内部校准规程.doc

作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 1 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01一、温度计内部校准规程1 目的对温度计进行内部校准，确保其准确性和适用性保持完好。2范围 适用于测量溶液温度所使用的水银温度计。3校准用基准设备 外校合格的数显温度表(精度0.1).4环境条件 室温。5校准步骤 5.1 检查玻璃体是否破裂及刻度是否清晰，否则更换。5.2 用一透明容器盛装适量自然溶解的冰水混合物。5.3 把温度计有水银液体的一端放进冰水混合物中，然后观察水银柱的变化情况。5.4 待水银柱变化稳定，再对照温度计刻度是否在0的位置，记录读数。5.5 第一次测量完成后，取出温度计，待水银柱回到自然的位置后，重新第二次测量，这样连续测量三次，取得结果再取其平均值，记录在内校记录表内,允许误差1.0。 5.6以上步骤完成后，把温度计放在50以下的温水中（30为宜），用基准数显温度表进行校对（把探头放在水银柱旁边的温水中），对比并记录温度计的和基准温度表的温度读数。 5.7第一次测量完成取出温度计，待水银柱回到自然的位置后，再进行第二、第三次测量，测量结果取其平均值，记录在内校记录表内，允许误差1.0。 5.8 把温度计放在50以上的热水中（80为宜），重复5.6、5.7相关步骤。 5.9三次测量值与标准值之差，均在允许误差范围内，该温度计判校准合格。 6 相关记录 6.1内校记录表。作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 2 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01二、显微镜内部校准规程1 目的 对显微镜进行内部校准，确保样本观察清晰、准确。2 适用范围 适用于使用中和维修后的生物显微镜的自校准。3 校准所使用的主要测量设备星点板，测量范围：物镜（0-1000）X，最大允许误差：0.1%。4 校准的环境条件温度：25+2，湿度：45%+2%5 校准步骤5.1仪器外观目镜、物镜、聚光镜等部件无损坏。显微镜各移动与转动部分应有舒适感觉，不得有过紧过松现象。5.2光学系统成像质量打开光源，缩小光阑孔，校验其中心与聚光镜、物镜和目镜孔径中心重合程度。由低倍镜到高倍镜观察星点板，校验物镜之球差、色差、慧差和像散等像差。5.3改变物机镜放大倍数转动物镜转换器，改变物镜放大倍数时，观察像面中心焦离量。5.4刻度和刻字显微镜上所有刻度和刻字均须明显，清晰。6 相关记录6.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 3 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01三、微量移液器内部校准规程1 目的保证移液器加样的准确性。2 适用范围各种品牌、型号的固定、可调、单道或多道移液器。3 校准环境和用具要求3.1室 温：2025，测定中波动范围不大于0.5。3.2电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上。称量时，为保证天平内的湿度（相对湿度6090），天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。3.3小烧杯：510mL体积。3.4测定液体：温度为2025的去气双蒸水。3.5选定校准体积：拟校准体积；移液器标定体积的中间体积。最小可调体积（不小于拟定体积的10）。如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。4 校准步骤 将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头； 调节好天平； 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头； 垂直握住移液器，将吸头浸入液面23mm处，缓慢（13秒）一致地吸取蒸馏水； 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体； 将移液器以30角放入称量烧杯中，缓慢一致地将移液器压至第一档，等待13秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出； 记录称量值； 擦干吸头外面； 按上步骤称量10次； 取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，参照附录计算体积；作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 4页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01 按校准结果调节移液器。