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本卷共10小题，满分100分。1(9分)人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植，但小型猪器官表面抗原仍可引起免疫排斥反应。如图为科学家将小型猪器官表面抗原基因(Anti)“反向处理”(Anti基因的模板链和reAnti基因的模板链碱基序列互补)，并人工合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图。请回答下列问题：(1)若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内转录，应在人工合成的reAnti基因的首端连接_。(2)图中转基因克隆猪不含有猪抗原的实质是reAnti基因抑制了Anti基因的_(填“转录”或“翻译”)。(3)图中过程涉及的现代生物技术中，核心步骤是_。(4)从猪中取出胎儿成纤维细胞，用_处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含95%空气加_的混合气体培养箱中进行培养。(5)过程的细胞分裂方式为_。(6)图中过程涉及的现代生物技术依次为_、_和_。解析：(1)启动子和终止子在目的基因的两侧，控制着转录的开始和停止。(2)由题意可知，reAnti基因产生的mRNA能与Anti基因转录的mRNA碱基互补配对，使其不能与核糖体结合，从而抑制了Anti基因的翻译过程。(3)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。(4)用胰蛋白酶处理的目的是使组织分散成单个细胞。动物细胞培养必须有适宜的气体环境，需要O2和CO2，O2是细胞正常代谢所必需的，CO2能够维持细胞培养液的pH。(5)培养的动物细胞的分裂方式为有丝分裂。(6)由图可知，代表核移植，代表早期胚胎培养，代表胚胎移植。答案：(1)(Anti基因的)启动子(2)翻译(3)基因表达载体的构建(4)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)5%CO2(5)有丝分裂(6)动物体细胞核移植技术早期胚胎培养技术(或动物细胞培养技术)胚胎移植技术2(9分)下图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图。请据图回答：(1)图中A为_，在构建该结构时，Bt毒蛋白基因与Ti质粒结合的部位是_。(2)过程是_，利用农杆菌的优点在于_。(3)过程为_，包括_和_过程。解析：基因表达载体的构建是基因工程的核心内容。质粒上插入目的基因的位置是在TDNA片段内。农杆菌可以感染受伤的植物细胞，通过基因转化把TDNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上。植物组织培养主要包括脱分化和再分化两个过程。答案：(1)基因表达载体TDNA片段内(2)将基因表达载体转移到农杆菌细胞内农杆菌可以感染受伤的植物细胞，通过基因转化把TDNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因上(3)植物组织培养脱分化再分化3(11分)根据以下资料回答问题。资料：美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。该培育过程是：从患者的膀胱上取下普通邮票一半大小的活细胞样本，膀胱从外到内由三层构成，即肌肉、胶原质和膀胱上皮。将活细胞样本中胶原质剥下，将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养，约一周后将这些细胞放在一些海绵形状的可生物降解的由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外。医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。培育过程如下图所示。 (1)a过程属于细胞工程中的_，其培养基与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者含有_。(2)b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是_的结果，上述过程中不但需要无菌、无毒的环境，适宜的营养，还需要适宜的_及_环境。(3)新器官与老器官的“重组”_(填“是”或“不是”)基因重组，因为新器官与老器官的_相同。(4)“新膀胱”移植后，_(填“会”或“不会”)成为抗原，因为新老器官具有_蛋白质等物质。(5)除上述方法外，还可将患者的体细胞核移入去核的_中，这是利用体细胞_技术，形成相应组织、器官。解析：(1)图中a过程为动物细胞培养过程，动物细胞培养基成分与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者中含动物血清。(2)动物细胞培养时，不但需要无菌、无毒的环境，适宜的营养，还需要适宜的温度、pH及气体环境。(3)由于新器官与老器官的遗传物质相同，新器官与老器官的“重组”不是基因重组。(4)因为新老器官细胞具有相同的表面抗原等物质，“新膀胱”移植后不会成为抗原。(5)利用体细胞核移植技术将患者的体细胞核移入去核的卵母细胞中，重组细胞经培养也可形成相应组织、器官。答案：(1)动物细胞培养动物血清(2)有丝分裂(细胞分裂)温度和pH气体(3)不是遗传物质(4)不会相同的(5)卵母细胞核移植4(2014年临沂模拟)(10分)据下面植物体细胞杂交技术流程图回答相关问题：(1)若运用传统有性杂交(即用番茄、马铃薯杂交)能否得到杂种植株？为什么？_。(2)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是_，依据的原理是_，其中过程称为_，与过程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_，过程相当于_，过程涉及的分裂方式为_。(3)已知番茄、马铃薯分别为二倍体、四倍体，则“番茄马铃薯”属于_倍体植株。(4)随太空旅行的种苗中，最受关注的是柴油树试管苗。柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养进行到过程_(填字母编号)即可。解析：(1)番茄和马铃薯属于两种植物，存在生殖隔离，不能通过有性杂交产生后代。(2)过程是把ab两个原生质体融合在一起，所以称为原生质体融合。过程是在融合的原生质体外再生一层细胞壁，而细胞壁的形成与高尔基体有关。过程的结果是形成了愈伤组织，所以为脱分化。(3)“番茄马铃薯”属于异源多倍体中的异源六倍体。(4)柴油是植物细胞的代谢产物，将柴油树细胞培养进行到愈伤组织即可。答案：(1)不能。不同种的植物存在生殖隔离(2)植物组织培养细胞全能性原生质体融合高尔基体脱分化有丝分裂(3)六(4)e5(10分)在畜牧生产中，人们利用多种方法促进优良畜群繁育取得了显著成绩，请就高产奶牛的快速繁育过程回答以下问题：(1)克隆奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为_，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为_，一般选取传代_代以内的细胞(的细胞核)注入体外培养到_期的受体去核卵母细胞内，通过_使两细胞融合，构建重组胚胎，在体外培养并移入代孕母牛体内，从而获得与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。(2)试管牛：将体外培养成熟的卵母细胞与经_法获能的精子在体外受精后，移入_中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。