肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞标志蛋白Podoc.doc

肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞顶端膜蛋白Podocalyxin的影响武文斌 杨帅帅 (山东省潍坊市益都中心医院肾脏科 262500)【摘要】目的 观察肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者尿足细胞顶端膜蛋白Podocalyxin(PCX)的影响,以期阐明其部分治疗机理。方法 对32例糖尿病肾病早期患者服用肾炎康复片治疗(每日3次，每次5 粒)疗程为3个月。在治疗前和治疗3个月后分别监测尿足细胞顶端膜蛋白(PCX)、尿蛋白肌酐比值(ACR)、N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、可滴定酸(TA)、铵(NH4+)，然后对治疗前后进行疗效评价。结果 治疗3个月后，尿PCX较治疗前有非常显著降低（P0.01）；尿ACR和NAG较治疗前有明显减低(P0.05）。结论 肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者足细胞损伤有保护作用，从而有效减少蛋白尿,保护近端肾小管；但对远端肾小管影响不明显。【关键词】糖尿病肾病；早期；肾炎康复片；尿足细胞顶端膜蛋白Effect of Shenyankangfu Tablet on Podocalyxin in patients With early Diabetic NephropathyWuwenbin,yangshuaishuai(Yidu Centre Hospital of Weifang City in Shandong Province,Weifang 262500)【Abstract】Objective Observing the effect of shenyankangfu tablet on Podocalyxin in patients with early Diabetic Nephropathy to clarify partial therapeutic mechanism.Mathods Give 32 of patients with early Diabetic Nephropathy shenyankangfu tablet to treat for 3 months（5 tablet thrice daily）.To detect the urinary podocyte apical membrane protein (PCX), Urine protein creatinine ratio（ACR）,Immunoglobulin G (IgG),N-acetyl-D-glucosaminidase (NAG), Titratable acid (TA), Ammonium (NH4+) before treatment and after 3 months of treatment，then evaluate the efficency of before and after treatment.Result Aftertreatment for 3months, PCX were very significantly dereased（P0.01）;ACR and NAG were significant decreased than before treatment(P0.05).Conclusions shenyankangfu tablet on patients with early Diabetic Nephropathy podocyte injury has a protective effect, thus effectively reducing proteinuria and protecting the proximal tubule, but have no effect on the distal tubule.【Key words】Diabetic Nephropathy ,early,shenyankangfu tablet; urinary podocyte apical membrane protein糖尿病在我国的发病率逐年升高，糖尿病肾病是其主要并发症，也是引起死亡的主要原因1。足细胞是组成肾小球滤过膜的主要成分，也是阻止大分子物质滤过的屏障，其肾脏受损时，足细胞表现为足突融合、收缩、胞体缩小等变化，继而与血管基底膜剥离，脱落至肾小囊中，随尿液排出2。足细胞脱落后大量蛋白质自肾小球渗漏，导致毛细血管袢透明变性，最终导致肾小球硬化3。足细胞表面覆盖一层称为Podocalyxin(PCX)的顶端膜性蛋白4。新近表明 4尿液PCX是糖尿病肾病最早期的病理改变。为此我们观察了糖尿病肾病早期患者服用肾炎康复片前后尿液PCX及相关指标的变化，以期阐明其部分治疗机理。1 资料和方法1.1 一般资料32例患者均为我院2009年2月2011年10月门诊就诊的糖尿病肾病早期患者，其中男23例，女9例，年龄4059岁，平均（4411.7）岁，均符合1999年WHO 糖尿病诊断标准，尿白蛋白/肌酐比值(ACR)在30300mg/g之间,血压、肾功能正常、无泌尿系统感染、心、脑血管病。1.2 治疗方法所有患者均保持原有胰岛素等治疗不变,在此治疗基础上加服肾炎康复片（天津同仁堂集团股份有限公司），每日3次，每次5 粒，疗程为3个月。1.3观察方法 对符合条件的32例患者，治疗前及肾炎康复片治疗3月后分别留尿进行足细胞顶端膜蛋白PCX、ACR、乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、可滴定酸(TA)、铵(NH4+)检测。