香椿叶中总黄酮的提取方法及药理作用研究进展.doc

香椿叶中总黄酮的提取方法及药理作用研究进展李宝霞 董双涛 冀小君 蔡翠芳 山西生物应用职业技术学院 030031【摘要】本文对香椿叶中总黄酮的提取方法及香椿叶的药理作用研究进展做了综述，以备相关研究者参考。【关键词】香椿，总黄酮，药理作用香椿（Toon sinensis Roem）为楝科香椿属落叶乔木，又名椿、椿芽、椿甜树、椿阳树等1。香椿因其浓郁的香气，柔嫩的质地和独特的口感，深受人们的喜爱，是我国传统的调味蔬菜，同时又是一味多用的良药。本草纲目记载：椿叶、椿皮、椿根性温味微苦，无毒，均可入药。1 香椿叶中总黄酮的提取方法 现有文献报道的关于香椿叶中总黄酮的提取方法主要有以下几种：1.1超临界 CO2提取在此方法下，最佳提取工艺：称取 50g原料，设定萃取压力 30MPa，萃取温度 45，分离室温度 35、压力7Mpa；分离室温度 35、压力与储罐平衡；萃取时间2.5h；夹带剂用量为3mL/g原料：CO2流量 35L/h，提取 5次,前 2次用无水乙醇、后 3次用 85%乙醇做夹带剂，提取物平均得率0. 5%2。1.2微波辅助提取 在此方法下，最佳提取工艺：乙醇浓度50%，料液比1:40(g/mL)，微波作用时间9min，微波功率500w，总黄酮得率4. 285%3。1.3超声波辅助提取在此方法下，最佳提取工艺：乙醇溶液浓度40%、乙醇用量40 mL1g粗粉、超声电功率150 W、作用时间40 min、超声频率20 kHz，在这个条件下试验，总黄酮提取率为98. 24%4。1.4酶法辅助提取在此方法下，最佳提取工艺：酶浓度0.20mg/mL，酶解温度45，酶解pH 5.0，酶解时间120min，浸提温度90，浸提时间120min，料液比140。总黄酮得率可达2.00%5。1.5半仿生法提取在此方法下，最佳提取工艺：称取香椿叶粉25g，分别以pH=2的盐酸溶液，pH=7.5、pH=8.5的氯化氨-氨水的缓冲溶液作为提取液，料液比 112(g/mL)，在 80条件下，每次提取1h，共提取3次。在此条件下, 黄酮提取量为10.3417mg/g香椿叶 6-7。1.6常规溶剂提取1.6.1溶剂回流法提取 在此方法下，最佳提取工艺：料液比19、温度70、提取时间90min、乙醇浓度70%、提取4次。香椿叶总黄酮提取量为20.154 5mg/g8。1.6.2乙醇浸提法 在此方法下，最佳提取工艺：乙醇浓度70%、料液比150、浸提温度70、浸提时间2. 0 h，在此提取工艺条件下香椿叶总黄酮的提取率可达5.84%9。1.6.3碱提酸沉法在此方法下，最佳提取工艺：准确称取一定重量的样品，加入6倍样重的蒸馏水，煮沸。在搅拌条件下，缓慢加入石灰乳至pH 89。在此条件下，微沸 2030 min , 趁热过滤。滤渣再加入 6倍量的水，同上操作 1 次，合并滤液。在 6070 下，用盐酸调节 pH至5.0 搅匀，静置24 h, 抽滤。沉淀物水洗至中性 , 60恒温下干燥得粗提物。1.7不同提取方法提取效率的比较黄酮提取率大小顺序为：微波法酶法超声波法常规溶剂回流法超临界 CO2提取半仿生提取法。由于微波提取时伴有搅拌，可以使试样与试剂的接触界面不断快速更新，有助于提高提取效率，同时微波技术具有即时深层加热作用，极大地缩短了提取时间，特别有利于用连续微波萃取线作连续式生产10 。在常规溶剂提取方法中总黄酮的提取率：乙醇回流法乙醇浸提法碱提酸沉法。相比之下，乙醇回流法操作简单，溶剂易回收，且工业酒精价格便宜，是一种可行的方法11。2香椿叶的药理作用2.1抗菌作用陈元坤12等研究表明：香椿皮水煎液及乙醇处理后的水煎液对大肠杆菌C83902、沙门氏菌C500、葡萄球菌CAU0183 的最小抑菌浓度为0.125 g/mL，对大肠杆菌K88分离株的最小抑菌浓度为0.25 g/mL；朱育凤等13的研究表明，香椿叶水、醇提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌有抑杀作用。2.2抗炎作用阮志鹏14等研究认为，香椿叶水提物抗炎作用机制：低、高剂量香椿叶水提物可降低肿胀足爪组织中NO及PGE2 （血清中前列腺素 E2）含量；低剂量香椿叶水提物可降低血清中NO含量。香椿叶水提物可能通过影响炎症介质释放和减少NO的生成而起到抑制角叉菜胶性大鼠足肿胀作用。2.3抗癌作用陈玉丽15等研究香椿叶不同提取部位的体外抗肿瘤作用，香椿叶提取物的各萃取部位在体外对SGC-7901（人胃腺癌细胞）和K562（白血病细胞）有明显的抑制作用，乙酸乙酯部位的半数抑制浓度分别为168.47g /mL 和102.53g /mL。结果表明：香椿叶提取物的各萃取部位能抑制人胃腺癌细胞SGC-7901和白血病细胞K562的增殖，有较强的体外抗肿瘤活性。