羊水检验ppt课件

第十八章羊水检验TheExaminationofAmnioticFluid KEYPOINTS 1 Alterationsofcolorandclarityandthesignificance 2 Evaluationindexesoffetalmaturityandthesignificance 3 Methodologyassessmentandqualitycontroloffoamstabilitytest 4 Examinationindexesoftoxoplasma others rubellavirus cytomegalovirusandherpessimplexvirus TORCH infection 5 Evaluativeindexesoffetaldysplasiaandthesignificance 前言 功能 保护母体和胎儿 水 组成 溶质 有机物 无机盐 细胞 98 99 1 2 50 50 极少量 一 标本采集羊膜穿刺多由妇产科医师进行 第一节标本采集与处理 标本采集量 标本采集最佳时间 诊断遗传性疾病 诊断Rh溶血症 评估胎儿成熟度 妊娠16 20W 妊娠26 36W 妊娠晚期 35W 10 30ml 第二节羊水理学检验 一 量 参考范围 妊娠8周 5ml 妊娠10周 30ml 妊娠20周 400ml 妊娠38周 1000ml 足月妊娠 800ml 过期妊娠 300ml 2 羊水过少的原因 胎儿畸形 过期妊娠 胎儿宫内发育迟缓 羊膜病变 二 颜色与透明度 妊娠早期 无色或淡黄色 清晰 透明 妊娠晚期 乳白色 清晰或稍混浊 临床意义 黄绿色 表示羊水中混有胎粪 为胎儿窘迫的现象 棕红色或褐色 多为胎儿已经死亡 金黄色 可能为母婴血型不合所引起的羊水中胆红素过高 粘稠拉丝的黄色 表示妊娠过期或胎盘功能减退 混浊脓性或带有臭味者 表示宫腔内已有明显感染 检测原理 羊水中的肺泡表面活性物质饱和磷脂是既亲水又亲脂的两性物质 在乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时 并形成稳定泡沫层 而其他物质形成的泡沫 能被乙醇消除 用于诊断胎儿肺成熟程度 三 泡沫试验 参考范围 阳性 稀释度为1 1和1 2的两管液面均出现泡沫环 临床意义 临床上只进行稀释度为1 1和1 2的泡沫试验 若2管液面均出现泡沫环为阳性 则提示L S比值 2 0 表示胎儿肺成熟 若仅第1管液面出现泡沫环 为临界值 L S比值在1 5 2 0之间 若2管液面均未出现泡沫环为阴性 L S比值 1 49 提示胎儿肺未成熟 第三节 羊水化学与免疫学检验 一 甲胎蛋白 AFP 检测原理 火箭免疫电泳法放射火箭免疫电泳法放射免疫法酶联免疫吸附法 参考范围 妊娠15周 40mg L 妊娠32周以后 25mg L 临床意义 1 AFP减低见于葡萄胎 唐氏综合征 2 AFP增高 开放性神经管缺陷的胎儿 脐膨出 消化道畸形胎儿 先天性肾病 先天性食管闭锁 胰腺纤维囊性变 双胎 死胎等 染色体异常 糖尿病 先兆子痫 母婴Rh血型不合等 羊膜穿刺所致的胎血污染 二 胆碱酯酶 检测原理 ChE测定 丙酰硫代胆碱或乙酰胆碱作为底物 2 硝基苯甲酸为显色剂的速率法或终点法 AChE测定 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法 参考范围 AChE 10 43U L 临床意义 1 羊水中AChE活性增高与胎儿开放性神经管畸形有高度的相关性 2 AChE PChE比值 0 