立式压力蒸汽灭菌器再验证方案.docx

第53页/共37页LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器再验证方案编号：VC00097-01生效日期：总份数：共1份起草人/日期：审核人/日期：批准人/日期：颁发部门：质量部分发部门：无LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器再验证方案VC00097-01目录1.引言32.责任人及其职责33.设备验证的风险评估44.验证内容85.偏差和变更356.资料文件的收集整理357.验证结论总结368.再验证369.公司GMP验证领导小组对本验证方案的审批371.引言1.1系统描述LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器主要用于培养基湿热灭菌，原理是通过加热管加热使锅内产生蒸汽，排出锅内空气，使锅内处于负压状态，然后通过蒸汽，使其迅速穿透到物品内部。在高温和高压的作用下使其微生物蛋白质变形凝固而灭活达到灭菌要求。控制系统采用可编程控制器为主控制器，使用触摸屏作为人机界面。灭菌器由容器、门盖、控制系统和加热系统、安全系统等组成，采用蒸汽对夹层、锅内供气。1.2设备信息设备名称LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器设备编号S03-Z-079设备型号LS-B50L设备厂家江阴滨江医疗设备有限公司安装位置南厂化验室额定频率 Hz50Hz额定电压 V220V温度可调范围0130尺寸 mm590*590*1230（mm）有效容积 L50L输入功率 W3000W设备名称立式蒸汽灭菌器1.3目的：确认LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器的安装、运行是否符合设计标准，性能是否符合使用要求。1.4范围：适用于LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器的再验证。2.责任人及其职责 2.1确认方案和确认报告的起草、审核和批准由化验室人员起草，主管或以上人员审核，质量部负责人批准。 2.2确认方案的培训由化验室人员及质量部QA对相关人员进行培训。 2.3确认的组织实施和确认过程中的变更和偏差由化验室组织实施确认，确认过程中的偏差由QA提出，质量部QA负责组织评估。 2.4确认开始前的准备工作确认工作开始前必须保证确认方案已经过批准。所有与本验证有关的仪器仪表都已校验并贴合格证，且合格证均在有效期内。3.设备验证的风险评估3.1 风险评估工具：3.1.1风险等级计算 (RPN)：RPN = O x S x D O = 风险发生的概率S =风险的严重性D = 发现风险的概率原则：三个数值各自独立发生。3.1.1.1 风险发生概率(O)：发生频率评估值不可能：每年发生小于一次或不可能发生1很低：每年最多发生3次2低：每月至少发生一次3中：重复发生4高：经常发生，有上涨的趋势或肯定会发生53.1.1.2风险严重性(S)：产品质量方面的严重程度评估值对产品质量无大影响的1对技术结果有影响，但对产品质量无影响2产品质量出现微小的缺陷，需要采取适当措施（如：对最终检测需要更频繁的监控，增加检测等）3产品质量出现重大缺陷，需要采取大规模的措施（如：不合格批，产品召回等）4可能会对客户造成伤害的重大缺陷53.1.1.3风险发现概率(D)：发现概率评估值高：能100%自动控制，且有报警系统或在之后的操作中能完全解决1一般：能100%控制，采用不同的分析方式，如：用报警系统检测生产数据或在之后的操作中很容易发现2低：经常做中控、不断监控或易发现，可控的3很低：已建立质量控制或不易发现的缺陷4不可能：无法发现或通过常规检查难以发现53.1.2RPN值的评估（RPN）风险等级值是O，S和D相乘的结果。RPN值在1-125之间，根据我公司的抗风险能力及公司实际情况采用。3.1.3依据风险等级值将风险划分为低风险、中等风险、较高等风险、高等风险、最高风险，具体如下：1-16低风险应有一定的控制措施防止风险进一步升高17-36中等风险须立即采取有效措施控制解决37-65较高等风险应立即采取有效措施控制解决，增加监控频次及力度66-95高等风险应立即采取有效措施控制解决，在得不到有效解决之前，不得继续使用96-125最高风险应停止使用整顿125停止实验整顿RPN=96无有效措施控制，不得实验RPN=65有效措施控制解决，增加监测频次及力度RPN=36有效措施控制解决RPN=16控制措施防止风险升高3.2设备验证过程中的风险分析风险项目风险因素风险分析风险等级风险后果风险控制风险控制后风险分析风险等级OSDRPNOSDRPN电源电压不稳，电源线脱落24324中等风险影响设备使用寿命，使设备损坏。