高考生物一轮复习 生物技术实践 第二讲 微生物的培养和利用课件（选修1）

培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长 但不影响金黄色葡萄球菌的生长 从而可将该菌分离出来在培养基中加入青霉素时可抑制细菌 放线菌的生长 从而分离得到酵母菌和霉菌 举例 依据某些微生物对某些物质的抗性 在培养基中加入某些物质 以 抑制 不需要的微生物 促进 所需要的微生物生长 原理 则异养微生物无法生存 而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存 培养基中若缺乏有机碳源 可分离自生固氮微生物 非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存 培养基中缺乏氮源时 可抑制不能利用石油的微生物的生长 使能够利用石油的微生物生存 从而分离出能消除石油污染的微生物 当石油是唯一碳源时 可分离得到耐高温的微生物 其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存 在高温环境中 可分离耐盐菌 其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存 在高盐环境中 培养基及容器 高压蒸汽灭菌法 玻璃器皿 金属用具 干热灭菌法 接种工具 灼烧灭菌法 杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 强烈的理化因素 灭菌 用酒精擦拭双手 用氯气消毒水源 化学药剂消毒法 不耐高温的液体 巴氏消毒法 日常用品 煮沸消毒法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 较为温和的物理或化学方法 消毒 应用范围 常用方法 结果 条件 操作复杂 需要涂布多个平板 不能对微生物计数 缺点 既可以获得单细胞菌落 又能对微生物计数 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 优点 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 适用于好氧菌 适用范围 从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 菌体获取 稀释度要足够高 为确保实验成功可以增加稀释度的范围 每次划线前后均需灼烧接种环 注意事项 一系列的梯度稀释 涂布平板法操作 接种环在固体平板培养基表面连续划线 关键操作 稀释涂布平板法 平板划线法 比较项目 不能区分死菌与活菌 缺点 用计数板计数 方法 利用特定细菌计数板或血细胞计数板 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 原理 设置重复组 增强实验的说服力与准确性 同时为了保证结果准确 一般选择菌落数在30 300的平板进行计数 操作 每克样品中的菌株数 C V M 其中 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 mL M代表稀释倍数 计算公式 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 通过统计平板上的菌落数 就能推测出样品中大约含有多少活菌 原理 利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征 然后筛选目的微生物 鉴定培养法 利用选择培养基对微生物进行选择培养 直接获得目的微生物 选择培养法 利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面 直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物 单菌落挑取法 如利用刚果红染色法 根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物 染色鉴别法 如培养基中加入酚红指示剂 培养某种微生物后 培养基变红说明该种微