PX2 PCR仪.doc

PX2热电循环1.1概述PX2为快速、准确的热电循环仪。其特点高容量、高速度及极好的动态一致性和精确的样品温度控制附属模块执行无矿物油热电循环。1.2 PX2系统 PX2系统由一个控制主机和内置可更换的模块组成。每个主机根据样品格式需要更换模块进行操作。有以下六种模块：0.2ml标准梯度模块模块包含下列：196孔有缘的聚碳酸酩板196孔有缘的聚碳酸酩板196单个的聚碳酸酩;板960.2ml管960.2ml管0.5ml标准梯度模块模块包含下列：48标准0.5ml的单个管原位模块该模块与4部标准的显微镜滑坡相匹配。384孔模板该板为1*384孔的有缘的聚碳酸酩板温控方法该系统的温度循环块由精度金属铝制成。这确保了在试管与模板之间接触良好，可以快速准确的将热从模板传送到样本。1.活跃的试管控制在0.2ml和0.5ml模块中精确的样本温度控制可以通过活跃试管控制得到。在样品管中热敏电极检测温度及信息将精确反馈到温控模块以得到最佳的循环过程。2.模拟试管/模块控制当不适合使用热敏电极时，模拟试管和模拟模块反应可以选择。例如在微量反应中（20ul）或在96孔或384孔管及板中反应。温控算法与激活管相似，但它是基于样品温度计算值，而不是热电管的反馈值。3.模拟滑轨控制模拟滑轨控制选择IN SITU 模块。这个操作原理与模拟试管操作原理相似，但它的算法是基于在标准玻璃显微镜片表面最高点的设置温度。加热与冷却PX2扩展模块提供精确、可靠的热电循环系统。扩展铝模块加热及冷却是通过PELTIER技术。为证明其耐性，在执行应用程序中例如PAPDS 和不同的显示模块处于佼佼者，其循环温度接近周边温度。在所有的反应模式中，模块控制循环温度从22到99循环反应。另外，静态孵化步骤可以在4低温度下执行。程序及操作新键盘及大显示屏设计的结合保证用户简易操作。在程序运行时显示屏相关的程序包括样品温度，循环次数及剩余时间的信息。PX2可以执行温度控制反应所有类型的程序，从简单的单步孵育到复杂的多步温度循环程序和温度梯度实验。三个附加的温度控制软件选项在高级编辑菜单中用户可以得到：温度斜面，时间增量和温度增长。包括预设程序在内仪器有99个存储程序的空间。梯度交换模块选项。预设程序PX2提供十个仪设置好的程序，在F:THERMO目录中存储0-99个程序，可以使用户马上运行程序。这些已设程序含有常规的热电循环技术，通过编辑创建定制程序。（参见附录V）高级编辑-温度斜面温度斜面能使样本改变率人工的下降。在正常环境温度循环时间是非常迅速的，可以减小不明确的反应。在温度循环期间样品温度改变速率受控制使得不影响模块的一致性和准确性。在某种情况下，它对限制温度改变的速率是有利的。例如；为了在焖火的教材和DNA之间允许短或退化的教材的有限的扩展综合走稳固双方的教材/模板。高级编辑-时间/温度增长该特点使得时间间隔和/或具体的程序步骤的温度随连续的温度循环增加或降低。在后来的循环中酶活动的恶化中它对补偿增加扩展时间间隔。可选择的，温度增加可以使用，例如；在px2循环反应中焖火温度随连续循环降低。高级编辑-梯度（可选）px2梯度焖火参数迅速优化使用。15的最大温度梯度通过96孔板可以执行。PX2的校准每台机器用在试管中微型热敏电极或连接微型滑轨校准。其同时放置在几个模块的位置，确保在所有的样品中获得所需的温度和孵育时间。1. 3热盖热盖不需要石蜡或煤油涂盖层温度循环程序就可以运行。在热电循环完成之前这样的蒸汽屏障为阻止蒸汽的正常需要。该系统与大多数反应样品格式相配，例如。0.5ml,0.3ml,0.2ml管和96/384孔板。在大多数情况下，当打开无油方式的情况下实验程序大部分将不会改变。热盖可以通过与反应管或孔的顶部连接的定位热盘操作。热盘加热的温度比样品温度高。当它加热或冷却时，这将提高空气温度，相关的样品温度，减少蒸发以致减少反应物的凝集。在模块水平下的反应容器壁上的凝集是基于热电循环的特点。 凝集度是小的不会影响反应。