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课下限时集训(五十一)植物组织培养酶的研究与应用 (限时:25分钟)1“迷你植物”是通过植物组织培养技术,在人工控制的无菌环境下,生长在玻璃或透明塑料容器等相对密封的空间内的一系列微型植物的总称,如图甲所示;图乙是“迷你植物”组织培养过程示意图;图丙是两种植物激素对愈伤组织分化的影响示意图。回答下列问题:(1)培育“迷你植物”的原理是植物细胞具有_。为了使培育的“迷你植物”无病毒,选材时一般选取_,原因是_。(2)为了保证“迷你植物”的正常生长,容器内装有的凝胶状透明培养基中需要含有植物生长所需要的_。(3)培育“迷你植物”时,为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织,常常需要在配制好的培养基中添加_。嫩枝组织细胞接种后25天,若发现其边缘局部污染,可能的原因是_。(4)在图乙中,若愈伤组织没有形成根,但分化出了芽,其原因可能是_;若要获得更多的愈伤组织,培养基中两种植物激素的含量应该是_。2(2015聊城调研)如图表示制备固定化酵母细胞的有关操作和利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。请回答下列问题:(1)图中,x溶液为_,其作用是使_。发酵过程中用搅拌器搅拌的目的是使_。(2)在用海藻酸钠包埋酵母菌形成凝胶珠的过程中,加热溶解海藻酸钠时需注意用_加热,然后将溶化好的海藻酸钠溶液_后,再加入酵母菌充分搅拌混合均匀。3(2014江苏高考)为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。 请回答下列问题:(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为_。(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和ph的变化如图所示。细胞干重在12 d后下降的原因有_;培养液中蔗糖的作用是_、_。(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经_处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和_酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到染色体数为8n的细胞,合理的解释是_、_。(4)为了更好地获得次生代谢产物,生产中采用植物细胞的固定化技术,其原理与酵母细胞固定化类似。 下列说法正确的有_(填序号)。选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋必须在光照条件下培养培养过程中需通空气固定化后植物细胞生长会变慢4(2015乐山模拟)工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高水果的出汁率,为研究温度对果胶酶活性的影响,某同学设计了如下实验:将果胶酶与苹果泥分装于不同试管,在10 水浴中恒温处理10 min(如图甲)。将步骤处理后的果胶酶和苹果泥混合后,再次在10 水浴中恒温处理10 min(如图乙)。将步骤处理后的混合物过滤,收集滤液,测量果汁量(如图丙)。在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量,结果如表所示:温度/1020304050607080果汁量/ml813152515121110根据上述实验,请分析回答下列问题:(1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中_的水解。(2)实验结果表明,当温度为_左右时,果汁量最多,此时果胶酶的活性_。当温度再升高时,果汁量降低,说明_。(3)实验步骤的目的是_。答案1解析:植物细胞具有全能性,这是植物组织培养的理论基础。为了保证“迷你植物”的正常生长,培养基中一定要添加各种无机盐和水分。植物组织培养过程中,启动细胞分裂和愈伤组织的分化都离不开植物激素。培养嫩枝组织细胞时发生局部污染,可能是嫩枝消毒不彻底。从图丙可知,生长素和细胞分裂素的浓度配比会影响愈伤组织分化的方向,具体结合图示和题干信息回答即可。答案:(1)全能性茎尖或根尖茎尖或根尖病毒很少,甚至无病毒 (2)各种无机盐和水分(3)植物激素嫩枝消毒不彻底(4)培养基中生长素较少,细胞分裂素较多细胞分裂素中等量,生长素少量2解析:(1)在制备凝胶珠时需要用cacl2溶液,海藻酸钠遇到钙离子可迅速发生离子交换,生成凝胶珠,利用这种性质,将海藻酸钠溶液滴入含有钙离子的水溶液中可产生海藻酸钙胶球。(2)为了防止海藻酸钠焦糊,加热溶解海藻酸钠时需注意用小火(或间断)加热,然后将溶化好的海藻酸钠溶液冷却后,再加入酵母菌充分搅拌混合均匀,防止酵母菌在高温下死亡。答案:(1)cacl2溶液海藻酸钠形成凝胶珠培养液与酵母菌充分接触(2)小火(或间断)冷却(至室温)3解析:(1)外植体是植物体离体的组织、器官或细胞,诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化。(2)在培养过程中,蔗糖浓度下降,可见蔗糖被消耗,为细胞提供能源。随着蔗糖的消耗,营养供应减少,同时,细胞代谢产物、废物增加,使ph降低(偏酸),不利于细胞生长。培养基中的蔗糖还具有调节渗透压的作用。(3)秋水仙素或低温处理都可诱导细胞染色体数目加倍。纤维素酶和果胶酶处理细胞壁,可以使细胞之间易于分离(解离)。(4)愈伤组织细胞进行有氧呼吸,故需要通气,愈伤组织没有叶绿体,产生次生代谢产物的过程不需要光照。答案:(1)脱分化(2)蔗糖浓度下降,ph降低提供能源调节渗透压(3)秋水仙素(低温)果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期(4)4解析:(1)植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一是果胶,而果胶酶则是水解果胶的一类酶的总称。(2)通过表中数据可知:在40 时,产生的果汁量最多,在题中所给的温度范围内,40 时酶活性最高。当温度再升高时,出
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