5 相关记录5.1内校记录表附录 不同温度下的纯水密度（w）温度t w 8 0.9886 9 0.9985 10 0.9984 11 0.9983 12 0.9982 13 0.9981 14 0.9980 15 0.997916 0.997817 0.997618 0.997519 0.997320 0.997221 0.997022 0.996823 0.996624 0.996325 0.996126 0.995927 0.995628 0.9954作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 5页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01四、温控设备内部校准规程1 目的确保温控设备符合相关技术参数，设定温度与实际温度相符。2 范围适用于新购置、使用中以及检修后的温控设备的校准。包括生化培养箱、恒温水浴锅、恒温摇床培养箱、干热灭菌箱等。4 校准用设备校准好的温度计3 校准方法3.1按温控设备的技术参数要求设定温度上下限，显示达到设定的温度后，放入校准好的温度计，记录实际温度。3.2记录实际温度与显示温度的差值，计算是否符合设备的技术参数要求。3.3与设备的技术参数要求不符合者，请生产厂技术人员进行检修。4 相关记录4.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 6 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01五、荧光定量PCR仪内部校准规程1目的荧光定量PCR仪是复杂精密仪器，其校准工作需由专业工程师进行。除与仪器厂家达成协议定期校准以外，以实验判断仪器校准状态也可为何时进行仪器校准提供信息。2范围新购置、使用中、检修后的荧光定量PCR仪。 3校准用试剂标准化荧光PCR试验试剂及102、103、104、106标准品。4校准方法4.1分析室内质控图，及时发现系统误差。经过分析排除了试剂和人员误差后，确定仪器是否出现了检测偏差需要校准。4.2确定仪器需校准后，进行仪器状态效验试验4.2.1准备标准化试剂及标准品4.2.2在仪器处于校准状态下，用标准化试剂对102、103、104、106标准品进行扩增实验，分别计算标准曲线的斜率、截距、相关性的控制限。4.2.3绘制标准曲线，观察标准曲线的三个参数是否处在控制范围和102标准品是否检出。4.2.4当仅有102标准品未检出时，检查实验全过程。再次上机检测102标准品。4.2.5当102标准品未检出、标准曲线的三个参数超出控制范围或仅出现后者时，先排除实验的人员、试剂因素，再重复实验。如结果依然，联系厂家立即进行仪器校准。4.3仪器经过校准后，重复该实验。5相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 7 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01六、纯水制备仪器内部校准规程1 目的确保实验室用水符合各项实验要求。2 范围新购置、使用中、检修后的纯水制备仪器。3校准用设备电阻表、酸度计、分光光度计、电子天平4 校准方法4.1取制好的各级纯水按实验室用水标准进行检测。4.2制备的水不符合标准的仪器按仪器操作说明清洗或更换滤柱。4.3检修后仪器制备的纯水重新检测，仍不合格的联系生产厂进行检修。5 相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 8页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01 附录：实验室用水标准 （中国国家实验室用水标准 G B 6 6 8 29 2） 一 级 PH 值范围（ 25 ）： 电导率（ s/cm.25 ）： 0.1 比电阻（ M.cm. 25 ）： 10 可氧化物质 以（ 0 ）计上 ， mg/L ： 吸光度（ 254nm ， 1cm 光程）： 0.001 蒸发残渣（ 1052 ）， mg/L ： 可溶性硅 以（ SIo2 计， mg/L ：0.01 二 级 PH 值范围（ 25 ）： 电导率（ s/cm.25 ）： 1 比电阻（ M.cm. 25 ）： 1 可氧化物质 以（ 0 ）计上 ， mg/L ： 0.08 吸光度（ 254nm ， 1cm 光程）： 0.01 蒸发残渣（ 1052 ）， mg/L ： 1.0 可溶性硅 以（ SIo2 计， mg/L ： 0.02 三 级 PH 值范围（ 25 ）： 5.0-7.5 电导率（ s/cm.25 ）： 5 比电阻（ M.cm. 25 ）： 0.2 可氧化物质 以（ 0 ）计上 ， mg/L ： 0.40 吸光度（ 254nm ， 1cm 光程）： 蒸发残渣（ 1052 ）， mg/L ： 2.0 可溶性硅 以（ SIo2 计， mg/L ： 作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 9页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01七、PCR仪内部校准规程1. 