在小量反应中使用油层是必要的。热盖操作打开热盖拧转旋钮将热盖打开以便在open lid排列在仪器前面。关闭热盖到到结束，轻轻地降低盖。压力；通过旋转旋钮加紧热盖可以调整试管和模板的位置，以便相关的图标排列在仪器的前面。它将默认试管压力，要将模板压力显示在机器前请顺时针旋转旋钮。在选择使用哪一之前要慎重考虑。当使用0.2单元任何消耗(包括压缩垫)在设置它其是一块板的试管上在块的边界上面其高度超过10mm应该被使用。加热盘的温度设置在120在选择板模式之前请提示热电管必须去处。开盖图标 试管图标 模版图标控制主机影响电源控制加热模板温度设在120（最大温度表面温度）。热盖里的加热模板开或关可以从程序中执行。警告：在正常运行期间，反应容器的顶部和热盖表面（尤其是在里表）都变得非常热。接触表面将会灼烧。无安全手套不要接触热模板。1. 4输入/输出接口在仪器单元后部为电源输入接口。仪器的通讯接口为由9针D-Type 连接的RS323/485通讯接口。使用划归开关连接到连接器上可以选择通讯程序（定位于仪器的的基线上）。靠近仪器前段位置连接相应的RS232，靠近仪器后部的位置连接相应的RS485。第二章 PX2热电循环仪安全事项日常安全事项1. PX2仪应被专业人员或培训过的人员使用。仪器必须依照操作提示及注意安全事项使用。2. 在使用前，仪器必须被设置到合适的主电压。3. PX2为一级设备。为减少电击危险，仪器主电源线必须连接保护地线。4. 更换的保险丝的电流、电压和型号与机器相匹配。5. 不能在易爆的环境中操作。6. 如果仪器受到损坏或液体或物品进入机器中请勿使用机器。切断电源与服务维修中心联系。7. 不要擅自拆除仪器。为避免意外发生确保仪器安全，仪器应当由专业人员维修。8. 在仪器运行过程中，反应容器的顶部和加热盖的表面（尤其里面）热度很高。接触表面可引起烫伤。如无安全手套请勿触摸加热盘。9. 放置仪器请确保无电源。10. 当安装/移动可改变模块确保仪器电源关闭。在使用之后BLOCK HEAT 可能变热。如机器需使用请带手套更换模块。11. 该机器为射频干扰抑制电路。使用直流电压测试绝缘电路。详细信息请与联系热电公司。2.2标志PX2设计了安全操作标识。仪器标识如下列所述。I表示主机电源开关处于开的位置。O表示主机电源开关处于关的位置。要得到进一步信息请参照操作手册。警告：表示高温危险。要继续操作要小心以避免烧伤。安全提示：该提示表示高压。电击危险。另外，安全提示：表示潜在危险，它可能导致严重受伤或死亡。2. 警告：表示潜在危险，它能导致用户轻度或中度受伤选择安放位置1. 尽可能避免让主机连接浮动电压。2. 在PX2系统中，风扇可以排除余热。风扇的入口3. PX2仪器应放在稳定的水平桌面上，要避免阳光直射及强热或强冷的气流。在温度循环时要保证热盖关闭，即使热盖没打开。4. PX2所需的室内温度为4-34，相对湿度为 80%。该计算可在0-2000m浮动。模块安装以及拆除1. 从包装箱内取出模块和控制主机放置到桌面上。请不要马上连接电源。2. 打开盖（通过逆时针拧把手打开热盖）使模板第四章热点循环仪操作提示4.1初始界面（使用仪器后面的开关打开仪器，当初次打开仪器完整的初始界面进行自检程序。（a） 在五秒之后屏幕将显示“自检程序正在进行”。自检程序检测热电4. 2主菜单5.在初始界面完成之后，首先得菜单显示为主菜单。只要通过按“菜单”在任何时候都可以返回主菜单。主菜单显示日期，时间和模块状态。（工作，不工作，或工作准备）通过主菜单可以进入每个程序。表4.1为主菜单的功能。运行 选择运行可以运行存在的程序手工 选择手工操作可以运行手工统计孵育程序 选择程序可以进行编辑，复制，浏览和停止一个程序。选项 选择建立可以更改时间，日期和电源恢复功能和显示对比度设置和鉴定软件版本号选择计算可以进入梯度计算软件（针对与相关的梯度程序）可改变的主菜单功能的选择可以通过按动在显示器下的热键即可。具体功能将在下面章节中讲述。