Brg1基因在宫颈癌中的表达.doc

【摘要】 目的 研究Brg1蛋白在宫颈癌中的表达，探讨其与肿瘤发展的关系 。方法 应用免疫组化S-P法研究40例宫颈癌中Brg1蛋白的表达和正常宫颈及癌前病变组织中的表达，初步探讨其与宫颈癌的发生、发展甚至预后的关系。结果 40例宫颈癌组织中Brg1蛋白的表达率为75.0%，子宫颈上皮内瘤变组织（CIN）中为47.5%，正常组织中为27.5%，存在明显的差异。结论 Brg1蛋白在宫颈癌组织中存在明显的高表达，并与宫颈癌的发生发展有一定的相关性。 【关键词】 宫颈癌；Brg1；免疫组化Brg1 Protein expression in cervical cancer Wang Xiuming，He Lianzhi Departement of Medical Oncology,The Second Hospital of Wuhu,Wuhu 24100,China Abstract Objective To investigate the expression of Brg1 protein in cervical cancer, and to study its relation with tumor development.Methods The expression of Brg1 protein detected by immunohistochemical in 40 cases of cervical cancer was analyzed for their roles in cervical cancer development and prognosis.Results In 40 cases of cervical cancer, 75% of Brg1 protein expression were datected which was higher than that in CIN tissue 47.5% and in normal tissue 27.5%. There were significant differences among three groups.Conclusion An increased expression of Brg1 protein in cervical cancer was associated with the development. Key words Cervical cancer；Brg1； Immunohistochemical20世纪90年代以来由于实验室技术的发展，目前已被克隆和未被克隆的抑癌基因已达30余种，而且新的抑癌基因还在不断出现。Brg1基因作为一种新发现的抑癌基因，国外有人在研究Brg1与肺癌、前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌等的关系中，发现它是一种重要的抑癌基因。本研究通过免疫组化的方法，观察Brg1基因在宫颈癌、子宫颈上皮内瘤变（CIN）、正常宫颈组织中的表达，探讨Brg1基因在宫颈癌的发生发展中的作用。1 材料与方法1.1 材料来源 选择弋矶山医院和我院2005年7月至2007年6月的石蜡切片宫颈癌标本共40例，为IaIIb期，CIN标本40例，为CINIICINIII期；正常宫颈40例；宫颈癌标本有淋巴转移11例，无淋巴转移29例。1.2 Brg1蛋白免疫组化检测技术 选取最佳石蜡组织块，脱蜡至水化后，采用抗原修复处理的链霉素抗生物素蛋白S-P法染色，DAB显色，实验步骤按说明书进行。S-P试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司，Brg1抗体为美国Santa Cruz公司，用已知阳性切片作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。结果判断标准：Brg1染色阳性细胞为细胞核呈棕黄色至深褐色，部分细胞质同时为黄色，若只有细胞质着色，可视为阴性。其中阳性细胞75%为强阳性。1.3 统计学方法 组间率的比较采用2检验，应用SPSS13.0进行统计分析，以P0.05为差异有统计学意义。2 结果 Brg1在宫颈癌组织及子宫颈癌前病变组织、正常宫颈组织中均表达于细胞核，呈棕黄色至深褐色，部分细胞质同时为黄色。在宫颈癌组织中Brg1蛋白为强阳性表达，在子宫颈癌前病变组织中为中等阳性表达，在正常宫颈中为弱阳性表达或不表达，在正常组织、CIN、癌的发展过程中其表达强度逐渐增加（见封三图1、2、3、4，表1）。Brg1蛋白在癌组织中的阳性表达率为75%，在子宫颈癌前病变组织中的阳性表达率为47.5%，在正常子宫颈组织中阳性表达率为27.5%，三组之间的差异具有统计学意义（2=18.20，P0.05），两两比较发现，Brg1蛋白的阳性表达在癌组织与CIN组织之间的差异具有统计学意义（2=6.37，P0.05），癌组织与正常组织相比较，差异也具有统计学意义（2=18.06，P0.05）。见表2。表1 Brg1蛋白在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌组织中的表达强度，表2 Brg1蛋白在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率（略）。本组40例宫颈癌标本均为Ia-IIb期手术标本，随着临床期别的升高，其阳性率明显升高，但差异无统计学意义（2=1.18，P0.05），分别比较任意两组之间的差异亦无统计学意义（P0.05）；而在有淋巴结转移的宫颈癌组织中，其阳性率较无淋巴结转移组高，但差异无统计学意义（2=0.38，P0.05）。