ABO血型RH正定型血型复检卡标准操作规程.doc

宁波市 医院检验科管理文件分析项目SOP文件编号：XK-FXXMSOP-10/23版本：2010-A/0生效日期：20111111二十三、ABO血型/RH正定型血型复检卡标准操作规程第 1 页 共 5 页1 检验申请 单独检验项目申请：血型测定。组合项目申请：交叉配血。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集2.1.1 常规静脉采血约4ml，置EDTAK2（紫色帽）抗凝管中。2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3 标本采集后贴上条码或检验申请单一起及时运送至输血科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.4下列标本为不合格标本2.1.4.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本。2.1.4.2 对分析有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.4.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.4.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存2.2.1 标本保存时间：样本采集后应尽快进行测定，如果不能立即测定应将样本置冰箱中（28）贮存小于7天。2.2.2 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48冰箱内保存7d。3 方法原理该试剂卡是基于柱凝集原理，正常具有抗原的人红细胞将于相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠上面，而未被凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。4 试剂及其他用品4.1 试剂主要组成部分：BioVue ABO/RH血型复检卡由6个微柱组成.每个微柱中含有缓冲液,其成份为牛血清蛋白、大分子增强剂以及0.1%（W/V）叠氮钠和0.01M的乙二胺四乙酸(EDTA).产品编号707135 组分描述1号柱和4号柱: 抗-A血型鉴定试剂 鼠抗A(IGM)单克隆抗体混合试剂 (克隆MH04和3D3) FD&C 1#蓝色染料2号柱和5号柱: 抗-B血型鉴定试剂 鼠抗B(IGM)单克隆抗体混合试剂 (克隆NB10.5A5和NB1.19) FD&C 1#黄色染料3号柱和6号柱: 抗D(抗RH) 人抗D(IGM)单克隆抗体 血型鉴定试剂 (克隆D7B8)5 标本检测操作5.1 可采用1ML的生理盐水+用900-1000g离心5分钟的抗凝全血得到的浓度约为80%的浓缩红细胞10UL 配成浓度为0.8%的红细胞悬液 5.1.1 实验前，确保试剂卡和实验样本均平衡至室温，使用前离心，确保无气泡无断层。5.1.2 将试剂卡背面的标签（条形码一面）朝向操作者，有条形码的一面作样本标记。5.1.3 使用打孔器，将试剂卡倒置下压，插入打孔器中，然后取下密封条.5.1.4 加入50ul的0.8%红细胞悬液至试剂卡的反应腔。5.1.5使用BioVue离心机离心。5.1.6实验结束后从微柱的正反面判读结果.5.1.7在有较强阳性反应的试剂卡一侧读取并记录反应强度.5.2将病人条码扫入电脑：核对姓名、床号、住院号、病区、填写血型结果5.3 BioVue结果判读:阴性结果（-）：无溶血及红细胞未凝集。阳性结果（+）：红细胞凝集。如果发现溶血现象，则应先将血清/血浆置于56C水浴30分钟以灭活补体，然后再重复柱凝集试验，观察红细胞凝集现象。l 4反应：红细胞在柱床的上面凝集，并形成一个环形带；l 3反应：发生凝集的大部分红细胞停留在柱床的上半部分；l 2反应：发生凝集的红细胞分布于整个柱床，柱的底部有少量的细胞；l 1反应：大部分凝集的红细胞停留在柱床的下半部分，柱的底部有少量的细胞l 0.5反应：大部分凝集的红细胞穿过柱床，在柱的底部形成一个间断的（不平整的）红细胞聚集带，聚集带上方有少量凝集的红细胞l 0阴性：所有红细胞均穿过玻璃珠，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。6 检验结果的报告6.1 结果的报告6.1.1 结果经审核，确认准确无误后发出报告。6.1.2 报告单上标明报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。6.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。7 参考范围ABO血型系统包括四种血型：A型、B型、AB型、O型RH血型系统:阳性、阴性8 临床意义8.1 该BioVueABO血型/RH血型复检卡仅用于确认ABO血型和D鉴定,用于,门诊病人的血型检查.在输血病人中为了准确鉴定ABO血型，必须做正定型，以及反定型核对。8.2 准确鉴定ABO血型，可避免部分输血反应，为正确输血做准备。ABO血型的鉴定是输血工作中最基本但必不可少的工作。9 结果审核9.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。对输血前配血结果，必须经过审核。9.2 审核者认真审核定型结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。10 注意事项10.1 应严格按照“实验步骤”和“结果判定”部分说明的步骤和方法进行，以确保实验的准确性。试剂卡应在密封条开启后一小时内使用，离心必须在反应腔加样后30分钟内进行。10.2由于抗原老化，陈旧红细胞可能会比新鲜细胞所表现的反应性弱，经酶处理过的红细胞不应与这些试剂一起使用。10.3应采用可接受的试验方法对通过此实验方法呈现D阴性的红细胞作进一步检测，确认其是否存在弱D或部分D抗原。10.4当测试的红细胞被抗体严重“包裹”时可能会发生自身凝集，由于这种情况很少发生在抗D试剂上，因此所得的试验结果可能无效。10.5 实验样本中血清蛋白浓度异常会导致红细胞凝集，这可能会被判为凝集。10.6 对含有自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时，往往被误定为AB