6. 3操作键PX2软件设计直观；下表将对每个操作见的基本操作功能作简要的介绍。3. 2表操作键键盘 功能输入键 选择菜单和程序输入键菜单键 返回到主菜单（可以作为返回建）字母键C键 用来输入参数用来选择程序程序/目录用字母来命名软键 该键主要根据屏幕显示来改变其功能及模块的状态。例如：工作或不工作启动/停止程序在屏幕周围移动在屏幕之间移动在选项之间移动4.4建立功能通过按相关键在主菜单中选择OPTS进入SET UP 菜单。在SETUP显示屏幕中，相应的模块类型，当前的版本号，日期和时间将显示在屏幕上。在CLOCK键下闪烁的光标表示当按输入键应用的程序被选择。左键和右键用来改变选择返回键可以返回上次屏幕。时钟时钟显示格式的日期和时间可以被修改。要设置时钟或改变和改变格式，选择屏幕上的SETUP子菜单中的CLOCK通过应用TOGGLE键美国（月/日/年）或欧洲（日/月/年）格式可以选择。按ENTER或使用PREVIOUS NEXT键移动到时间/日期设置的范围。应用数字键输入时间（小时和分钟）以及日/月/年的相关信息。按BACK返回到先前界面或按ENTER键确认改变或返回主菜单。电源无效简述如果在运行期间电源突然中断，PX2将自动将开关关闭。仪器将设置到程序（在中断发生循环和设置点，或放弃程序。从SET UP菜单中选择POWER然后按ENTER. 使用TOGGLE键选择ABANDON 或RESUME选项。按动CONTINUE 键返回主菜单。仪器将会纪录它所发生步骤、阶段和循环中断次数。（提示如果电源中断多次，仪器将会纪录最近中断的状态）4.5梯度计算一旦在凝胶体上运行样品，最佳的凝胶体结果的焖火温度将会使用梯度计算功能。*从主菜单中选择OPTS进入梯度计算。*使用左右光标键移动光标到CALC按ENTER.*您所使用的模块类型将自动显示。应用字母键在最佳的实验中输入最小焖火温度和梯度范围。*从1到12 孔的温度将按顺序以条形图表的方式显示。每栏的 计算温度将显示在条形图表的左侧。*按BACK键返回到梯度计算屏输入新的参数或按MENU返回主菜单屏幕。梯度计算可以在任何时候进入，即使在模块激活的时候。按MENU返回主菜单。3. 6运行一个程序PX2软件的设计保证运行一个已储存好的程序是简单的。*在主菜单中，通过按相关的键选择RUN*应用方向UP和DOWN键选择根目录然后按ENTER.应用数字键选择程序编号，应用PREVIOUS和NEXT键选择相应的程序。（如必要通过UP和DOWN键返回程序。）按ENTER键程序将开始运行在开始运行程序之前，在任何时候按MENU键都可以返回主菜单。详细信息请参照第六章。*一旦相关程序选择之后，热该操作的，等待步骤，载入及运行结束的设置可以定义。在各种需要的情况下PREVIOUS 和NEXT可以用来选择。按ENTER键输入相关的选项。8最后。使用PREVIOUS和NEXT键可以改变温度控制方法。如需要按BACK键返回先前的界面。按ENTER键程序将会开始。在开始程序之前，按MENU键将会返回主菜单。详情请参照第六4.7手动操作当热电循环不需要时改选项用来静态孵育，例电极失效和酶反应。在这个模式下仪器在模块控制下操作。1. 按相关键从主菜单中选择MAN。2. 使用字母键输入用户的程序名。使用LEFT和RIGHT键移动先前/下一个字母。按ENTER 移动到温度选项。（即使用户名没输入也会发生）3. 使用字母键输入温度。按ENTER继续。4. 使用LEFT和RIGHT键选择热盖开或关。5. 按ENTER开始孵育。屏幕将显示目标温度和实际温度值以及所消耗的时间。当模块达到温度计时器将开始计时。提示：如果仪器从cold开始，在热盖操作温度开始操作之前大约需要两分钟。第五章 PX2热电循环仪Px2程序5.1介绍PX2程序易于操作的。它可存储99个热电循环程序（包括10个预编模板程序程序名可以用01-99定义，用户名可以用7个以下的字母定义。每个程序协议类型可以制定一个目录，使用用户名将归结到一组程序中。