1.4仪器与试剂 1.4.1尿PCX、NAG采用ELISA法,酶标仪应用美国产Micro Reder 4型,试剂由太阳公司提供。1.4.2 TA、NH4+采用上海医疗设备厂生产的ZD-2型自动电位滴定仪测定,方法同许国章等5使用的方法。1.4.3 ACR采用比色法，应用日本生产的日立-7600型生化检测仪测定。1.5 统计学处理实验数据用样本均数标准差(s) 表示，统计分析采用t检验，应用SPSS17.0 for Windows统计软件处理。以P0.05为有统计学意义。2结果2.1糖尿病肾病早期患者治疗前后尿相关指标的变化比较见表1糖尿病肾病早期患者治疗后尿PCX较治疗前有非常显著的降低(P0.01);尿ACR、NAG较治疗前有明显降低(P0.05)；尿TA、NH4+治疗后有所升高，但治疗前后比较无统计学意义（P0.05）。组别例数PCX(mg/l)ACR(mg/g)NAG(g/g)TA(mmol/l)NH4+(mmol/l)治疗前326.110.72332.1287.9257.6218.2717.9911.7329.6915.34治疗后324.910.49202.5479.9932.8112.1619.0411.5431.3312.57t2.80632.45382.2880.1480.179p0.010.050.050.050.05表1 糖尿病肾病早期患者治疗前后尿相关指标的变化比较表(s)3 讨论糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症，糖尿病导致的肾脏损害几乎可累及肾脏所有结构，并且一旦出现肾功能损害，其进展速度远快于非糖尿病肾病患者。随着社会经济发展和生活方式的改变，尤其人口老龄化进程的加速，糖尿病肾病已成为影响人类健康的一个重大问题 6。糖尿病肾病治疗的关键在于早期发现和治疗，而目前反映肾功能损害的指标如肾小球滤过率、血清肌酐、血清尿素氮、内生肌酐清除率等敏感性较差，不能早期发现肾功能异常，对肾功能障碍的早期诊断和治疗的临床指导价值不大。足细胞紧贴在肾小球毛细血管的外面，有很长的突起，相互交错对插，在突起之间形成滤过裂隙，表面覆盖一层滤过裂隙膜，膜上有411nm的小孔，是滤过膜的最后一道屏障,也是肾小球中最易受到伤害的细胞部分7。PCX是存在于足细胞细胞膜和裂隙膜表面的一层特异性唾液酸糖蛋白，带有负电荷, 是阻止大分子蛋白滤过的重要电荷屏障，为特异的足细胞标志蛋白6，7。以往认为足细胞损伤是糖尿病肾病蛋白尿导致的继发性改变，但近年研究显示在糖尿病肾病早期，足细胞的结构和功能就已经受到损害 8。有研究发现足细胞的脱落在出现尿蛋白之前，是肾病最早期的病理改变,当糖尿病患者足细胞受损伤后,尿沉渣中检测到PCX含量明显增加,且与血糖水平存在密切关系9，10。由此可见，可通过检测尿PCX水平来反映糖尿病肾病患者足细胞的功能状况，对糖尿病肾病进行早期诊断。本研究中，32例糖尿病肾病早期患者经肾炎康复片治疗后，尿PCX、ACR指标均较治疗前明显降低，治疗前后比较有统计学意义。由此表明,肾炎康复片能够通过修复糖尿病肾病早期患者足细胞顶端膜蛋白PCX的功能,部分改善电荷屏障的作用,减少白蛋白排泄，但具体作用机制尚不清楚。NAG是一种高分子量（约130KD）的溶酶体酶，在近端肾小管上皮细胞中含量特别丰富。正常情况下，尿中的蛋白以胞饮方式进入细胞和溶酶体，形成次级溶酶体，将蛋白分解为氨基酸重新返回血液循环，每日只有少于20%以胞外分泌方式进入肾小管腔。由于NAG分子量较大，血液中的NAG不能通过肾小球滤过，仅能通过肾小管上皮细胞以胞吐的形式向尿中分泌少量的NAG，过多的白蛋白可以激活肾小管上皮细胞内的溶酶体酶，使尿中NAG增高，可以作为早期诊断近端肾小管损伤的灵敏指标。但由于血NAG不能通过肾小球滤过，因此尿NAG只能作为近端肾小管损伤的指标，而非肾小管重吸收的指标6。本研究中，32例糖尿病肾病早期患者经肾炎康复片治疗后，尿NAG指标均较治疗前明显降低，治疗前后比较有统计学意义，表明肾炎康复片可有效保护糖尿病肾病早期患者近端肾小管的功能，结合PCX、ACR结果综合考虑其保护机制可能与尿白蛋白的减少有关。尿TA和NH4这两种检测数据主要是反映肾小管的酸化功能，尿TA和NH4异常，说明肾小管酸化功能障碍，也代表远端肾小管功能损害程度11。本研究对肾炎康复片治疗前后，尿TA和NH4进行对比发现，两者治疗后均有所升高，但治疗前后比较无统计学意义。表明肾炎康复片对远端肾小管无明显作用。综上所述，肾炎康复片对糖尿病肾病早期患者足细胞损伤有保护作用，从而有效减少蛋白尿,保护近端肾小管；但对远端肾小管无影响。参考文献1.杨琪，汪建国，潘涛，等. Synaptopodin 在肾小球病变中的表达研究J.中国组织化学与细胞化学杂志，2004，13（4）：487.2.成丽岚，郑少雄，等. 足细胞损伤与糖尿病肾病的研究进展J. 医学综述，2008，14（3）：412- 413.3.Schieppati A，Remuzzi G. The future of renoprotection：Frustration and ProtmisesJ. KidneyInt，2003，62（4）：1947- 1955.4.司徒瑞儒，何卓雄 尿液足细胞顶端膜蛋白podocalyxin 在糖尿病肾病早期诊断中的意义J 中国现代医生杂志，2010，48( 21) : 101-1025.许国章，钟路，陈天善，等.309例成年人尿酸化功能指标的检测J.中华肾脏病杂志，1988,4（2）：73-76.6.黎磊石，刘志红.中国肾脏病学M.北京：人民军医出版社，2008.626.7.Pavensta HDT,Kriz W,Kretzler M.Cell biology of the glomerular podocyteJ.Physiol Rev,2003,83(1):253-3078.谌贻璞，余学清.肾内科学M.北京：人民卫生出版社，2008,71.9. HaraM,Yanagihara T,Kihara I, et a.l Apical cellmem