27者可诊断为神经管缺损 1 0者可诊断为开放性腹壁缺陷胎儿 3 AChE活性测定 可纠正羊水AFP的假阳性 三 卵磷脂与鞘磷脂 检测原理 薄层层析色谱法 thin layerchromatography TLC 参考范围 L S比值 2 0 临床意义 L S 1 49 表示肺脏不成熟 IRDS 特发性呼吸窘迫综合征 严重 L S为1 50 1 99 表示肺脏发育不够成熟 有IRDS可能 L S为2 0 3 4 表示肺脏已成熟 L S为3 5 3 9 表示肺脏肯定成熟 L S 4 0 表示过熟儿 四 肌酐 检测原理 肌酐与苦味酸反应 生成橘红色的苦味酸肌酐复合物 肌酐测定方法有去蛋白终点法和速率法 参考范围 妊娠37周 176 8 mol L 临床意义 判断胎儿肾脏成熟度 准确率高 妊娠37周时 羊水肌酐 176 8 mol L提示胎儿肾脏成熟 为132 6 176 7 mol L为临界值 132 5 mol L提示胎儿肾脏未成熟 五 睾酮 检测原理 ELISA法或放射免疫法 参考范围 男性胎儿 224 11 g L 女性胎儿 39 2 g L 临床意义 1 预测胎儿性别 2 妊娠合并糖尿病 母婴Rh血型不合 无脑儿羊水睾酮水平可降低 3 结合染色体检查 诊断胎儿性疾病 六 雌三醇 检测原理 ELISA法或放射免疫法 参考范围 妊娠末期 0 8 1 2mg L 临床意义 1 直接反映胎儿 胎盘功能 2 间接的反映胎儿在宫内发育的情况 雌三醇 1 0mg L 胎儿预后不良 雌三醇突然下降 可能为先兆流产 雌三醇减低 多见于母婴Rh血型不合 妊娠合并糖尿病 重度妊娠高血压综合征时的宫内死胎 雌三醇持续性处于低值者 可见于胎盘性硫酸酯酶缺乏症 七 胆红素 检测原理 光谱分析法 改良J G法 胆红素氧化酶法和二甲亚砜 DMSO 法 参考范围 1 71 mol L A450 0 02 临床意义 判断胎儿安危 观察胎儿肝脏成熟程度的胆红素水平 监测胎儿溶血程度 以决定分娩时机 八 葡萄糖 检测原理 葡萄糖氧化酶 GOD 法 己糖激酶 HK 法 邻甲苯胺 O TB 法 参考范围 0 56mmol L 临床意义 1 判断胎儿肾脏成熟程度的指标 0 56mmol L 提示胎儿肾脏发育成熟 0 80mmol L 提示胎儿肾脏不成熟 2 但判断肾脏成熟程度的精确度不如羊水肌酐 九 淀粉酶 检测原理 碘 淀粉酶比色法 对 硝基苯麦芽庚糖苷 4NP G7 法 参考范围 300SomogyiU L 临床意义 主要用于判断胎儿唾液腺成熟程度 1 大于300SomogyiU L 提示胎儿唾液腺成熟 2 200 300SomogyiU L为临界值 3 小于200SomogyiU L为胎儿唾液腺不成熟 十 反三碘甲状腺原氨酸 检测原理 RIA法 参考范围 2 62 8 31nmol L 临床意义 用于诊断胎儿甲状腺疾病 水平降低见于胎儿甲状腺功能减退 十一 血型物质 ABH分泌型血型的预测 检测原理 羊水中分泌的血型物质可将相应抗血清中抗体中和 2 ABH O 血型酶的测定 检测原理 A基因产生的N 乙酰氨基半乳糖转移酶 形成A血型物质 B基因产生的D 半乳糖转移酶 形成B血型物质 当有糖供体 Mn 与O型红细胞共同孵育时 羊水中的转移酶可在红细胞膜上合成A或B物质 利用血型测定的方法可检测非分泌型胎儿的血型 临床意义 为有严重ABO同种免疫史的孕妇非分泌型的胎儿血型鉴定提供了可能 为在位于ABO基因部位的遗传性疾病的产前诊断提供了可能 第四节羊水显微镜检验 一 羊水脂肪细胞计数 检测原理 脂肪细胞计数是反映胎儿皮肤成熟程度的指标 