简单进入一个新程序）输入或创建一个新目录）命名一个程序）输入协议参数）保存程序5.2 目录A-E五个目录可以自由命名。第六个目录，F被预设程序保留。根据需要目录可以删除或重命名。一旦指定一个目录，程序将复制在一个相同或不同目录里。创建一个新目录1. 用适当的键盘从主菜单中选择PROG。2. 将显著的光标移到EDIT，然后按ENTER。3. 使用LEFT和RIGHT键移到NEW，然后按ENTER。4. 使用LEFT键和RIGHT键移动光标到NEW DIR然后按ENTER.5. 使用UP和DOWN键选择目录可以重新命名然后按ENTER.6. 使用字母键输入新目录名。使用PREVIOUS 键和NEXT键移动到要添加的字母的位置，当名字数完之后按ENTER键。如果没有字母输入，目录名将会保留空白。如需要BACK钮可以返回先前屏幕。编辑一个目录名简单改变一个已存在的目录名重输入新的目录名覆盖旧的目录名。1、 使用适当的键从主菜单中选择PROG。2、 在EDIT下光标闪烁，通过按ENTER选择选项。3、 使用RIGHT键移动光标到NEW通过按ENTER选择。4、 使用RIGHT键移动光标到NEW DIR通过按ENTER选择。5、 使用UP键和DOWN键选择你希望重命名的目录按ENTER键。使用6、 使用字母键盘输入新的目录名。使用PREVIOUS和NEXT键移到下一个或先前的空间。按ENTER保存新的目录名然后返回主菜单。删除和退出目录可以删除已存在的目录和程序为新的程序留出空间。1. 从主菜单中选择PROG然后在程序菜单中使用RIGHT键移动光标到COPY。然后按ENTER选择。2. 用LEFT键和RIGHT键移动光标到ERASE DIR然后按ENTER选择。3. 通过移动UP键和DOWN键选择相关目录然后按ENTER.4. 最终屏幕将显示确认KEEP和ERASE目录。53程序在PX2种的程序分为stages和steps，在简单的PCR程序中一个阶段包括3步，在每一步中的每个子程序中有温度和时间。例如第一步：30秒内保持95，第二步：30秒内保持55，第三步：30秒内保持72。另外每一段可以重复到99循环，HOLD在每一阶段的结束。PX2可以将程序分为10个独立段，每个阶段分为10个独立步。这将意味着最复杂的热点循环程序可以保存在单独的程序空间。在相关步骤里高级编辑特点可以通过按ADVANCED键（调整斜坡速度，设置平行温度的梯度，用连续循环可以改变时间/温度）详情参照5.4部分。创建一个新程序1. 使用适当的键从主菜单中选择PROG.2. 移动光标键到EDIT,然后按ENTER输入。3. 移动光标键到NEW,然后按ENTER输入。4. 移动光标键到NEW PROG,然后按ENTER输入。5. 移动光标键到目标目录，然后按ENTER输入。6. 仪器分派程序，可以用字母键输入用户及程序名。使用PREVIOUS和NEXT键移动光标，名字输入请按ENTER键。如果没有字母输入，缺省值NO NAME将输入。如需要可以用BACK钮返回先前界面。提示：如果没有程序空间，PX2可以迅速的重写已存在的程序。7. 如需要输入温度（例如95）和时间（小时：分钟：秒）。使用LEFT键移动光标或按ENTER运行到下一步。使用UP键可以返回先前界面校正错误。只有有效的时间和温度输入程序可以运行到第二步。提示：8、继续输入药设定的温度和时间，通过STAGE使用字母键输入循环辞书。在每一步后一旦程序完成12、按SAVE键保存信息或按DISCARD删除程序。在任何时候可以按MENU删除程序。编辑一个已存在的程序使用EDIT功能可以改变或重写一个已存在的程序。将提示程序将永久改变和源程序不保留。如果源程序仍需要，COPY功能应首先将程序保存到不同的程序空间（参照5.3.4）然后复制的程序将可以编辑。在相关的步骤里按ADVANCED键高级编辑特点（调整速率，设置焖火温度的梯度，改变时间/用连续循环温度）。