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文档简介
菊花的组织培养 2 植物组织培养的应用 二 植物组织培养 植物组织培养 现在已有胡萝卜 芹菜 柑橘 咖啡 棉花 玉米 水稻 橡胶等几十种植物的人工种子试种成功 但由于成本较高 中国尚未应用于生产 一 细胞的全能性 1 定义 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 2 原理 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 从理论上讲 生物体的每一个活细胞都应该具有全能性 3 差异 1 受精卵的全能性最高 4 潜在全能性的原因 基因的选择性表达 2 受精卵分化后的细胞中 体细胞的全能性比生殖细胞的低 5 例题辨析 例1 下列有关细胞全能性的含义 正确的是 A 每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B 生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C 生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D 生物体的每个细胞都经过产生 分裂 分化 生长 衰老 死亡的全过程 正确答案 C 例2 在生物体内 细胞没有表现出全能性 而是分化为不同的组织 器官 是因为 正确答案 A 细胞丧失了全能性 B 基因的表达有选择性 C 不同的细胞内基因不完全相同 B 科学研究表明 处于离体状态的植物活细胞 在一定的营养物质 激素和其他外界条件的作用下 就可能表现出全能性 发育成完整的植株 人工条件下实现的这一过程 就是植物组织培养 二 植物组织培养 1 植物组织培养过程 离体的植物器官 组织 细胞 愈伤组织 根芽 植物体 脱分化 再分化 外植体 用于离体培养的植物器官或组织片段 2 影响植物组织培养的因素 营养 矿质元素 大量元素 微量元素 植物激素 细胞分裂素 生长素 环境条件 适宜光照 温度 PH 外因 内因 植物种类 同一种植物材料的年龄 保存时间的长短 有机物 蔗糖 氨基酸等 2 影响植物组织培养的因素 激素的影响植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 植物激素的浓度 使用的先后顺序以及用量的比例等 都会影响实验结果 按照不同的顺序使用这两类激素 会得到不同的实验结果 当同时使用这两类激素时 两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 一 制备MS固体培养基 1 配制各种母液 配制母液时 大量元素浓缩 微量元素浓缩 常温保存 激素类 维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg ml的质量浓度单独配制母液 用母液配制培养基时 需要根据各种母液的浓缩倍数 计算用量 实验操作过程 10倍 100倍 2 配制培养基 配制1LMS培养基时 先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水 加热使琼脂熔化 然后加入蔗糖30g 取配制好的母液 依次加入 然后定容至1000mL 调节pH值 然后分装到锥形瓶中 每瓶分装50或100mL3 灭菌 高压蒸汽灭菌 二 外植体消毒 冲洗 酒精 无菌水冲洗 氯化汞 无菌水冲洗至少三次之上 三 接种 接种前 用体积分数70 的酒精将工作台擦拭 然后点燃酒精灯 所有的接种操作必须在酒精灯旁进行 并且每次使用器械后 都要用火焰灼烧灭菌 将外植体插入培养基中应注意方向 不要倒插 每瓶接种6 8块外植体 四 培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养 培养期间定期消毒 温度控制在18 22 并且每天用日光灯光照12h 五 移栽 移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封口膜 让试管苗在培养间生长几日 然后用清水清洗根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间 等幼苗长壮后再移栽到土壤中 六 栽培 每天要观察记录幼苗的生长情况 适时浇水 施肥 直至开花 此时的组织或细胞为离体的 即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境 而不是能体现其整个植物体的光能自养 在培养过程中 是脱分化 再分化的过程 随着芽和根的形成 就具有了自养的能力 是由细胞到一个个体的演变过程 1 高等植物是光能自养型生物 为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基 2 培养过程中为什么需要进行光照 思考 1 培养基的灭菌 高压蒸汽灭菌 2 外植体的消毒 酒精 氯化汞 3 接种的无菌操作 酒精 酒精灯 灼烧 4 无菌箱中的培养 5 移栽到消过毒的环境中生存一段时间 3 在整个操作过程中 是如何来实现无菌环境的 课题延伸 一般来说容易进行无性繁殖的植物 也容易进行组织培养 3 例题辨析 例1 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养 又可以分化形成根 芽等器官 这一过程称为 正确答案 C 例2 下列不能作为植物组织培养的材料是 正确答案 D 练习1 答 植物组织培养所利用的植物材料体积小 抗性差 对培养条件的要求较高 用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长 如一些细菌
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