企业培训_食品分析与检验方法

食品分析与检验方法 主讲 孙伟峰博士E mail sunweifeng1024 四川省质量技术监督局检验人员培训系列讲座之三 感官分析法食品卫生常规检验重量分析法容量分析法 主要内容 一 感官分析法 感官分析法是一种很重要的检测手段 这是由于目前一些产品的质量特性 还不能用仪器来进行 只能靠感官检验 即通过视觉 听觉 味觉 嗅觉 触觉进行检验 例如 食用油的透明度 颜色 气味 粮食的外观 干湿度 夹杂物 新鲜程度 酒类的品尝 烹调制品的色 香 味 罐头食品的外观 味道 保鲜程度等 生鲜乳的感官指标 郫县豆瓣感官指标 二 食品卫生常规检验 1 食品中细菌总数菌落总数是指在被检样品的单位质量 g 容积 ml 或表面积内 cm2 所含能在规定的条件下 培养基及其pH 培养温度与时间 计数方法等 培养所生成的细菌菌落总数 菌落总数的食品卫生学意义 直接意义 可作为食品被细菌污染程度 即清洁状态 的标志 间接意义 可推断食品鲜度 耐保藏性和致病性 二 食品卫生常规检验 2 食品中大肠菌群大肠菌群是指一群能发酵乳糖 产酸产气 需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌 该菌主要来源于人畜粪便 故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量 具有广泛的卫生学意义 食品中大肠菌群数是以每100ml g 检样内大肠菌群的最可能数 Themostprobablenumber 简称MPN 表示 卫生学意义检查大肠菌群数 一方面能表明食品中有无粪便污染 另一方面还可以根据数量的多少 判定食品受污染的程度 二 食品卫生常规检验 3 致病菌是指能使人致病的细菌 一般指肠道致病菌和致病性球菌 主要包括沙门氏菌 志贺氏菌 金黄色葡萄球菌 致病性链球菌等四种 卫生学意义致病菌与疾病直接有关 因此一般规定在食品中不允许检出 菌落总数和大肠菌群属于卫生指示菌 主要用于评价食品的卫生质量和安全性 可允许在食品中存在 但不得超过规定的限量 三 重量分析法 1 水分测定 水对食品的重要性 水是食品的天然成分 影响食品的状态 感官性状 对腐败的敏感性等 食品中的水分一般是指在100 左右直接干燥的情况下 所失去物质的总量 恒重法 GB5009 3 用比水沸点略高的温度使定量试样中的水分全部汽化蒸发 而不破坏粮食和油料试样本身的组织成分 根据所失水分的质量来计算水分含量 食品标准与水分含量 水分测定操作过程 样品接受预处理 样品 称量瓶 准确称取适量样品于恒重称量瓶中在规定条件下干燥冷却称量干燥冷却称量恒重实验结果处理 主要操作条件和要点 预处理 样品 称量瓶 海砂 样品重量和称量瓶规格干燥条件干燥剂 样品预处理 原则 在采集 处理和保存过程中 须防止组分发生变化和水分散失 称量瓶的预处理 用烘箱进行干燥处理 在100 的烘箱进行重复干燥 以使其达到恒重 两次称量质量差不超过2mg 干燥之后的称量皿应存放在干燥器中 称量瓶放入烘箱内 盖子应该打开 斜放在旁边 取出时先盖好盖子 用纸条取 放入干燥器内 冷却后称重 样品重量和称量瓶规格 样品重量 一般控制干燥残留物在1 5 3g 样品重量和称量瓶规格 称量瓶及其规格 干燥温度 一般是95 105 对含还原糖较多的食品应先 50 60 干燥然后再105 加热 对热稳定的谷物可用120 130 干燥 对于脂肪高的样品 后一次重量可能高于前一次 由于脂肪氧化 应用前一次的数据计算 干燥时间a 恒重 最后两次重量之差 2mg 基本保证水分蒸发完全 b 规定时间 根据标准方法的要求 称取样品 103 2 干燥 称量瓶恒重 2 4小时 干燥器内冷却 两次差不超过2mg为恒重 0 5小时后称重 再烘l小时 冷却称重 避免手段 使用清洁干燥的海砂和样品一起搅拌均匀 再将样品加热干燥直至恒重 作用 防止表面硬皮的形成 可以使样品分散 减少样品水分蒸发的障碍 用量 依样品量而定 一般每3g样品加20 30g海砂就能使其充分分散 其他 硅藻土 无水硫酸钠 在干燥过程中 一些食品原料可能易形成硬皮或块状 结果成不稳定或错误 干燥器中的干燥剂 干燥器中一般采用硅胶作为干燥剂 当其颜色由蓝色减退或变成红色时 应及时更换 干燥剂在135 下干燥2 3h后可重新利用 三 重量分析法 2 灰分测定原理 550 灼烧法 标准法 是根据灰化原理 即在空气自由流动下 以高温灼烧试样 在灼烧过程中使有机物质氧化成气体逸出 其中矿物质元素生成的氧化物则残留下来 此残留物即为灰分 仪器 坩埚 电炉 马福炉等 步骤 称样坩埚小火炭化 电炉 灰化 马福炉 结果判定 白色或灰白色 三 重量分析法 3 脂肪的测定 GB T5009 6 将粉碎或经处理而分散的干燥试样 放入圆筒滤纸内 