当PX2在运行一个不同的程序使可以编辑新程序。1 使用适当的键从主菜单种选择PROG可以编辑和重协议存在的程序。2 通过按ENTER键从程序菜单种选择EDIT.3 通过按ENTER键从程序编辑菜单种选择EXISTING.4 使用UP和DOWN键移动光标到恰当的原目录然后按ENTER键。如需要BACK键可以返回上一显示程序中。5 键盘的数字间或PREVIOUS和NEXT键可以选择所编辑的程序号，然后按ENTER键选择。6 使用字母键及PREVIOUS 和NEXT键可以编辑程序名。按ENTER继续或BACK键返回上一显示程序中。7 使用数字键时间和温度参数可以改变。UP键可以用来返回上一屏幕显示目录。提示： 在一个阶段中增加步骤数量，在每一阶段末简单输入知道零时间/温度域。要减少在一个阶段中步骤的数量，输入新数据覆盖存在的时间/温度值。8. 完成阶段1的编辑，每一参数设置在零然后按ENTER键。9. 输入任意改变的循环次数或保持温度值。按ENTER键继续进行下一阶段。10. 如需要可以在下一阶段编辑步骤。一旦改变完成按SAVE钮进入保存程序。11.按SAVE键保存改变的程序或按IGNORE键保持源程序。按MENU键退出编辑。浏览已存在的程序再没有改变所包含的信息的前提下可以浏览存在的程序。1. 从主菜单中选择PROG键然后使用RIGHT键移动光标到VIEW，然后按ENTER选择。2. 使用UP和DOWN键选择合适的目录然后按ENTER.3. 使用PREVIOUS和NEXT键选择程序然后按ENTER.4. 使用NEXT键滚动程序信息，在任何时候按QUIT或MENU键返回主菜单。复制程序复制程序是必要的。例如，修改在附录5中预先设置好的程序。1. 从主菜单中选择PROG然后使用RIGHT键移动光标到COPY，然后按ENTER选择。2. 使用UP和DOWN键移动光标选择原目录然后按ENTER.3. 使用PERVIOUS和NEXT键选择要复制的目录然后按ENTER键。4. 使用UP和DOWN键移动光标选择目标目录然后按ENTER.5. 使用PREVIOUS和DOWN键选择存放程序的位置然后按COPY。所有空的文件将会有标志。也有可能程序写满。屏幕将会提示是否更改数据。然后按复制或退出。删除一个已存在的程序程序和目录可以删除为将来使用留出空间。1. 从主菜单中选择PROG然后从程序菜单中使用RIGHT键移动光标到ERASE。然后按ENTER选择。2. 在使用RIGHT键移动光标到ERASE PROG然后按ENTER.3. 用UP和DOWN 键移动光标选择相关程序的目录然后按ENTER.4. 使用PREVIOUS 和NEXT键选择相关程序和按ERASE.5. 最终的屏幕确认显示请按KEEP和ERASE保存和删除程序。5. 4高级编辑程序高级编辑特点是为了提高实验数据创建复杂循环程序。它可能为以下程序：*在循环基础上时间和温度的增加或减少。*在已给的两个温度之间温度变化率。*梯度兼容模块的梯度步骤。温度步骤功能生效可以通过按 ADVANCE 进入高级编辑特点。如果高级编辑数据已经存在ADV将显示在屏幕上。使用数字渐进入和改变高级编辑参数，按ENTER键。如果高级编辑参数加入到已存在的程序中从正常的EDIT程序菜单选项中高级编辑特点也能进入。如果需要高级编辑特点在当前步可以删除。要做该部，设置所有参数归零。ADV信息将不会显示在屏幕上，提示高级编辑功能没有运行。时间高级编辑运行举例用户能指定每次循环增加/减少时间增加应用例如高循环数反应连续循环较长时间。下面是有一个25周期程序和增加的第一个15周期的时间扩展步被5修理的一个协议的一个例子有下一个10周期的时间的秒/周期,补偿损失o fenzyme活动。 95-30s 55-30s x14次循环 72-30s 阶段2：输入要创建的参数 95-30s 55-30s x11次循环 72-30s +5s/循环1 选择PROG中的EDIT，输入+5s/循环2 使用光标键在EDIT模式中（新或存在）移动到阶段2，步骤3（相关扩展步骤）3 按ADVANCED输入高级编辑屏幕。