定期对电源线进行检查维护检修1428低风险蒸汽管路蒸汽管道泄露23424中等风险影响人身安全，灭菌温度、压力达不到，不能有效灭菌。定期对蒸汽管道进行检查维护保养，开机前进行检查。23212低风险压缩空气压缩空气压力不当24216低风险影响电子气动阀正常工作，无法正常关闭、开启气动阀。装有压力表，开机前进行压力检查。1428低风险真空真空度过低，灭菌器中空气未排出3319低风险温度不均匀，不能达到灭菌状态。运行中实时观察显示屏真空状态，系统控制一个探头温度应都达到灭菌温度开始计时，避免温度不均匀导致无法灭活。3319低风险灭菌工艺灭菌温度不当，温度波动大于预期值25220中等风险未能灭菌，产品污染程序对温度进行监控，要求探头温度均达到设置温度，保证灭菌时间15210低风险蒸汽压力不足34224中等风险腔内温度始终达不到灭菌要求，灭菌程序无法开启。安装压力表监视压力，定期进行维护保养，且经过验证2418低风险灭菌时间不当，35230中等风险未能灭菌，使产品污染控制系统报警激活25110低风险人员操作人员没有经过相关培训，或者培训不到位。34224中等风险无法正确运行设备进行灭菌，导致污染。对相关的操作人员进行了岗位SOP的培训。加强操作人员的操作能力。1428低风险文件文件不完整或内容有错误，或者包含有让人误解的信息25220中等风险会造成操作人员的误解，影响验证结果。制定详细的相关软件，并对所有相关的文件均进行了一次核查，以确保文件的准确性。25110低风险3.3LS-B50L立式压力蒸汽灭菌器风险评价对所有已知的风险均采取了针对性措施，基于现行管理体系，我们对所有风险均采取了预防措施，以防止低等风险的升高。控制后未再出现中等及以上风险。应将所有中等以上风险重点监控，并随时防止低风险升高。直至可以接受及可控范围内。4.验证内容4.1安装确认4.1.1目的：确认该设备是否已按技术标准进行安装，安装好的设备是否符合设计要求。4.1.2 安装确认的项目设备概况的确认设备外观确认安装周围环境确认4.1.3设备概况的确认检查设备铭牌上所标型号、技术参数以及外观尺寸等，是否与原设计标准一致，检查确认表。设备概况确认表项目标准实际实际是否符合标准设备编号 S03-Z-079设备型号 LS-B50L设备厂家 江阴滨江医疗设备有限公司安装位置 准备室额定频率 50Hz额定电压 220V温度可调范围 0130尺寸 590*590*1230（mm）确认人/日期：复核人/日期：备注：4.1.4外观确认：设备外观确认表：确认项目确认内容确认结果结论外观通电检查时，外露动作应能正常动作，显示部分应有相应显示是否符合不符合箱门橡胶线门条应有一定的密封力，箱门关好，应没有明显的缝隙是否符合不符合立式压力蒸汽灭菌器装有开启式安全阀，当灭菌器内压力超过最高允许范围，安全阀应自动起跳是否符合不符合装有水位报警装置和过载保护器，使用过程中断水现象发出报警，线路过载时自动切断电源是否符合不符合确认人/日期：复核人/日期：4.1.5安装周围环境确认确认项目确认内容确认结果结论环境温度应为1525是否符合不符合环境湿度应为2070%是否符合不符合检验人/日期：复核人/日期：4.2运行确认4.2.1目的：使立式压力蒸汽灭菌器在正常生产条件下空载运行，以确认其各运行功能是否符合设计要求。4.2.2运行确认的项目运行程序确认运行试验确认4.2.3内容/程序确认4.2.3.1在使用仪器前检查仪器是否在校验周期内。4.2.3.2操作过程4.2.3.2.1把电源线插到电源插座中。4.2.3.2.2 确保放水阀和安全阀关闭。4.2.3.2.3 打开电源开关及灭菌锅盖，把蒸馏水注入其中，水位一直到指示灯显示高水位为止。4.2.3.2.4 将灭菌物品放入灭菌锅内，设定灭菌温度，灭菌时间。4.2.3.2.5 升温过程：电源指示灯和加热指示灯点亮状态，灭菌加热圈加热，温度升高。当温度升至大约99.9左右时，上面放气阀开始放气，大约5min后，关闭放气阀，将下部的放水阀开到能放出气为止。4.2.3.2.6 灭菌过程：当温度达到灭菌温度设定值时，灭菌灯亮。灭菌定时器开始计时，指示灯显示为黄色。加热指示灯间断点亮，通过温控器控制灭菌温度。4.2.3.2.7 灭菌完毕后，指示屏显示End，蜂鸣器响，待到压力降为“0”后，把上部放气阀打开。4.2.3.2.8 打开灭菌锅，取出灭菌物品。4.2.3.2.9 关闭电源。4.2.4运行试验确认确认项目确认内容确认结果结论立式压力蒸汽灭菌器启动性能检查当电源接通后，立式压力蒸汽灭菌器启动并进入运行；切断电源时灭菌器正常停机；再次启动时，灭菌器能短暂时间启动起来，并正常运行。