目的：确保本仪器的功能和运行正常，检测数据正确，特制定本规程。 2. 技术指标加热范围：可调式热盖，控制温度范围从30110。温度精度：0.1热均一性：15秒内温度均一性0.3。升温、降温速度：最快升温速度4/秒，最快冷却速度3.0/秒。电压：100240V频率：5060Hz /相功率：250W存储量：程序最多可有1000个，每个最多99步，总步骤可达1500步。3. 自校步骤3.1 打开电源开关，电源指示灯亮，仪器自校。3.2 进入控制面板，利用各种操作键编制程序。3.3 放入加好样品的Eppendorf管，关好热盖，启动程序。3.4 待程序运行结束后，取出Eppendorf管，将产物进行电泳，并与标准Marker进行比较，观察其是否与预期设计的片段大小相符。4.结果判定 将自校结果与上述各项技术指标进行比对，如二者相符，则仪器检定合格，可以正常使用；否则应及时与厂家联系维修。5相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 10 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01八、电泳仪内部校准规程1. 核查目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够达到电泳图谱正常的效果。2 使用范围：该自校程序适用于水平电泳仪。 3 技术指标 额定电压：100-120/200-240V 50-60HZ输入功率：约350W纹波系数：2%稳定度：0.5%调整率：0.5%最大电压：140V 2.5A4.检验方法4.1打开电源，在恒定电流的情况下测定电压或在恒定电压的情况下测定电流，若与显示值相符，则仪器运转正常。4.2利用配制好的琼脂糖凝胶和标准DNA Marker电泳，看两次同一Marker跑出的电泳图是否相同，若相同则仪器运转正常。5.相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 11 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01九、生物安全柜自校程序1. 自校目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够得到准确可靠的实验结果。2. 技术指标型号 NU-425 CLASS A/B3外排气循环气30%70%可选尺寸（英尺） 2、3、4、6安全性 环境保护 3检验方法3.1材料：90mm培养皿，营养琼脂培养基，酒精灯等。3.2方法3.2.1培养基的制备：在生物安全柜开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入熔化并冷却至约45的营养琼脂培养基约15ml，放置凝固后，倒置于37培养箱培养48h，证明无菌后备用。3.2.2沉降菌数测定：先打开生物安全柜内的紫外灯照射30min后，将备妥的营养琼脂平板5个，以无菌方式移入生物安全柜，置四个角落和中央各1个，开盖，暴露30min后将盖盖上。在37培养箱内倒置培养48h。3.3 结果及判定：取出平板，计算平板的生长菌落总数，求出平均菌落数，结果应1。4 .检测结论 若结果符合100级要求，则证明仪器自校合格，否则与仪器厂家联系，进行仪器调试与校正。5.相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 12 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01十、冰箱期间核查程序1.核查目的：确保本仪器的功能和运行正常，冻存效果实验要求。2.技术参数：2.1 电源：交流165V-252V（50Hz）2.2输入总功率：130W2.3总容积：301L 其中冷冻室64L，冷藏室237L2.4 冷冻能力：4kg/24h 2.5额定输出功率：1-400W2.5额定耗电量：1.3kW.h/24h2.6 外型尺寸：深655宽600高1627mm3. 核查方法：3.1 分别设定冷藏室和冷冻室的温度为4、-20，观察冰箱显示温度是否与设定值一致。