将羊水涂片用尼罗蓝水溶液染色后 显微镜下观察 计数200 500个细胞 计算脂肪细胞阳性率 参考范围 妊娠34周前羊水脂肪细胞 1 34 38周为1 10 38 40周为10 15 40周以后大于50 临床意义 大于20 为胎儿皮肤成熟的指标 10 20 为临界值 小于10 为皮肤不成熟 大于50 为皮肤过熟 二 羊水快速贴壁细胞计数 检测原理 1 正常羊水细胞需要4 5d才能贴壁生长 2 胎儿畸形 如神经管缺陷及脐疝畸形时 羊水细胞仅需20h即可贴壁生长 此种细胞称为快速贴壁细胞 RAC 具有贴壁生长快 活细胞贴壁率高的特点 通过计算活细胞贴壁率 来判断有无畸形 参考范围 4 临床意义 RAC主要用于胎儿畸形的诊断 脐疝畸形的RAC为9 12 无脑儿的RAC为100 第五节羊水病原生物学检验 一 病毒1 风疹病毒检查 检测原理 病毒分离培养法 血凝抑制试验 风疹病毒特异性IgM测定 PCR 灵敏度高 特异性强 具有早期快速诊断的价值 临床意义 风疹病毒是引起胎儿畸形的病毒之一 妊娠1 2周感染风疹病毒者 胎儿严重畸形发生率为30 80 妊娠12 18周感染风疹病毒者 10 20 胎儿可有智力障碍和听力缺陷 妊娠18周以后感染风疹病毒的危害性很低 2 巨细胞病毒检查巨细胞病毒是疱疹病毒的一种 WHO已将其列为引起新生儿出生缺陷的主要病原体 3 单纯疱疹病毒检查单纯疱疹病毒是疱疹病毒的一种 与胎儿和新生儿有关的主要是 型 二 弓形虫 检测原理 组织学 可直接寻找弓形虫的滋养体 包囊或卵囊等 血清学 有Sabin Feldman染色试验 补体结合试验 间接荧光抗体试验或间接血凝试验等 PCR 以B1基因 200 300重复序列 AF146527 或16SrDNA为目的基因 临床意义 可引起弓形虫病 为人畜共患疾病 孕妇感染弓形虫后 除了通过胎盘感染胎儿外 还可经过羊水进入消化道而使胎儿感染 孕妇感染弓形虫后 可造成流产 早产 胎儿小头畸形 脑积水 视力障碍 智力发育缺陷等畸形 第六节羊水检验的质量控制与临床应用 一 质量控制 AFP 母体AFP检测连续2次阳性时 再考虑是否行羊水AFP检查 羊水胆红素检测 要求避光 羊水泡沫试验 新鲜标本或4 冷藏 操作时需用力振荡 二 临床应用 产前诊断 一 产前诊断1 神经管缺陷性疾病 NTD 母体血清和羊水AFP增高 羊水AFP增高除了见于NTD以外 还可见于死胎 先天性食管闭锁及某些染色体病 RAC对诊断NTD具有高度的特异性和灵敏度 无脑儿的RAC贴壁率为100 脐疝畸形RAC贴壁率为9 12 2 遗传性代谢病 羊水酶学检查 限制性片段长度多态性连续分析 羊水PCR检查 减少遗传性疾病的发生率 如脂代谢病 粘多糖沉积病 氨基酸代谢病 碳水化合物代谢病等 3 染色体病 常染色体异常 先天愚型 21 三体 性染色体异常 先天性卵巢发育不全症 45 X 明确诊断 可终止妊娠 4 性连锁遗传病 常见的性连锁遗传病有血友病 原发性低丙种球蛋白血症 肌营养不良 黏多糖沉积病 型 糖原代谢病 型 红绿色盲 自毁面容综合征等 对X连锁隐性遗传病 如血友病 红绿色盲 假性肥大型肌营养不良症等家族史的胎儿 及早确定胎儿性别 男胎应终止妊娠 二 评估胎儿成熟度 1 肺成熟度2 肾成熟度3 肝成熟度4 唾液腺成熟度5 皮脂腺成熟度 三 诊断TORCH感染 TORCH是一组病原生物的英文名称缩写 即弓形虫 toxoplasmagondii 其他病原微生物 others 风疹病毒 rubellavirus 巨细胞病毒 cytomegalovirus 单纯疱疹病毒 herpessimplexvirus