通常将胚胎培养至_期，取_细胞做DNA分析，性别鉴定，并将雌性胚胎移入_的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体。解析：(1)动物细胞培养过程中，对获得细胞的初次培养称为原代培养，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制。通过核移植技术构建重组胚胎时，一般选取传代10代以内的细胞(的细胞核)注入体外培养到M中期的受体去核卵母细胞内，通过电刺激使两细胞融合。(2)在试管牛培育过程中，精子的获能常用化学诱导法，体外受精获得的受精卵常用发育培养液培养。只有当受精卵发育到囊胚时，才可取用滋养层细胞鉴定试管动物的性别(奶牛用雌性)。经鉴定合格的囊胚可以移入同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体。答案：(1)原代培养接触抑制10M中电刺激(2)化学诱导发育培养液囊胚滋养层同种的、生理状态相同6(10分)如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题：(1)克隆动物培养过程与图示繁殖过程相比特有的技术手段是_技术。(2)一般用_激素对供体母牛做超数排卵处理，用_激素处理受体牛以便接受胚胎。 (3)受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及_等物质。(4)如果培养转基因荷斯坦奶牛，可采用_技术将药用蛋白基因导入到_中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是_技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。(5)上述技术应用于人类所得到的婴儿通常叫_，在生育方面有什么积极意义？但在传统伦理道德观念上又有什么争论？_。解析：动物克隆的技术手段主要是核移植，而图示技术手段为体外受精(其实质是有性生殖)。为使图示技术流程顺利完成，一般用促性腺激素处理供体牛使其超数排卵，用孕激素处理受体牛使其易接受胚胎并利于胚胎着床。答案：(1)核移植(2)促性腺孕(3)动物血清(4)显微注射受精卵DNA分子杂交(5)试管婴儿解决患不孕不育症夫妇的生育问题；冲击现有的婚姻、家庭和两性关系7(10分)为提高我国稻米的含铁量，通过农杆菌介导将菜豆的铁结合蛋白基因导入了一个高产粳稻品种中。获得了高含铁量转基因水稻株系，下图为培育过程。请分析并回答问题：(1)获取重组载体用到的“手术刀”是_。过程用_法将重组载体导入愈伤组织细胞。(2)重组载体中的标记基因的作用是_。检测目的基因是否转录，需用_作探针。(3)图中过程须在_条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素，作用是_。(4)过程除了用秋水仙素或低温诱导来处理，还可以采用_技术，该技术常用的诱导剂是_。解析：将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，检测目的基因的转录，常用分子杂交的方法，基因探针就是用同位素标记的目的基因，该题的目的基因是铁结合蛋白基因。过程是植物组织培养须在无菌条件下进行，培养基中的植物激素主要是生长素和细胞分裂素，主要用于促进细胞的生长和分化，通过植物体细胞杂交技术可以培育多倍体，常用聚乙二醇作诱导剂，也可以用离心、振动、电刺激等物理手段诱导。答案：(1)限制性核酸内切酶农杆菌转化(2)检测目的基因是否导入受体细胞同位素标记的铁结合蛋白基因(3)无菌促进细胞分裂、生长、分化(4)植物体细胞杂交聚乙二醇8(10分)下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题：(1)细胞A的形成过程中常用的诱导因素有_(至少答两种)。(2)在图制备单克隆抗体的过程中，包括_和_两个过程。直接产生的A细胞可能有3种，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行_，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进而进行体内或体外培养。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，其最大的优越性是_。(4)过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是_。(5)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对中囊胚进行_，操作过程需要特别注意的问题是_。解析：在生产单克隆抗体的过程中需要运用动物细胞融合和动物细胞培养有关技术，使动物细胞融合的方法是用灭活的病毒、聚乙二醇或电激来诱导。单克隆抗体的最大优越性是特异性强，灵敏度高。若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对中囊胚进行胚胎分割和胚胎移植，操作过程需要特别注意的问题是：将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。答案：(1)灭活的病毒、聚乙二醇、电激等(2)动物细胞融合动物细胞培养克隆化培养和抗体检测(3)特异性强，灵敏度高(4)受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应(5)胚胎分割(移植)将囊胚的内细胞团进行均等分割9(11分)人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通常从血中提取。但由于艾滋病病毒等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。下图是利用牛奶乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：(1)以上过程中涉及的现代生物技术，属于细胞水平的有：_。(2)在基因工程中，我们称为目的基因，请你举出获取目的基因两种主要的方法：_。在进入之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有_。(3)图中一般经过_处理可以得到，从到的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在_进行。(4)把送入的最佳时期是_。解析：(1)图中涉及的生物技术有转基因技术、动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、胚胎分割移植技术，只有动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术属于细胞水平上的。(2)获取目的基因的方法很多，目前常用的方法主要有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。一个完整的表达载体必须含有目的基因、启动子、终止子、标记基因四个部分。(3)进行动物细胞培养时，首先要将组织分散成许多单个细胞。方法是取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶处理一段时间。M中期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟，其细胞质能支持胚胎的全程发育，所以卵母细胞的去核处理一般选择在这一时期进行。(4)牛、羊一般要培养到桑椹胚阶段或囊胚阶段进行移植。答案：(1)核移植技术、动物细胞培养(2)基因文库中提取、PCR技术扩增、人工化学合成(至少答对2项)启动子、终止子、