3.2 将刻度完整，并能正常测温的温度计分别放入冰箱的冷藏室和冷冻室。3.3 待30分钟后，取出温度计读数。 4. 核查结果判定标准：观察温度计显示的温度刻度，冷藏室和冷冻室温度分别为4、-20，则该冰箱功能和运行正常。5.相关记录5.1内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 13 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01十一、ATB Expression 细菌鉴定仪自校规程1、 目的：为验证本仪器是否能准确地鉴定送检的常见细菌，以及仪器能否正常运行，特制定本规程。2、 使用范围：该自校规程适用于ATB Expression 细菌鉴定仪。3. 校验人员要求：校验人员应该为该仪器的负责人或熟悉该仪器操作的人员。4. 校验标准：该仪器能够准确地鉴定出标准的参考菌株（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌），并显示出各种生化反应参数（因本实验室不进行药敏实验，未购入药敏试剂条，因此涉及到药敏的内容不进行校验）。5. 检验程序5.1打开总电源开关，将电脑、ATB电源以及打印机电源打开。5.2 选择电脑的DOS系统。5.3 在C：操作符下直接键入ATB即可进入鉴定系统。5.4 试条的阅读5.4.1在主菜单上，用及按至api/ATB的项目上，然后按Enter。5.4.2屏幕上即显示3个选择：F1=目测鉴定细菌试条F2=自动阅读鉴定细菌试条F3=自动阅读药敏分析试条5.4.3目测鉴定细菌，按F1：5.4.3.1屏幕即出现各种鉴定试条的类别。5.4.3.2利用及选择所需要目测的试条名称，例如API20E，再按Enter。5.4.3.3屏幕出现记录表，再对应试条的结果，用键盘输入反应读数。F1=阳性， F2=阴性， F3=？，亦可用数字输入。5.4.3.4再按Enter确认读数，不然的话，按Delete。5.4.3.5再按Enter电脑分析开始。5.4.3.6屏幕出现所鉴定细菌的名称、结果的合理性等等资料。作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 14 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-015.4.3.7如需更详细的有关内容，可按下列键：F1=试条上生化结果F2=整体报告F3=其他试条提议F5=生化结果比较F6=打印报告5.4.3.8如需打印报告，请按F6，再按Enter。5.4.4自动阅读鉴定细菌，按F2：5.4.4.1屏幕出现红色显示，将ATB鉴定试条放于阅读器的承托架上，然后按Enter。5.4.4.2阅读器将会自动判断试条的类别，分析试条的反应情况，显示鉴定报告。5.4.4.3屏幕出现所鉴定细菌的名称、结果的合理性等等资料。5.4.4.4亦可用F键读取更详细的资料，同目测鉴定程序一样。5.4.4.5亦可用F6打印报告。5.5患病动物资料5.5.1在主菜单上，用及按至PATIENT的项目上，然后按Enter。5.5.2屏幕显示：5.5.2.1在SP.Ref一栏，输入样本编号，例如19282102，共13位，再用Enter确认。5.5.2.2在Surname栏中，输入畜主姓氏，按Enter，然后在Name项输入畜主名字，按Enter，以上可用汉语拼音。5.5.2.3在Specimen date一栏，确认样本收集日期，用Enter。5.5.2.4在Comment一栏用？加键，选择患病动物评语，例如Male指雄性，Female指雌性等，又如不需要的话，按Enter即可。5.5.2.5如需即时进行鉴定/药敏测试，请按F3，Next step即进行下一个步骤或按Enter以作存档，日后再添加测试结果。5.5.2.6屏幕出现四种鉴定模式（因应试条种类）：F1=自动阅读鉴定F2=目测鉴定作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 15页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01F3=不鉴定，只作细菌药敏Esc=Quit,离开5.5.2.7根据试条的阅读程序操作，进行鉴定（目测或自动阅读）。注意：如要将结果存档于电脑记录内，必须将所得结果VALIDTE，用Enter键于细菌名称上按一下完成细菌鉴定后，屏幕将出现患病动物样本的英文菌名称5.5.2.8当鉴定完成后，sensitivity test的字幕闪动，然后根据您的需要，提出四项药敏工作模式：F1=自动阅读F2=目测F3=不作药敏测试F4=离开5.5.2.9如需在这一个标本上多作一个或一个以上的细菌鉴定及药敏，请按F1；Add an organism=“加进一种细菌”注意：每个标本最多作5个细菌测试5.5.2.10如已完成，请按Enter作为存档5.6 对有档案号（往诊）的动物样本增加测试或更改结果5.6.1在主菜单上，用及选择Specimen或PATIENT项目上，再按Enter。