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全血胆碱酯酶活性的测定 三氯化铁比色法 有机磷农药的简单回顾 全血胆碱酯酶活性测定概述 三氯化铁比色法 有机磷农药organophosphorouspesticide 接触机会 生产 施用 食物 误服 自杀 毒作用机制 抑制体内胆碱酯酶 ChE 活性 使体内乙酰胆碱大量积聚 引发神经系统功能紊乱 诊断 职业急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准 GBZ 2002 职业史现场职业卫生调查临床症状体征实验室检查 全血胆碱酯酶 ChE 活性 诊断分级标准 全血ChE活性范围急性轻度中毒 50 70 急性中度中毒 30 50 急性重度中毒 30 以下 实验目的 加深对有机磷农药中毒机制的认识掌握全血ChE活性测定的意义掌握全血ChE活性测定原理 方法 意义 有机磷农药中毒的重要诊断指标中毒者治疗后的效果观察指标接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标 方法 Asch DTNB比色法 GBZ52 三氯化铁比色法溴麝香草酚蓝 B T B 比色法纸片法Biocheck法 便携式分析仪 三氯化铁比色法 原理 器材 刺针一次性自控式微量吸管 20 l 分光光度计恒温水浴箱 37 0 5 试剂 磷酸盐缓冲液 PH 7 20 碱性羟胺溶液1 2盐酸溶液10 三氯化铁溶液乙酰胆碱标准应用液 1ml含4 mol 分析步骤 1 乙酰胆碱标准曲线的绘制2 样品测定 1 乙酰胆碱标准曲线的绘制 1 取六只具塞试管 配制乙酰胆碱标准色列 2 各管加碱性羟胺4ml 立即振摇3min 3 各管加1 2盐酸溶液2ml 振摇1min 4 各管加10 三氯化铁溶液2ml 摇匀 过滤 5 测吸光度 520nm 参比管 第1管 6 绘制标准曲线 2 样品测定 计算 1 被水解的乙酰胆碱吸光度 对照管吸光度 B管 样品管吸光度 A管 2 查标准曲线 得出被水解乙酰胆碱 mol 即0 02ml血经37 30min反应条件下的胆碱酯酶活性绝对值C 3 胆碱酯酶活性相对值 浙江地区健康人胆碱酯酶活性绝对值男 3 22 0 336 mol女 3 19 0 398 mol 注意事项 采血前先准备好试管 加入磷缓采血时严格消毒 用过的棉球 刺针集中放置准确控制水浴温度和放置时间加三氯化铁显色后 在20mi
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