4 使用UP和DOWN键移动到想要设置的参数。使用ROGGLE在增加和减少之间改动设置时间/循环点。使用数字键设置每次循环的时间。（每次循环5秒钟增加）提示：使用相同的键在屏幕上改变RAMP和TEMP增加/减少的参数。在做实验的期间这些参数同步改变。5 使用ENTER或BACK返回编辑屏幕。 ADV将显示在屏幕上表示高级编辑程序功能已执行。温度高级编辑运行举例 温度降低可以用在连续循环焖火温度减小（例如着地循环反应）这样品显示程序阶段1： 输入要创建的参数： 95-30s 65-30s x4次循环 72-30s 阶段2：输入要创建的参数 95-30s 65-30s-1.0/cycles x16次循环 72-30s 阶段3：输入要创建的参数95-30s 55-30s x5次循环 72-30s 1. 在EDIT模式（新或存在）移动到温度步骤。2. 按ADVANCED键进入高级编辑屏幕。使用光标键到达TEMP步骤，使用TOGGLE在增加和降低温度值。使用数字键输入想改变的数值。3. 使用ENTER和BACK移动到步骤屏，ADV将会显示在屏幕上。改变斜率在高级编辑中斜率可以修改。默认斜率为（0。00/秒）。可设的范围为0.01/秒到9.99/秒，一当前技术最大设置值为3.00。数据输入指的是斜率当前值。例如，在焖火温度和扩展温度之间一些目标需要循环顺序需要降低使用和斜率设在1/秒哦。5梯度特点该特点适用于购买0.2ml或0.5ml梯度模块的温度梯度循环。线性特点设计考虑到线性参数的快速优化和通过高级编辑进入。最小温度梯度程序运行举例1 在EDIT模式中按ENTER移动到相关的焖火温度步骤。在梯度里焖火温度进入该步骤为最低温度。未进入高级编辑中的梯度功能必须输入时间值。按ADVANCED进入高级编辑。2 在GRAD下属如所需的梯度范围1-15。3 程序编辑将会显示梯度范围G：15。如果时间增加或减小激活然后ADV也会显示在屏幕上。无效的梯度参数如果SET Annealing Temperature和Gradient结合结果在温度限值30-70度操作，PX2改变温度保持在限值范围里。例如：设置温度=60和梯度15。设置温度将会改变为55。如果温度输入超过15梯度范围那么处GRAD参数外？?错误信息将会出现在屏幕上。从1-15梯度范围将需重新输入。梯度计算功能一旦在凝聚体重运行样品，使用梯度计算功能平行温度与相应的最佳温度结果相一致。1. 从主菜单中选择OPTS进入梯度计算功能。2. 移动光标到CALC按ENTER.3. 仪器使用的模块类型将自动显示在屏幕上。在优化实验中输入平行温度和梯度范围。4. 孔的温度将按顺序从1到12以图表信息显示，计算值将显示在条形栏的左边。5. 按BACK返回梯度计算屏幕输入新的参数通过按MENU键返回主菜单。无论模块是否激活，梯度计算在任何时间都可以接受。第六章Px2热电循环在Px2中运行一个程序6.1运行选择在主菜单中使用RUN选项*运行一个已储存好的程序 *选择温度控制法用于程序*选择是否运行矿物油例如热盖选择一旦选择一个程序，程序名将会显示盖子将会预热（如被选择）然后可以开始操作。即使px2运行一个不同的程序也可以编辑程序。如果选择一个程序和不恰当的温度方法（如载客改变的模块中管控制或模拟管控制；）告警信息将会显示，程序将在正确的模式下运行。6.2 在Px2上运行一个程序-简介1. 从主菜单中选择RUN2. 使用UP键及DOWN键选择根目录然后按ENTER确认。3. 使用PREVIOUS键和NEXT键选择程序然后按ENTER或DOWN键。4. 选择热盖操作方法，在最终步骤，导入和终止运行设置，使用PREVIOUS 和NEXT键滚动选项然后按ENTER确认选项。5. 使用PREVIOUSH和NEXT键选择温控模式 ，按ENTER开始运行。BACK键返回先前界面。6. 