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文档简介
第1讲基因工程和克隆技术(时间:40分钟)一、选择题1(2013杭州五校联考)下列关于动物细胞、组织培养的叙述,不正确的是()。a传代培养的原因是培养瓶中的细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭b连续细胞系是指发生了转化的细胞系,有的获得了不死性,但保留接触抑制现象c细胞系一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性等生化特性d细胞克隆的最基本要求是必须保证分离出来的是一个细胞而不是多个细胞解析细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型,病毒敏感性和生化特性等。答案c2(2013义乌模拟)克隆羊“多莉”的产生、“抗虫棉”的培育、“番茄马铃薯”的创造、单克隆抗体的制备、抗生素的生产依次是下列哪项生物技术取得的成果()。基因工程细胞工程发酵工程酶工程a bc d解析“克隆羊”“番茄马铃薯”“单克隆抗体”均为细胞工程产物,抗虫棉为基因工程产物,抗生素的生产为发酵工程产物。答案b3(2013浙江五校联考)下图1表示含有目的基因的dna 片段和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有msp、bamh、mbo、sma 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为ccgg、ggatcc、gatc、cccggg。下列叙述正确的是()。a上述4种限制性核酸内切酶中bamh、mbo切出的粘性末端不相同bbamh、mbo酶切dna后加dna连接酶重新拼接,都能被mbo再次切割cmsp、sma切出的两个末端可以用dna连接酶相互连接d作为载体的质粒上,原本一定就有抗生素a抗性基因解析bamh、mbo酶切dna后加dna连接酶拼接,仍可形成 mbo的识别位点,故可重新被其切割。答案b4(2013西城区质检)通过植物体细胞杂交可以获得“烟草菠菜”一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是()。a在融合之前除去两种细胞的细胞壁b原生质体先进行脱分化处理再融合c原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养d诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株解析植物体细胞杂交之前需要利用酶解法除去细胞壁,然后利用适宜的诱导方法诱导原生质体融合得到杂种细胞,再进行植物组织培养形成杂种植株,所以原生质体优先进行脱分化处理再融合的操作是不需要的。答案b5(2013杭州质检)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()。a从原代培养物或细胞系中选择和纯化可以获得细胞株b动物细胞培养基添加胰岛素的目的是调节血糖浓度c定期更换培养液的原因只是为了给动物细胞提供营养物质d胚胎干细胞培养时,加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化解析动物细胞培养添加胰岛素的目的在于“刺激”提高细胞克隆形成率,而不是调节血糖浓度。定期更换培养液还可以及时排除细胞产生的代谢废物。答案a6如图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图(其中ampr为抗氨苄青霉素基因)。下列叙述不正确的是()。a可同时选用限制酶pst、sma对含目的基因的dna进行切割b过程使用的dna连接酶对dna的两端碱基序列没有特异性要求c过程可采用农杆菌转化法d质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达解析本题中的抗性基因是重组质粒的标记基因,标记基因有利于筛选含目的基因的受体细胞,而不能促进目的基因的表达。答案d7(2013金丽衢十二校联考)下图表示转基因动、植物的培育过程。下列有关叙述正确的是()。a在获得目的基因的过程中,需要使用限制性核酸内切酶和dna连接酶等工具酶b受体细胞a需要氯化钙处理以增加细胞膜的通透性c过程需要用到体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植等生物技术d受体细胞b可以不经过脱分化阶段再生出完整的植株解析获得目的基因未必使用限制性内切酶和dna连接酶(如人工合成法);针对原核细胞可使用cacl2处理增强细胞壁的通透性,动物受精卵则不需要;过程不需“体外受精”。答案d8(2013浙江十校联考)毛角蛋白型中间丝(kif)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转kif基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。下列说法错误的是()。a过程中要用的工具酶是限制性核酸内切酶、dna连接酶和质粒b在过程中,用胰蛋白酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞c在培养过程中,将成纤维细胞置于5%co2的气体环境中,co2的作用是调节phd.在胚胎移植前,通过胚胎分割技术可获得较多胚胎解析质粒为基因载体而不是“工具酶”。答案a9(2013台州模拟)进行生物工程设计时,下表各组所选择的常用实验材料与实验目的配置错误的是()。