将滤纸筒置于索氏提取管中 利用乙醚在水浴中加热回流 提取试样中的脂类于接受烧瓶中 经蒸发去除乙醚 再称出烧瓶中残留物的质量 即可计算出试样中脂肪的含量 一般食品用有机溶剂浸提 挥干有机溶剂后得到的重量主要是游离脂肪 此外 还含有磷脂 色素 树脂 蜡状物 挥发油 糖脂等物质 所以用索氏提取法测得的脂肪 也称粗脂肪 索氏提取器 电热恒温水浴 50 80 电热恒温烘箱 80 120 将滤纸裁成8cm 15cm大小 以直径2 0cm的大试管为模型 将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型 把底端封口 内放一小片脱脂棉 用白细线扎好定型 在100 105 烘箱中烘至恒量 准确至0 0002g 制备滤纸筒 固体样品 精密称取干燥并研细的样品2 5g 可取测定水分后的样品 必要时拌以海砂 无损地移入滤纸筒内 半固体或液体样品 称取5 0 10 0g于蒸发皿中 加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后 再于95 105 烘干 研细 全部移入滤纸筒内 蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾有乙醚的脱脂棉擦净 将棉花一同放进滤纸筒内 样品处理 索氏抽提取器是由回流冷凝管 提脂管 提脂烧瓶三部分所组成 抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥 提脂烧瓶需烘干并称至恒量 索氏抽提取器的准备 将滤纸筒或滤纸包放入索氏抽提器内 连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶 由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚 加量为接受瓶的2 3体积 于水浴上 夏天65 冬天80 左右 加热使乙醚或石油醚不断的回流提取 控制每分钟滴下乙醚80滴左右 抽提3 4h至抽提完全 视含油量高低 或8 12h 甚至24h 可用滤纸或毛玻璃检查 由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上 挥发后不留下痕迹 抽提 回收溶剂称重 取出滤纸筒 用抽提器回收乙醚 当乙醚在提脂管内将虹吸时立即取下提脂管 将其下口放到盛乙醚的试剂瓶口 使之倾斜 使液面超过虹吸管 乙醚即经虹吸管流入瓶内 按同法继续回收 将乙醚完全蒸出后 取下提脂烧瓶 于水浴上蒸去残留乙醚 用纱布擦净烧瓶外部 于100 105 烘箱中烘至恒量并准确称量 或将滤纸筒置于小烧杯内 挥干乙醚 在100 105 烘箱中烘至恒量 滤纸筒及样品所减少的质量即为脂肪质量 所用滤纸应事先用乙醚浸泡挥干处理 滤纸筒应预先恒量 脂肪自动测定仪 1 蛋白质测定 GB5009 5 2010 将含有蛋白质的样品与浓H2SO4共热 其中的氮变成铵盐状态后再与浓碱作用 放出的氨用酸吸收 滴定剩余的酸 即可算出含氮量 具体测定步骤可用消化 蒸馏 吸收与滴定 四 容量分析法 CompanyLogo 消化 蒸馏消化液 40 氢氧化钠加热蒸馏 放出氨气 用4 硼酸吸收 用盐酸标准溶液滴定 指示剂用混合指示剂 甲基红 溴甲基酚绿混合指示剂 国标用亚甲基兰 甲基红 指示剂红色绿色红色 酸 碱 酸 用过量的H2SO4或HCl标准溶液吸收 再用NaOH标准溶液滴定过剩的酸液 用甲基红指示剂 吸收与滴定 总氨基酸的测定 GB T5009 124 2003 原理 食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸 经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后 与茚三酮溶液产生颜色反应 再通过分光光度计比色测定氨基酸含量 其最低检出限为10pmol 2 氨基酸的测定 氨基酸自动分析仪 测定步骤 样品处理 匀浆机打成匀浆 或尽量将样品粉碎 于低温冰箱中冷冻保存 均匀性好的样品如奶粉等 使样品蛋白质含量在10 20mg范围内 在水解管内加入6mol L 1盐酸 抽真空 封管 在 110 1 的恒温干燥箱内 水解22h后 取出冷却 将水解液全部转移到50mL容量瓶内 用去离子水定容 准确吸取0 20mL混合氨基酸标准 用pH2 2的缓冲液稀释到5mL 此标准稀释液浓度为5 00nmol 1外标法测定样品测定液的氨基酸含量 具体方法 取试样1mL 置于水解管中 加入1mL浓盐酸和6mL6mol LHCl溶液 抽真空融封 放入110 烘箱中水解 22h后打开水解管 转入25mL容量瓶中 用蒸馏水稀释至刻度 过滤 取滤液1mL于10mL烧杯中 置于真空干燥器中抽酸 