《（终稿）菊葛天麻颗粒质量标准研究[可编辑]》.doc

（终稿）菊葛天麻颗粒质量标准研究可编辑 第卷第期，年月中国实验方剂学杂志。 ，菊葛天麻颗粒质量标准研究孙丹丹，闰雪生，李岩（山东中医药大学，济南；山东省中医药研究院。 济南）摘要目的建立菊葛天麻颗粒的质量标准。 方法采用薄层色谱进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定方中葛根索含量。 结果确立了制剂中葛根、菊花、当归、天麻的鉴别方法，通过方法学系统考察和样品含量测定，建立了本制剂中葛根素的含量测定方法测得批样品中葛根素的质量分数为，?，其葛根素的线性范围为斗，回归方程（）。 平均回收率为，。 结论本实验建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、重复性好。 适用于本品质量的控制。 关键词菊葛天麻颗粒；薄层鉴嗣；葛根素；质量标准】【】（。 ，。 “，（），；，），?一肛（。 舶，；菊葛天麻颗粒由葛根、菊花、当归、天麻等多味中药组成，经科学提取精制而成，具有疏肝调心、疏利气血、怡身柔筋、缓急止痛等功效。 主要用于紧张性头痛。 为控制本品质量，应用薄层层析法对方中葛根、菊花、当归、天麻进行了薄层鉴别，采用高效液相色谱法对其所含葛根素含量进行了测定。 】基金项目【第一作者【通讯作者?（）山东省辩技发展计期项目（）孙丹丹，硕士研究生，从事中药制剂及中药新药研究，?日雪生，从事中药制荆及中药新药研究开发工作仪器与试药高效渡相色谱仪（美国公司，“）。 葛根素（批号）、天麻素（批号）均购自中国药品生物制品检定所。 薄层层析用硅胶（青岛海洋化工化工有限公司），所用甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 样品菊葛天麻颗粒由山东省中医药研究院中试基地提供。 定性鉴别葛根鉴别取本品，加甲醇，回流提取，放冷，过滤，蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和正丁醇提取次，每次，分取正丁醇液，蒸于，残渣加甲醇使溶解，作为供试万方数据孙丹丹，等菊葛天麻颗粒质量标准研究品溶液。 取葛素对照品适量，加甲醇制成每含。 ?的溶渡，作为对照品溶液。 取缺葛根的阴性样品，参照供试品溶液的制备方法，制得缺葛根阴性溶液。 吸取上述供试品、缺葛根阴性溶液、对照品溶液各，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶薄层板上，以氯仿甲醇一水（）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯（）下检视。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。 天麻鉴粥取本品，加无水乙醇，回流提取，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇提取次，每次，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水使溶解，加在。 ，型大孔吸附树脂柱（柱长，内径）上，用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸于。 残渣加甲醇使溶解。 作为供试品溶液。 取天麻素对照品，加甲醇制成每含的溶液，作为对照品溶液。 取缺天麻的阴性样品参照供试品溶液的制备方法制得缺天麻阴性溶液。 吸取供试品、缺天麻阴性溶液各、对照品溶液，分别点于同一以羧甲基纤维索纳为黏合剂的硅胶薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸（）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇溶液，在加热至斑点显色清晰。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。 当归鉴别取本品，加甲醇，回流提取，放冷，过滤，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液。 取当归药材，余下同供试品溶液制备方法制备对照药材溶液。 取缺当归、川穹的阴性样品，参照供试品溶液的制备方法，制得缺当归、川穹阴性溶液。 吸取供试品、阴性溶液、对照药材溶液各“，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶薄层板上，以石油醚（一）一醋酸乙酯（）为展开剂，展开、取出，晾干，置紫外光灯（）下捡视。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。 。 蘩花鉴别取菊花对照药材。 余下同鉴别项下方法制备对照药材溶液。 取缺菊花的阴性样品，参照鉴别项下方法制备，制得缺菊花阴性溶液。 吸取供试品、阴性及对照药材溶液各肛，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶薄层板上，以氯仿甲醇一甲酸（）展开，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（）下检视。 供试品色谱中，在对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。 葛根素的含量测定供试溶液的制备取本品研细，精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇，称定质量，加热圄流，放冷，再称定质量，用乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀（精密量取，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得（每中含葛根素耻）作为对照品溶液。 缺葛根阴性对照品溶液的制备取缺葛根的阴性样品，参照供试品溶液的制备方法，制得缺葛根阴性溶液。 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一醋酸（）为流动相，检测波长。 理论板数按葛根素峰计算不低于。 阴性干扰试验分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与缺葛根空白溶液各，注入液相色谱仪。 结果表明，供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上有色谱峰，而缺葛根空白色谱中在与对照品色谱相应位置上则未出现明显色谱峰，表明在该测定条件下，葛根素的测定无明显干扰。 见图。 圈葛根素对照品色谱图线性关系考察精密吸取上述对照品溶液液，“，分别注入色谱仪中，测定峰面积积分值，以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，迸行回妇处理，得回归方程（）。 结果表明进样量?万方数据第卷第期中国实验方剂学杂志?，?年月?，主圈缺葛根阴性对照色谱虬。 止。 圈供试晶溶液色请，葛根紊在，与峰面积积分值呈良好的线性关系，标准曲线为一基本通过原点的曲线。 精密度精密吸取同一供试品溶液灿，重复进样次，测定峰面积积分值。 结果表明精密度良好。 稳定性精密吸取同一供试品溶液，间隔不同时间进行测定，内连续测定次结果供试品溶液稳定，。 重复性试验取同一批样品份，按上述色谱条件测定，分别测定各份样品中葛根素的含量，结果含量平均值为?，。 表明样品的重复性良好。 加样回收率试验精密称取已知含量的样品份，分别精密加入葛根素对照品，按以上述测定方法进行测定，结果见表，平均回收率为，。 批菊葛天麻颗粒含量测定按前述方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液“，注入液相色谱仪，测定、进行计算，结果批样品葛根素的含量分别为，?。 ?裹葛根素加样回收率试验小结和讨论根据处方中药材含成分的特点参照有关文歙方法确定了葛根、天麻、当归”的薄层鉴别方法；通过实验，确定了天麻、菊花的薄层鉴别方法，方法专属性强，阴性元于扰。 利用大孔吸附树脂处理制备天麻鉴别样品，可减少背景杂质干扰使斑点清晰；利用菊花对照药材作对照。 在确定的条件下，供试品中可出现菊花对照药材多个特征斑点。 参照中国药典年版一部葛根项下及有关资料中葛根素的测定条件。 “，采用甲醇一水（骞）为流动相进行测定。 结果表明，在此条件下葛根素的保留时间较短。 经试验比较，以甲醇一醋酸（）为流动相较好，葛根素峰的保留时间适中，样品溶液色谱周中葛根素峰的分离效果良好阴性样品溶液色谱图中其他成分对测定无干扰。 供试品及对照品葛根素理论塔板数均在以上，符合药典测定要求。 为本制剂质量控制提供了