5.6.2将要翻看的样本档案号输进Sp.Ref一栏中，按Enter，屏幕即显示该动物以往的鉴定及药敏结果：在sens（即药敏）一项中，X=已做，=未做。5.6.3根据您的需要，按：F1=加一种菌落F2=再做鉴定F3=再做药敏F6=鉴定要敏同做以进行修改5.7显示存档内的动物样本记录5.7.1在主菜单上，用及选择DISPLAY项目。作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 16 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-015.7.2将要显示的档案号或动物名称或标本号输入适当位置上。5.7.3屏幕显示情况：注释：Reference为样本号码 Date等于样本收集日期 G.1-G.5等于每一个样本的五类细菌的编号A=鉴定结果B=药敏结果或X=已完成=未做5.7.4用，或注明所需更详细的项目。例：在？栏内，按Enter，在.上，按Enter，即该样本的细菌鉴定及药敏资料，所用的试条及菌名。例：又可在a或b栏内，于X或符号上按Enter，即出现详细结果。5.7.5如需打印，可按F6键。6 相关记录6.1自校后应及时填写内校记录表，记录由校验人员和负责人签名。作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 17页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01十二、酶标分析仪自校规程1 检查环境温度和湿度是否满足仪器工作的需要。环境温度：5-55相对湿度：10%-85%2 用抹布清洁仪器外部。用专用的电脑百洁布清洁仪器的配件：电脑、鼠标、键盘和打印机。对于酶标板托盘等较为容易被溅出试剂污染的地方，要尤其注意清理。3 打开酶标分析仪的电源。 酶标分析仪具有开机自检功能。如果仪器的光电系统正常，顺利通过自检，液晶显示屏会自动进入样品测试界面，等待进样；如果光电系统有故障，故障内容会及时显示在液晶显示屏上。 仪器20分钟后方稳定。注意事项：A由于长时间使用，以下四个部位较容易出现失效或故障，应多加注意： 滤光片、光源灯、酶标板托盘、保险管。B如果出现故障，在专业人员指导下进行故障排除，或通知厂家进行维修，切勿私自维修。故障排除及维修方法参见仪器档案说明书。 4 打开电脑，电脑应能通过自检进入桌面。点击“酶标软件图标“应能进入且正常使用。此时，按检测程序检测一组空白样（空气），看能否顺利完成检测。若不能，仪器会自动检测，提示出错部位。检测完成后，电脑与酶标分析仪的数据传输应正常， 且能正常处理数据并打印。5 部分参数备注：光谱范围：340750nm；测量时间：单波长7s/96孔； 双波长15s/96孔。卤素灯光源寿命：长寿命卤素灯5000小时。6校验后及时填写内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 18 页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01十三、自动酶标洗板机自校程序1. 自校目的：确保本仪器的功能和运行正常，能够得到准确可靠的实验结果。2. 技术指标清 洗 头：8、12通道清洗次数：09次可调清洗条数：112排可调浸泡时间：0240秒可调振板时间：0240秒可调清洗液残留量：2uL每孔3 检验方法3.1开机后，设置好洗涤程序，12孔8条，洗液体积300L，洗涤5次。冲洗的过程中，观察吸液是否均能吸完。3.2用移液器测量洗液体积是否一致。3.3观察每次出液和吸液的液面是否一致。3.4观察洗液是否外漏。4. 核查结果判定标准：每孔洗液体积均为300L；每次吸液均能吸完；洗液无外漏现象；则该洗板机功能和运行正常。5自校结束后及时填写内校记录表作业指导书文件代号YC-ZY-B06第二版 第1次修改 第 19页 共 21 页内部校准规程实施日期2010-03-01十四、通用小型离心机自校规程1. 目的：确保本仪器的功能和运行正常。2. 技术参数容量：1210mL 转速：4000rpm 电压：220V 功率：40W 延时：024min3. 自校方法3.1 外观：应无损坏，无零配件丢失。3.2 电源连接应良好，开关控制状态应良好。3.3 启动仪器后，离心机应正常工作。各种参数的设置功能如设定温度，设定时间，设定离心速度等功能应正常。3.4 离心效率检验：取一份样品，以2000rpm、3000rpm、4000rpm几种