。7.2.3. 计算7.2.4. 相对偏差：3.0%7.2.5. 判定：根据该品种项下要求判定。7.3. 注意事项7.3.1. 供试品溶液至少制备2份，每份对照品溶液和供试品溶液在同一薄层板上点样不少于2个点，并且交叉点样。7.3.2. 待测成分斑点与