实验5 除草剂与杀菌剂毒力测定.ppt

杀菌剂与除草剂的毒力测定 吴顺凡农药科学系杀虫剂毒理与害虫抗药性监测课题组 邮箱 wusf 办公室 理科楼B828 2014 5 16 实验五 利用有害生物 靶标生物 如昆虫 螨类 病菌 线虫 杂草等 对作用物的反应评价化合物生物活性的基本方法 陈年春 农药生测技术 农药生测现在已发展成为是集昆虫学 植物病理学 微生物学 植物学 杂草学 化学 生物技术 统计学等多学科于一体的综合技术 是农药科技创新工程中不可或缺的关键技术 农药生测技术内涵 生物测定已成为研究作用物 靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术 杀菌剂的毒力测定 杀菌剂生物测定流程 药剂毒力测定 定性定量分析 防治效果测定 杀菌剂室内生物测定主要方法 孢子萌芽测定法 观察供试病菌孢子是否萌发 来判定杀菌剂毒力大小 生长速率法 将不同浓度的药液与溶化的培养基混合 制成带毒培养基平面 在平面上接种病原菌 以其生长速度快慢判定药剂毒力大小 将不同浓度的药液和热的培养基混合 用这种含药培养基培养病原菌 以病原菌的生长进度的快慢来判定药剂毒力的大小 生长速率法原理 生长速率法示意图 注意事项 应先加药液再加培养基 1 9 对一些受热易分解的药剂则要待培养基冷却到50度左右时再加入 优点 操作比较简单 适用范围广 适用于乳油 水剂 可湿性粉剂等 重复性好 只要操作认真 均可得到可靠的结果 生长速率法的优缺点 缺点 对供试菌种要求较严格 病菌要易于培养 生长较快且边缘整齐 产孢子缓慢 而且是农业生产上重要的病原菌 对供试药剂要求 有一定的耐热性 遇热不易分解 多菌灵 carbendazim 对小麦赤霉病菌的毒力测定 供试菌株 小麦赤霉病菌 Fusariumgraminerarum 敏感菌株2021和抗性菌株JT04 试验目的 掌握生长速率法测定杀菌剂毒力 供试药剂 98 多菌灵原药 由江苏龙灯化学有限公司提供 多菌灵用0 1MHCl分别配成10000 g mL 100 g mL母液 剂量设置 1 测定敏感菌株2021 取一定量的100 g mL母液多菌灵母液 加入到50mLPSA中 每个处理3个重复 2 测定多菌灵抗性菌株JT04 药剂浓度为 0 对照 1 25 2 5 5 10 20 40 g mL 取400 L10000 g mL母液 加入到100mLPSA中 即得40 g mL 然后梯度稀释 每个处理3个重复 1 制备含药培养基 准确取一定量的药液加入到热的培养基中 混匀 倒入灭菌的培养皿中 待冷凝后即为含药培养基 2 制备菌饼 用无菌的打孔器在供试菌种边缘打下菌块即菌饼 在无菌条件下进行 3 移植菌饼 用接种针将菌饼 有菌丝的一面向上 移植到含药培养基平板的中央 一个培养皿接一个菌饼 4 测定菌落直径 25 培养3天 取出培养皿测量菌落直径 每个菌落十字交叉测两次直径 取平均值 操作步骤 数据处理 将抑制率换算成机率值 作为Y 将药剂的剂量数值换算成对数值 作为X 直线回归 求出毒力回归方程Y a bx 计算EC50 注 菌饼直径为5mm 抑制率机率值80 15 845255 95 148453 75 092938 74 712930 14 478519 44 1367 剂量剂量对数2 62 32501 7251 412 51 1 实验报告要求 多菌灵对小麦赤霉病菌2021 JT04菌丝生长的抑制效果 除草剂的毒力测定 几个概念 抑制中浓度 指抑制50 测定指标时除草剂的浓度 需采用毒力回归方程的方法计算 最高无影响计量 不影响作物生长发育的最高剂量 是除草剂对作物是否有影响的剂量分界线 相对毒力指数 除草剂A的相对毒力指数