见表3。表3 Brg1蛋白的表达与宫颈癌临床期别和淋巴结转移的关系（略）3 讨论 Brg1是SWI/SNF家族的重要组成成分，定位于人类染色体19p，其mRNA长约5247 bp，基因编码的蛋白质相对分子量2.05105。它主要通过ATP水解产生的动力来影响细胞分裂过程中染色质的重排，使一些特异性的基因不能表达和抑制1。Murphy等研究发现，Brg1可以E2F非依赖方式抑制c-fos的转录2-3，表明它是一种重要的抑癌基因。也有人研究发现，SWI/SNF家族与许多基因的激活有关，也与转录的抑制有关，它主要通过转录的活化和抑制功能来控制肿瘤的生长4。不同的研究发现Brg1基因在前列腺癌及胃癌组织中高表达，而在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失5-7。本研究结果表明Brg1蛋白在宫颈鳞癌组织中高表达，其阳性率明显高于宫颈上皮内瘤变组织和正常宫颈组织。在本研究中，我们同时还发现Brg1蛋白在宫颈鳞癌中的表达以强阳性表达为主，而在正常组织和子宫颈上皮内瘤变组织中，其表达以弱阳性为主，这说明Brg1蛋白在癌组织中的表达强度明显高于正常组织和子宫颈上皮内瘤变组织。Brg1作为抑癌基因，其蛋白或mRNA却在宫颈癌等组织中高表达，且表达强度明显高于其他组织，分析其原因，可能与其启动子异常甲基化、基因突变及其转录激活功能异常等因素有关。这时，异常表达的基因产物可能已失去抑癌基因原有的生物学效应，即功能丢失或产生转录激活作用。 国内有人研究在胃癌、前列腺癌中Brg1高表达与肿瘤的分期、有无淋巴结转移及浸润深度等临床病理因素有关5-6。本研究结果发现Brg1表达与宫颈癌的临床分期、有无淋巴结转移等因素有一定的相关性，且随着肿瘤分期的增加，Brg1蛋白的表达有逐渐增加的趋势，只不过这种差异没有统计学意义。同时我们发现，在有淋巴结转移的宫颈癌组织中，Brg1蛋白的表达明显较无淋巴结转移组高，但进一步进行统计学分析则无统计学意义，这可能与样本量过小有关。提示Brg1在术前预测宫颈癌分期，判定有无淋巴结转移方面可能有益，也许可以作为评价肿瘤恶性度及进展和预后的一个指标。Brg1蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变以及宫颈癌组织中其阳性表达率逐渐升高，这表明随着由正常宫颈组织至宫颈上皮内瘤变最后到宫颈鳞癌的发生发展过程中，Brg1基因可能与宫颈癌的上述发展过程有一定的相关性，Brg1基因的这种功能丢失或转录激活作用均可能发挥着一定作用。 总之， Brg1基因作为一种抑癌基因，在子宫颈癌组织却表现为癌基因的活性，究其原因，可能是Brg1基因在宫颈组织中发生了功能丢失或转录激活作用，从而失去了其抑癌作用，进而在宫颈癌的发生发展的过程中可能起着一定的作用，为我们判断宫颈癌的生物学行为和预后提供一个参考。【参考文献】1 陈春林, 张随学. 在体女性盆腔动脉血管网数字化三维模型构建方法及意义J. 中国实用妇科与产科杂志. /yxyy/main/index.php.2011(04) 2 徐玉静,欧阳振波,刘萍,陈春林. 磁共振成像在子宫肌瘤动脉栓塞术中的应用价值J. 中国实用妇科与产科杂志. 2011(04) 3 方驰华,苏仲和. 数字医学技术在胰腺肿瘤诊断和可切除性评估中的研究J. 实用医学杂志. /xyfm/class/. 2010(10) 4 欧阳振波,刘萍,余艳红. 女性骨盆研究进展及意义J. 中国实用妇科与产科杂志. /chuanmei/class/.2010(02) 5 刘萍,余艳红,陈春林,欧阳振波,宋小磊,王宏琢,昌仁民,王建平. CT扫描计算机三维重建女性骨盆的研究方法和应用J. 中国实用妇科与产科杂志. 2010(01) 6 欧阳振波,张随学,刘萍,陈春林,唐雷,李泽宇,黄睿,钟光明,梁波,全显跃,刘畅,钟世镇. 宫颈癌子宫动脉血管网模型的构建及其三维可视化研究J. 中国临床解剖学杂志. 2009(06) 7 吴龙,周义军,高劲松,孙建永,李玉飞,马俊,金科. 女性盆腔的MRI三维重建J. 第四军医大学学报. /qikan/class/. 2009(12) 8 张绍祥. 数字化人体与数字医学的研究概况及发展趋势J. 第三军医大学学报. /.2009(01) 9 高成杰, 张随学,裴强,徐达传. 成人盆腔血管多层螺旋CT三维重建初步研究J. 中国临床解剖学杂志. 2006(01) 10 单锦露,张绍祥,刘正津,谭立文,林支付,唐泽圣. 中国数字化可视人女性盆腔的计算机三维重建J. 解剖学杂志. 2005(03) 11 续靖宁,邓晓红. 子痫前期患者血清游离脂肪酸浓度测定的临床意义J. 右江医学. 2009(02) 12 刘增佑,朱艳宾,王淼,崔艳双, 张随学,胡群英. 巨噬细胞集落刺激因子与妊娠期高血压疾病相关性的初步探讨J. 中国妇幼保健. 2010(31) 13 佟艳,张晶,钱荣华,李蕊. 血清钙水平与妊娠期高血压疾病的关系分析J. 河北医药. /news/class/.2010(24) 14 林丽珍,杨茵. 妊娠期高血压疾病的临床预测研究进展J. 中国优生与遗传杂志. 2010(11) 15 狄海红. 妊娠期高血压疾病子痫前期对胎儿的影响J. 临床医学. 2011(09) 16 张随学,杨彦,杨伟文. 可溶性细胞间粘附分子-1在妊娠期高血压疾病中的作用J. 中国妇幼保健. /news/class/. 2007(09) 17 马丽,叶新红,张文静. 311例妊娠期高血压临床