是 否符合不符合运行参数设置检查灭菌时间范围199min可调，灭菌温度在0134范围内可调，灭菌置换温度调节范围0121，电源电压为AC220V。是 否符合不符合安全报警器当灭菌器超过允许压力范围时安全阀自动起跳，当柜内压力降至正常时自动关闭，水位装置缺水或断水时能自动发出报警声，装有过载保护器在线路中段、短路、电压过高时能自动切断电源。是否符合不符合确认人/日期：复核人/日期：4.3性能确认4.3.1目的：确认该灭菌器能否成功对培养基类物品进行灭菌，以满足质量控制要求。4.3.2性能确认说明4.3.2.1验证中，灭菌程序运行的条件为121、15分钟或30分钟。4.3.2.2性能确认过程中，须按已制定确认的操作程序进行操作。4.3.3性能确认的项目空载热分布实验满载实验热穿透实验挑战性实验培养基适用性检查实验培养基存放时间实验4.3.4空载热分布确认4.3.4.1实验说明：在未装载任何灭菌物品时检查灭菌机内不同位置的热分布情况，一是要求热分布均匀，二是要求温控器温度显示准确。4.3.4.2操作方法：将10支已校正的温度探头分别编号，放入灭菌器内，T3，T10，T4，T6探头分别置于灭菌器上层四角蒸汽口处，T1探头置于冷凝水排放口和灭菌器内温度控制和记录探头旁，T7，T9探头置于下层两侧门口处，T5，T2置于灭菌腔室下层两侧最里面，T8探头置于灭菌腔室中心处。在121、30分钟的灭菌保温条件下，按真空脉动灭菌器标准操作规程启动灭菌程序，当温度达到设定值121后每60s钟记录一次各测试点温度，空载热分布测试结果见F0值温度验证报表，空载热分布实验共重复运行3次，以检查其重现性。4.3.4.3判断标准：温度控制范围：121124，同一时间各点温差1。4.3.4.4空载温度分析，到达灭菌温度后分析人每5分钟记录一次当前温度，进行冷点确认（参考空载F0值温度验证报表）。温度探头编号表及分布图T11-I-AT91-I-ET45-V-AT105-I-ET51-V-AT113-III-CT71-V-ET125-I-CT85-I-AT151-I-A空载热分布确认表空载表1数据及时间探头 时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：空载表2数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：空载表3数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：4.3.5满载实验4.3.5.1 实验说明在灭菌器中装三角瓶，形成满载。4.3.5.2 装载方法将清洗好的三角瓶，放入灭菌器内，将验证用探头插入三角瓶中间进行温度采集。灭菌后，当温度达到设定值121后每60秒钟记录一次各测试点温度，满载热分布测试结果见F0值温度验证报表，满载热分布实验共重复运行3次，以检查其重现性。4.3.5.3判断标准温度控制范围：121124，同一时间各点温差1，灭菌结束时F0值12。满载温度分布确认表满载温度分布表1数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：满载温度分布表2数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：满载温度分布表3数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：4.3.6热穿透实验4.3.6.1 实验说明在灭菌器中装满培养基等待灭菌，形成满载。4.3.6.2 装载方法将配好的0.9%氯化钠编号，按照编号排放，将验证用探头插入0.9%氯化钠瓶内进行温度采集。灭菌后，当温度达到设定值121后每60秒钟记录一次各测试点温度，热穿透热分布测试结果见F0值温度验证报表，热穿透热分布实验共重复运行3次，以检查其重现性。4.3.6.3判断标准温度控制范围：121124，同一时间各点温差1，灭菌结束时F0值12。热穿透温度分布确认表热穿透温度分布表1数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：热穿透温度分布表2数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：热穿透温度分布表3数据及时间探头时间T1T2T3T4T5T6T7T8T9T10温差F0值最冷点次冷点再冷点偏差说明及结论：确认人/日期：复核人/日期：备注：4.3.7挑战性实验4.3.7.1确认方法：在每次进行热穿透实验的同时，将10支嗜热脂肪芽孢杆菌放立式蒸汽灭菌器内，分别在上面，下面各4支分散摆放，并按从上到下的顺序以灭菌器前部为1顺时针方向编号为1-8，灭菌器中部摆放2支编号为9.10，灭菌结束后，将生物指示剂进行检验，重复实验三次。