2.4对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用寻找有效的非酶糖基化抑制剂，以解决糖尿病慢性并发症的发生和发展，是研究者的一个重要课题。陈绍红16等通过建立体外蛋白质非酶糖基化模型, 研究了在体外模型中香椿叶醇提物对蛋白质非酶糖基化具有抑制作用。2.5体外抗氧化作用香椿叶中70 %乙醇提取物在菜油中的抗氧化性较强，与柠檬酸的协同效果最好，其抗氧化能力均强于单个乙醇提取物和单用柠檬酸的抗氧能力。另外，用70 %乙醇提取物在猪肉保鲜防腐方面有明显的作用17-18，是天然抗氧化剂的良好来源。陈丛瑾等19测得香椿叶提取物以总黄酮计算的清除DPPH（1，1-二苯基苦基苯阱）的半数抑制浓度（IC50）值约为芦丁的6.7倍、槲皮素的3.3倍、没食子酸的1.6倍。王昌禄等20研究表明，香椿老叶提取纯化后的物质具有很强的抗氧化活性，采用Fe3+被还原成Fe2+的方法测定的总还原力时总还原力为（863.5913.90）mg/g；DPPH清除能力和Fe3+还原抗氧化能力测试（FRAP）均呈现明显的剂量依赖性关系，显著高于相同浓度的2，4 二叔丁基甲基苯酚（BHT）（P0.01），与同浓度的维生素C相当。可以使用不同的抗氧化模型来评价香椿叶提取物的抗氧化活性21-25。3结语综上所述，香椿作为我国药食两用的植物具有较强的药理作用，国内外的研究多集中在香椿叶和香椿树皮上, 对化学成分的研究多集中在总黄酮、没食子酸及衍生物及多糖类成分, 并且对黄酮和多糖类成分药理作用的研究较多。因此有必要对香椿中的挥发油进行进一步提取分离，以期开发出一种天然无害的可用于食品的香料物质。【参考文献】1中国科学院中国植物志编辑委员会中国植物志M北京：科学出版社，1997.2 周富臣，卢斌斌，李炎强等香椿叶超临界CO2 萃取物在卷烟中的作用研究J香料香精化妆品2008,8（4）：26-29.3孟志芬，谷永庆，张伟钢香椿叶中总黄酮的微波提取工艺J光谱实验室.2008,11(3):1095-1098.4 丁彩梅，曾荣华，丘泰球等香椿叶黄酮类化合物超声强化提取研究J中成药2005,12（12）：1390-1391.5 孟志芬，董彩霞，任多胜酶法提取香椿叶中总黄酮的工艺研究J光谱实验室2005,9(5):1086-1089.6 陈丛瑾，黄克瀛，王贵武等香椿叶总黄酮不同提取方法的比较J食品研究与开发.2009,3(3):57-59.7 陈丛瑾，黄克瀛，李德良正交试验法优选香椿叶总黄酮的半仿生提取工艺J食品科技2007,6:119-121.8 陈丛瑾，杨国恩，黄克瀛溶剂回流法提取香椿叶总黄酮的工艺研究J. 中国药房2008（19）：2108-2110.9 黄红英，邓斌，周芸等香椿叶总黄酮提取工艺的研究J.安徽农业科2010,11（38）：5879-5881.10刘川生.微波萃取技术在天然药物提取中的研究进展J.中国天然药物,2003,1(3):187-19.11 李秀信, 张院民, 刘青利, 香椿果实中黄酮类化合物的提取及鉴定J. 河北 林果研究.2002,6(6):126-128.12 陈元坤，欧红萍，房春林等香椿皮及臭椿皮体外抑菌活性测定J. 四川畜牧兽医2011（5）：27-28.13 朱育凤，周琴妹，陶开春臭椿叶与香椿叶的比较鉴别及体外抗菌试验J中药材，2000，23（8）：484.14 阮志鹏，陈玉丽，林丽珊香椿叶水提物对小鼠炎症抑制作用J中国公共卫生2010,3(26):334-336.15 陈玉丽，阮志鹏，林丽珊等香椿叶提取物的体外抗肿瘤活性J福建中医药大学学报2011，21（2）：30-3216陈绍红, 任鹏康, 赵云涛香椿叶醇提物对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用J安徽农业科学2010, 38( 11): 5642 564317 李秀信，张院民，刘青利等香椿叶提取物抗氧化作用的研究J.内蒙古农业大学学报2002,9（23）：114-117.18 余铀，两种天然抗氧化剂对猪肉保鲜效果的比较研究J食品科学，1995，16 (10) :69 7119 陈丛瑾，黄克瀛，李德良等香椿叶提取物清除DPPH自由基的测定方法J.林产化学与工业，2006，26（3）：69.20 王昌禄，江慎华，陈志强等香椿老叶中活性物质提取及其抗氧化活性的研究J农业工程学报，2007，23（10）：229.21 Chen HY，Lin YC，Hsieh CL. Evaluation of antioxidantactivity of aqueous extract of some selected nutraceuticalherbsJ. Food Chemi，2007，104（4）：1 418.22 周丽，张京芳，陆刚等不同生长期香椿叶片的抗氧化活性及其抗氧化作用分析J西北植物学报，2007，27（3）：526.23 田迪英，杨荣华果蔬抗氧化活性的研究J食品与发酵工业，2003，29（4）：3724