3运行屏幕运行一个程序时有两个不同运行屏显示。第一个屏幕是文件显示，它包含在运行期间温度及运行进度的所有信息。这允许监视Px2操作和决定程序结束的时间。第二屏显示模块和试管/温度。使用LEFT键屏幕可以交替显示。该显示可以通过按RUN INFO键从主菜单进入。文件屏幕当前模块执行屏幕显示如下：*程序编号及名称。*程序状态。*使用的温控模式。*下一步的目标温度。*模拟板和模拟管的温度。*保留当前设置点的时间。*当前运行程序的状态及步骤。*完成的循环数及剩余的循环数。*在分别控制模式运行期间能得到的最大最小值。*当前时间。*计算运行结束时间（通过运行估计值将更新）在梯度步骤期间运行屏幕也显示如下：*设置梯度的目标温度范围。*获得的温度范围。*通过在A2位置模块的热电管可以定义样本的实际温度。（当运行管控制已经选择）电源失败显示如果运行中断由于电源失败或电压大幅度波动都会影响仪器。它包含以下信息：*电源失败持续时间。*当电源失败发生时正处于运行状态。电源失败当仪器处于运行状态电源突然断电。运行屏幕的结束Px2显示近期运行状态，它提供以下信息：*程序名称及编号。*仪器工作时间。*在工作期间记录的最高和最低温度。*如果电源中断显示电源中断信息。显示错误如果错误被仪器检测大量的错误信息将显示在屏幕。如要进行进一步操作请联系厂家售后服务部或与当地供应商取得联系。6.4温控选择理解温控法对正确操作热电循环是必要的。模拟管控制(激活管)建议在20ul以上的所有反应用0.5ml和0.2ml管。这种控制类型使用远距离热电探头放置在适当的管中。在反应管中矿物油的量必须与在当前控制管中的总量相当。提示：在控制管中请不要使用水状溶液。建议使用还有热敏电阻的矿物油管，因为考虑到矿物油的热电传导率。另外，PCR缓冲经常会引起热敏电阻击穿，这将减少探头的使用寿命。热敏电阻作为一个样品检测器，在循环期间当改变时监测样品温度，将信息反馈到Px2处理器。反馈将使仪器相应样品的温度确保样品获得恰当的温度和运行程序的时间。为使样品迅速升温，模块加热/冷却超过样品设置的温度。要规划/传输一个管控制程序必须理解在一个便捷的温度循环以上管控制与模块控制的不同。如使用管控制，实际的样品保持执行温度和执行时间。用模块控制，没有管控制无论是在PX2还是热电循环以上，在模块到达目标温度时间和样品到达目标温度时间之间有一延迟。这样从模块控制仪孵育时间传送程序可以减少到50%，在某些情况下温度可做轻微的调整。对激活管控制反应，监测管电阻是否连接是否放置在模块中（管电阻应放置在A2位置）当你收到该仪器，热敏电阻放置在0.2ml模块HBTC3372管中获0.5ml模块的HBTC3305管中。当一个程序用在管控制进行中不要连接管热电电阻。如发生该情况，程序将会退出和错误信息将会显示。对于TouchDwn,OmniGene和Omn-E仪器的管热敏电阻不兼容，不能用于PX2热电循环仪。扩展管热敏电极PX2可以提供扩展管热敏电极，这只用来传输程序不能使用模拟管控制。（详情参见7.3）模拟管控制（SIM管）该温度控制方法使用模拟管控制。但是，用模拟管控制，模块温度超温的特点用来此消除计算值样品温度延迟，而不是管电极的监测温度。当从模块控制仪传输程序应用相同的思维，扩展管热敏电极可再次使用。应用模拟管控制反应不需要连接管电极，当样品导入和容量细节必须进入，模拟盘控制（SIM 盘）控制方式与模拟管控制原理相似。但是，在这种情况下，控制模拟管调整以便在板孔中程序温度获得容量。系统用板是最优化的。模拟玻片控制（SIM玻片）控制方式与模拟管控制原理相似。但是，在这种情况下，控制模拟管调整以便模块控制在一个便捷的干板模块仪，控制模块温度，由于热电简介不同的样品量和消耗品我们不主张热电循环控制方式。6.5热盖预热一旦程序和模块选择（输入恰当的校准因子）程序将根据建立状态继续进行。热盖将需2分钟达到操作温度。在这期间，模块控制在4。警告：在正常运行操作反应容器顶部和热盖表面表面非常热。