4.3.7.2检验方法及判断标准将经过热穿透灭菌实验的6支生物指示剂同一支未灭菌的生物指示剂，一同于5660培养48h。观察是否长菌。4.3.7.3判断标准：应无菌生长。灭菌效果测试表1日期序号检验结果结论12345678910阳性对照确认人/日期： 复核人/日期：灭菌效果测试表2日期序号检验结果结论12345678910阳性对照确认人/日期： 复核人/日期：灭菌效果测试表3日期序号检验结果结论1234567894.3.8培养基适用性检查实验4.3.8.1 实验说明在立式蒸汽灭菌器中分上下两层装满配置好的营养琼脂培养基，营养肉汤培养基，胰酪胨大豆肉汤培养基各5瓶进行灭菌，形成满载。灭菌结束后，胰酪胨大豆肉汤培养基进行培养基适用性检查，对营养肉汤培养基，胰酪胨大豆肉汤培养基进行无菌性，灵敏度进行检查。重复实验三次。确定结果如下：胰酪胨大豆琼脂培养基测试表一：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含50100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果Result:菌种名称菌种编号培养时间（天）： 被检培养基对照培养基比值12均值12均值金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉被检培养基与对照培养基菌落形态大小 一致 不一致结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：胰酪胨大豆琼脂培养基测试表二：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含50100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果Result:菌种名称菌种编号培养时间（天）： 被检培养基对照培养基比值12均值12均值金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉被检培养基与对照培养基菌落形态大小 一致 不一致结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：胰酪胨大豆琼脂培养基测试表三：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含50100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果Result:菌种名称菌种编号培养时间（天）： 被检培养基对照培养基比值12均值12均值金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉被检培养基与对照培养基菌落形态大小 一致 不一致结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：营养肉汤测试表一：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：营养肉汤测试表二：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：营养肉汤测试表三：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：胰酪胨大豆肉汤培养基测试表一：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：胰酪胨大豆肉汤培养基测试表二：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日期：胰酪胨大豆肉汤培养基测试表三：品 名批 号规 格 来 源检验日期报告日期培养温度 检验依据中国药典2010年版二部1菌液按中国药典2010年版二部各菌液制备法制成每1ml中含10100cfu活菌。2 检查法： 取本品，吸取规定接种菌量，分别加入培养基中，依法检查。3 观察结果:菌种名称菌种编号培养时间（天）12345金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉无菌性检查培养时间（天）1234567891011121314结论：本品按中国药典2010年版检查法检查，结果 合 格 不合格确认人/日期： 复核人/日