维生素B1片含量测定方法的验证.docx

维生素片含量测定方法的验证摘要：目的：采用紫外分光光度法测定维生素B1片中维生素B1的含量并对该方法进行验证。方法：用紫外分光光度法在246nm处测定吸光度，并用百分吸收系数法和对照品比较法计算。结论：用紫外分光光度法测定维生素B1片中维生素B1的含量操作简便、快速、准确、精密度好。关键词：紫外分光光度法维生素含量测定Keywords：Ultraviolet spectrophotometric method Vitamin B1Content determination维生素B1 维生素B1：又称盐酸硫胺（thiamine hydrochloride）或抗神经炎素，化学名甲基（甲基氨基嘧啶基）甲基（羟基乙基）噻唑!盐酸盐。遇光和热效价下降。在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液中不稳定，易被氧化和受热破坏。维生素B1制剂治疗脚气病和多种神经炎症有显著疗效；还能促进肠胃蠕动。近年来对维生素B1测定方法的报道较多，如高效液相色谱法、流动注射化学发光法、多元线性分光光度法、荧光分光光度法、毛细管电泳电化学法、氧瓶燃烧电位滴定法等。这些方法操作麻烦、时间较长。紫外分光光度法仪器较便宜，普及度高且方法的操作较简便，故本实验选用紫外分光光度法测定维生素B1含量并对该测定方法进行验证。实验内容溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶硫色素反应：特征性鉴别紫外吸收特性：Amax=246nm 含量检测与生物碱沉淀试剂反应氯化物特性：氯化物检查实验原理：特征性鉴别硫色素反应 维生素B1在碱液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素转溶于正丁醇(或异丁醇、异戊醇)中，显现于酸中消失的蓝色荧光。含量测定维生素B1有紫外吸收，Amax=246nm，1.实验装置及试剂1.1 仪器精密电子天平、紫外分光光度仪1.2 实验材料维生素B1片，维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品，维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（91000）。组成：平均片重约64mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。2.实验方法（1）测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度。实验原理：特征性鉴别硫色素反应 维生素B1在碱液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素转溶于正丁醇(或异丁醇、异戊醇)中，显现于酸中消失的蓝色荧光。含量测定（3）性质：溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶，紫外吸收特性：Amax=246nm，与生物碱沉淀试剂反应。特征性鉴别硫色素反应维生素B1在碱液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素转溶于正丁醇(或异丁醇、异戊醇)中，显现于酸中消失的蓝色荧光。（4）含量测定精密称取片粉适量，相当于维生素B125mg，置100ml量瓶中 加盐酸溶液（91000）约70ml，摇匀15分钟使维生素B1溶解，并定容至刻度，摇匀 干燥滤纸过滤精密量取续滤液1.0ml，置25ml量瓶中，共2份，盐酸溶液（91000）定容至刻度，摇匀 测 A246用吸光系数计算浓度：线性关系观察表1 线性关系观察结果序号12345浓度(mg/ml)0.51.01.52.02.5测定值0.1940.3720.5710.7670.953图1 线性关系观察结果由图可知，采用此法进行维生素B1含量的测定，在取得维生素B1标准品2ml10ml范围内线性关系很好（=0.995）精密度表2 精密度试验结果试验序号信号值平均值RSD10.3910.5331.088%20.40630.39240.38750.38660.39970.40080.394计算得重现性试验目的：考察样品溶液制备方法的可靠程度要求：同批样品按相同方法制备样品溶液，至少6份,浓度与信号值均要在线性范围内RSD 2.0% 表3 重现性试验结果测定次数123456吸光度0.6490.7130.7510.7100.6310.6020.6820.7190.7460.6410.6340.607计算得稳定性实验表4 稳定性试验结果序号时间（min）信号值平均信号值RSDRSD100.3640.3640.2088%0.2088%2100.3643200.3644300.3645400.365计算得加样