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文档简介
紫外-可见分光光度计的性能检查一、 实验目的1. 掌握紫外-可见分光光度计性能检查方法。2. 学会TU-1901型双光束紫外-可见分光光度计的使用方法。二、 实验原理分光光度计性能的好坏,直接影响到测定结果准确程度。因此,要对仪器进行性能检查,以保证测定结果的准确性。三、 仪器与试剂TU-1901型双光束紫外-可见分光光度计;石英比色皿(一对);擦镜纸。0.005mol/L H2SO4溶液;6.000105g/ml K2Cr2O7的0.005mol/L H2SO4溶液;1.20%(g/ml)KCl的水溶液;5.00%(g/ml )NaNO2的水溶液;蒸馏水。四、 实验内容及操作步骤1. 波长精度与重现性检查用仪器中氘灯的486.02nm(F线)与656.10nm(C线)谱线进行检查。方法是用仪器的能量扫描功能,扫描波长范围为200760nm,得到氘灯的能量图谱。重复测定至少三次,用峰值检出得氘灯的F线与C线的实测波长值。并与理论值比较。波长精度 = 实测值 理论值重现性 = 测定最大值 最小值;或按平均偏差计,不应超出规定值。仪器波长的允许误差为:紫外光区1nm,500nm附近2nm。重现性为准确度允许误差值的一半。2. 吸收池的配对性检查将两只1cm的石英比色皿都装入0.005mol/L H2SO4溶液。以其中一个比色皿作空白,在350nm,313nm,257nm和235nm处测定另一比色皿的吸光度,记录校正值,或用仪器自动校零功能校正。3. 吸光度的准确度考察用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取120C干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,在规定的波长处(350nm,313nm,257nm和235nm)测定其吸光度值三次,取平均值,并计算其吸收系数,与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。波长/nm235nm(最小)257nm(最大)313nm(最小)350nm(最大)吸收系数()的规定值124.5144.048.6106.6吸收系数()的许可范围123.0126.0142.8146.247.050.3105.5108.54. 重现性检查以0.005mol/L H2SO4溶液为空白,用6.000105g/ml K2Cr2O7的0.005mol/L H2SO4溶液为测定样品,在313nm处测定透光率7次,其透光率最大读数与最小读数之差应不大于0.1%。5. 杂散光的检查用1.20%KCl溶液,以蒸馏水为空白,用1cm吸收池,在200nm波长下测定透光率,重复测定至少三次,取平均值,应小于1.0%。用5.00%(g/ml)NaNO2的水溶液,以蒸馏水为空白,用1cm吸收池,在340nm波长下测定透光率,重复测定至少三次,取平均值,应小于0.8%。五、 注意事项1. 仪器长期工作或搬动后,要检查波长精度等,以确保测定结果的精确。2. 测定过程中,不要关闭软件主画面。否则,仪器要重新自检。3. 测定过程中,重复测定三次,以减少误差。4. 比色皿使用注意事项:(1)清洗比色皿一般用水,若有有机物沾污,宜用HCl-乙醇(1+2)浸泡片刻,再用水冲洗,不能用碱液或强氧化性洗液清洗,切忌用毛刷刷洗。(2)比色皿使用前应用被测物淋洗3次,以保持被测物浓度不变。(3)比色皿所装溶液高度以皿高的2/33/4为宜。测试时,比色皿外壁必须干燥洁净,尤其是透光面。用毕,立即取出,洗涤干净,倒置晾干。(4)在测定标准系列各溶液吸光度时,要从稀溶液至浓溶液进行测定。5. 不允许仪器处于工作状态而测定人员离开工作岗位。6. *(切记)输入测定波长时需从长波长至短波长,例如实验内容和操作步骤项下的2和3项中四个测定波长,一定按350nm、313nm、257nm、235nm顺序输入。六、 思考题1. 为什么要对仪器进行性能检查?2. 在以上各项性能检查中,你认为哪一项最重要?(如果该项指标不合格,该仪器就不能用了)3. 本实验所用的溶液,哪些需要准确的浓度?哪些可以不需要准确浓度?4. 什么是杂散光?如何测定?5
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