选项实验目的实验材料材料特点a获得克隆动物卵(母)细胞细胞大,细胞质能有效调控核发育b植物的诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强,突变率高c获得表达生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁,产生生长激素d烧伤患者移植皮肤自体干细胞分裂能力强,且不会引起免疫排斥解析获得表达目的基因的转基因动物需将外源基因转入到受精卵中,再经胚胎早期培养及胚胎移植方可达到目的。答案c10(2013广东梅州质检二)应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品,提高了经济效率。下图表示培育生物新品种的过程,请据图判断下列叙述中不正确的是()。a图中过程需要的工具酶是限制性内切酶和dna聚合酶b图中过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料c将prg导入到细胞,则最可能是效应b细胞d图中过程中不是都发生了碱基互补配对现象解析基因工程中需要的工具酶是限制酶和dna连接酶,故a不对;植物组织培养的培养基需加入无机矿质养料、有机物和植物激素,故b对;抗体是由效应b细胞分泌的,故c对;过程重组载体的构建发生了碱基互补配对原则,过程均不发生,故d对。答案a11(2013浙江绍兴一中)应用基因工程方法,可将酵母菌制造成“工程菌”,用于生产乙肝疫苗,在制造该“工程菌”时,应向酵母菌导入()。a乙肝病毒的表面抗原b抗乙肝病毒抗体的基因c抗乙肝病毒的抗体d乙肝病毒的表面抗原的基因解析乙肝疫苗是指减毒或灭毒的乙肝病毒,利用基因工程生产乙肝疫苗时,应向酵母菌导入目的基因乙肝病毒的表面抗原的基因。答案d12(2013浙江五校联考)如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程,据图分析错误的是()。a过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理b过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变c过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能d过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理命题意图本题考查植物组织培养的过程,意在考查考生的理解及应用能力。解析植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,故需用纤维素酶和果胶酶的混合物处理获得原生质体。基因突变具有不定向性。过程(脱分化)产生愈伤组织,细胞形态、结构、功能均发生改变。生长素和细胞分裂素的不同配比,诱导生根或生芽的情况不同,故过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理。答案b二、非选择题13下图为培育农作物新品种的过程示意图。请据图回答有关问题。(1)图示育种过程涉及的生物工程技术有_、_、_等。(2)图中分别表示一个已插入外源dna片段的重组ti质粒载体的_和_。(3)图中从愈伤组织到形成完整的新品种植株的途径有两条,具体通过哪条途径主要取决于培养基中的_的种类及其浓度配比。(4)若仅用二倍体植物细胞甲的未成熟花粉培养完整植株,则该植株称为_植株,说明未成熟花粉具有_;这些植株只有通过_才能结实。(5)若要从大量培养的紫草愈伤组织中提取紫草素,则_条件是不需要的。a消毒、灭菌 b充足光照c适宜温度 d适宜养料和激素(6)用植物组织培养制作的人工种子,可解决有些作物品种的_等问题(至少答出两点)。解析(1)由图可知,上述育种过程涉及了植物体细胞杂交、植物组织培养和基因工程等技术。(2)基因表达载体中目的基因的两端需要添加启动子和终止子,同时还需要添加某种特定基因作为标记基因,便于筛选。(3)在愈伤组织经再分化形成试管苗时,培养基中植物激素(主要是生长素和细胞分裂素)的浓度配比和种类不同,导致愈伤组织的分化方向不同。(4)由未成熟花粉直接培育成的植株,属于单倍体,同时这说明花粉细胞具有全能性;于单倍体不含同源染色体,减数分裂过程联会紊乱,不能产生种子,其需要经染色体加倍处理后才可以产生种子。(5)愈伤组织的形成不需要光照。答案(1)植物体细胞杂交技术基因工程植物组织培养(2)启动子和终止子标记基因(3)植物激素(4)单倍体全能性染色体数目加倍(5)b(6)多年不结种子、果实,杂种优势倒退,生产种子受到季节、气候和地域的影响,生产种子占用大量土地(答出两点即可)14(2013金华十校期末)甲图表示一种含有逆转录病毒序列的表达型质粒,图中的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上,并能表达其携带的目的基因(注:a、b、c分别为不同限制核酸内切酶的酶切位点)。请回答下列有关问题。(1)在构建用于培育转基因动物的重组质粒时,目的基因应插入到图中的位置是_,理由是_。(2)目的基因随重组质粒被导入到细胞后,在细胞中以_方式进行复制和克隆,此过程需要消耗细胞中的_(填物质名称)。(3)乙图表示培育具有人生长激素基因小鼠的基本过程示意图。过程涉及细胞间的_和融合过程,将含有目的基因的重组质粒依据图中方法转入到受精卵中后,经过_过程和_过程,可获得转基因小鼠。小鼠出生后可以从其尾巴细胞中提取_分子进行分析,筛选出携带人生长激素基因的小鼠。若目的基因进入细胞后整合在一条染色体dna上,那么获得转基因纯合子小鼠的方法是_。解析(1)由于“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上,故宜将目的基因插入该序列中,以便整合至受体细胞中。(2)目的基因在受体细胞中应以半保留复制方式进行复制和克隆,此过程需消耗细胞中的atp及四种
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