12h后 用0 02N盐酸溶解完全抽酸后的固体 过0 45 m膜 移取400 l样品至进样瓶 等待进样 游离氨基酸的测定具体方法 将反应之后的样液加入等体积10 TCA 三氯乙酸 混匀静止2h 用双层滤纸过滤 经高速离心机10000rpm离心10min 移取上清液400 l至进样瓶 等待进样 氨基酸的测定 3 总糖测定 蒽酮试剂法食品中的总糖通常是指具有还原性的糖 葡萄糖 果糖 乳糖 麦芽等 和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量 总糖是食品生产中常规分析项目 它反映的是食品中可溶性单糖和低聚糖的总量 其含量高低对产品的色 香 味 组织形态 营养价值 成本等有一定影响 四 容量分析法 CompanyLogo 总糖是麦乳精 糕点 果蔬罐头 饮料等许多食品的重要质量指标 原理 糖与浓硫酸发生反应 脱水生成起甲基呋喃甲醛 羟甲基糖醛 再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物 该化合物在620nm处有最大吸收峰 呈色深浅 吸光度大小 与溶液中糖的含量成正比 故可比色定量 CompanyLogo 4 还原糖的测定原理 样品经去除蛋白质后 以亚甲基蓝作指示剂 用样液直接滴定标定过的碱性硫酸铜溶液 达到终点时 稍微过量的还原糖将蓝色的亚甲基蓝指示剂还原为无色 而显出氧化亚铜的鲜红色 根据样品液消耗体积 计算还原糖量 适用于各类食品中还原糖的测定 但测定酱油 深色果汁等样品时 因色素干扰 滴定终点常常模糊不清 影响准确性 四 容量分析法 5 酸价 AV 的测定酸价 是指中和1克脂肪中的游离脂肪酸所需的氢氧化钾的毫克数 单位 mgKOH g 原理 酸碱中和 酸价是脂肪中游离脂肪酸含量的标志 脂肪在长期保藏过程中 由于微生物 酶和热的作用发生缓慢水解 产生游离脂肪酸 而脂肪的质量与其中游离脂肪酸的含量有关 常用酸价作为衡量标准之一 在脂肪生产的条件下 酸价可作为水解程度的指标 在其保藏的条件下 则可作为酸败的指标 酸价越小 说明油脂质量越好 新鲜度和精炼程度越好 四 容量分析法 6 碘价碘价 碘值 100g油脂所吸收的氯化碘或溴化碘换算成碘的质量 g 原理 双键处与卤素起加成反应 碘价在一定范围内反映油脂的不饱和程度 四 容量分析法 7 过氧化值 POV值 GB T5009 37 过氧化值 是1千克样品中的活性氧含量 以过氧化物的毫摩尔数表示 原理 油脂氧化的过氧化物不稳定 能将KI氧化为I2 Na2S2O3滴定 油脂氧化后生成过氧化物 醛 酮等 氧化能力较强 能将碘化钾氧化成游离碘 可用硫代硫酸钠来滴定 用于说明样品是否因已被氧化而变质 表示油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标 四 容量分析法 7 过氧化值的测定 滴定法过氧化值是衡量油脂酸败程度 一般来说过氧化值越高其酸败程度越大 因为油脂氧化酸败产生的一些小分子物质在体内对人体产生不良的影响 如产生自由基 所以过氧化值太高的油对身体不好 测定步骤 称取2 00 3 00g混匀 必要时过滤 的试样 置于250mL碘瓶中 加30mL三氯甲烷 冰乙酸混合液 使试样完全溶解 加入1 00mL饱和碘化钾溶液 紧密塞好瓶盖 并轻轻振摇0 5min 然后在暗处放置3min 取出加100mL水 摇匀 立即用硫代硫酸钠标准滴定溶液 0 002mol L 滴定 至淡黄色时 加1mL淀粉指示液 继续滴定至蓝色消失为终点 取相同量三氯甲烷一冰乙酸溶液 碘化钾溶液 水 按同一方法 做试剂空白试验 试样的过氧化值按下式进行计算 X1 试样的过氧化值 单位为克每百克 g 100g X2一试样的过氧化值 单位为毫克当量每千克 meq kg V1 试样消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积 单位为毫升 mL V2 试剂空白消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积 单位为毫升 ml c 硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度 单位为摩尔每升 mol L m 试样质量 单位为克 g 0 01269 与1 00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液相当的碘的质量 单位为克 g 78 8一换算因子 8 皂化价皂化价 中和1g油脂中的全部脂肪酸 游离 结合的 所需氢氧化钾的质量 mg 皂化价可对油脂的种类和纯度进行鉴定 四 容量分析法 1 过氧化值 POV值 2 酸价 AV 3 脂肪4 硫代巴比妥酸值 TBA值 5