接触表面将引起灼烧。无安全手套不要接触热盖。热盖-自动开始对于较强的循环选择可以选择，热盖-手动开始 这适合于灵敏度高的循环反应，反应物即使在短时间内也不能低温预热，或者反应被消除。在程序被选择之后，热盖显示灯将打开，显示热盖开始预热。当热盖达到操作温度，Ready/Working显示灯将转换为绿色。报警音将提示（如果被提示）河岸START键开始温度循环。在这种模式下，混合样品，在预热完成之后，放入样品热盖将关闭。如果在90分钟之后，CONTINUE键还没有按下开始运行程序，屏幕将提示手工开始已过，运行将被清除。没有热盖如果热盖关闭（例如用油操作实验），当程序/控制/定标因数进入温度循环将开始。提示：在该模式下，热盖显示灯将保持关闭，Ready/Working灯将立即变亮。7. 6等待和暂停程序当进入程序PX2在每一步将提供等待温度的机会。样品将会保持设置温度。在运行期间屏幕将会显示HOLD.如果在两部之间插入Hold，可以按contine键程序预先进入下一步。如果Hold插入最后一步，按continue 键转换到运行主目录。Hold步常使用的方法如下：*在程序开始时插入孵育温度95度然后执行Hot Start程序。在酶加入以后，通过按CONTINE键进入程序控制循环步骤。在循环程序运行期间按PAUSE可以停止当前程序或停止下一目标温度。按CONTINUE键可以继续下一步。6.7删除程序当适当的运行程序显示，除非按PAUSE键和STOP键程序将会中断。按STOP键屏幕显示验证提示。按ABORT程序将会返回主菜单屏幕。按CONTINUE键将继续运行。6.8程序完成在程序的最后END OF RUN 将显示在屏幕上。此时，热盖将自动关闭。（如选择）将会报警模块保持2030分钟去驱动热盖周围的温度。如果最终HOLD温度设置，热盖将保持开。对于大多热电循环设备最终HOLD提升温度是不必设的。扩展高温会导致蒸发和浓缩问题，尤其对于聚碳酸酩板。6.5检查程序运行程序前，使用view功能查看程序中医确认的程序数和温度是否正确。7.2 使用SIM控制方式的程序SIMULATED TUBE确认样品管的数目（包括探头控制管）和每个管内反应样品的体积（含油覆盖层）。厚壁管应多加50l.如果使用的是聚丙烯管，应设置96个样品和正确的反应样品体积（含油覆盖层）。SIMUTATED PLATE0. 2ML BLOCK对于96微孔板，包括OMNITULTRA 96，0.2ML BLOCK 上的体积参数指的是单个样品的体积。注意:聚炳烯 OMNITUBE 96应在SIM 管控制下运行。0. 5ML BLOCK0.5ml Block 上的0.2ml 的 体积等于总的样品体积乘以10（最大值为500）。这样弥补了96孔板用在0.5ml block 上不适宜的配置。384 孔板在384孔板上，体积因数为单个样品孔的体积。SIMULATED SLIDE使用SIMULATED SLIDE 控制模式，厚度为0.8mm-1.0mm的玻璃滑板的校准因数为25（默认值）。其他厚度需要检查运行过程中获得的最大值和最小值，程序运行中出现电源错误若在程序运行中，电源出现故障，显示屏幕上将会显示一个错误信息。错误信息是电源正常后机器自动从新启动，还是终止程序，客户可以通过“SET UP”功能设定。查看block的运行状态，可以得到出现电源错误的时间和程序继续的时间。7.3 7.4 优化程序px2 编程性能可以快速优化程序。显然，温度循环程序可以包括三个截然不同的状态：1 高温（通常为90-95C）下变性2 低(聚)核苷酸融化温度下的退火。3 所用耐热酶最佳温度下的酶的活性根据使用模板的数量，这三步经常被重复20-30个循环。变性每个循环的变性步骤必须足够使DNA完全变性，包括G-C富裕的区域。但是，重复的高温培养对酶活性的影响也应该被考虑。一个扩展的初级变性步骤，（95 C ,3分钟，酶扩增前）将会使高分子重量 DNA 模块的复合体变性，要不是以后的循环，这