2型糖尿病及其慢性并发症患者血清糖基化终产物和同型半胱氨酸水平的变化.doc

2型糖尿病及其慢性并发症患者血清糖基化终产物和同型半胱氨酸水平的变化【摘要】目的 探讨血清糖基化终产物（AGEs）和同型半胱氨酸（HCY）与2型糖尿病及其慢性并发症的关系。方法 用流动注射分析技术和高效液相色谱电化学法分别检测患者血清AGEs和HCY水平，然后与正常对照组比较。结果 各患者组血清中AGEs水平均显著高于正常对照组。并发症各组中，血清HCY水平明显高于糖尿病组，所有患者空腹血糖水平与AGEs水平呈正相关（r=0203，P005），而与HCY水平无相关性（r=0049，P005)，HCY和AGEs水平之间呈正相关（r=0195，P005）。结论高HCY血症是糖尿病及其慢性并发症的独立危险因素，患者体内AGEs增多，启动和加速动脉粥样硬化的发生和发展。HCY和AGEs在血管病变中均起着十分重要的作用，且两者具有协同作用。 【关键词】 2型糖尿病；糖基化终产物；同型半胱氨酸；并发症研究表明1，2，患者血清同型半胱氨酸（HCY）是2型糖尿病患者血管病变的独立危险因素，它可能通过损伤内皮细胞功能，导致细胞损伤，刺激平滑细胞的增殖，增加脂质过氧化，升高氧化修饰型低密度脂蛋白的水平，形成泡沫细胞，从而加速动脉粥样硬化的进程。而糖基化终产物（AGEs）作为糖尿病患者血管病变的危险因素，得到广泛的研究，我们的研究3发现AGEs与2型糖尿病及其并发症有着非常密切的关系。由于HCY和AGEs均可造成糖尿病患者血管内皮细胞结构和功能的改变，促进动脉粥样硬化的发生，那么两者在致病过程中是否有关联，本文通过检测糖尿病及其慢性并发症患者血清AGEs及HCY水平，并对其相关性进行分析。1 对象与方法11 对象 正常对照组：选取体检正常的健康人34例，男20例，女14例，年龄（56667）岁；糖尿病组：根据1997年WHO糖尿病诊断标准，随机选择住院的2型糖尿病患者38例（不伴有其他并发症），男17例，女21例，年龄（63875）岁；糖尿病合并高血压组：30例，男19例，女11例，年龄（65181）岁；糖尿病合并冠心病组：36例，男19例，女17例，年龄（59567）岁；糖尿病合并脑梗死组：28例，男18例，女10例，年龄（64882）岁，均为2型糖尿病，符合1997年WHO糖尿病诊断标准，脑梗死按中华医学会第四次全国脑血管病学术会议修订的诊断要点诊断，并经CT或MRI检查证实。12 方法 血清AGEs水平检测采用流动注射分析技术检测4。取血清20 μl，用氯仿去蛋白去脂后离心，吸取20 μl水层注入高效液相色谱仪（日本岛津公司）进样环，设定荧光检测器激发波长370 nm，发射波长440 nm以测定血清AGEs水平，每份样本测定3次，用峰高值计算结果。标准AGEs（由AGEBSA用蛋白酶K水解而得）按不同浓度稀释，根据其峰高绘制标准曲线，拟合方程，计算出AGEs值（FAGE），1单位FAGE相当于1 μl/ml AGEBSA。13 统计学处理 所有数据均用xs表示，采用SPSS115统计软件进行单因素方差分析和相关性分析。2 结果各患者组血糖、血清中HCY、AGEs水平均显著高于正常对照组（P001）。并发症各组中，血清HCY水平明显高于糖尿病组（P001），糖尿病合并冠心病及糖尿病合并脑梗死组患者血清AGEs水平与糖尿病组相比也有显著性差异（P001）。将糖尿病及其慢性并发症各组患者的空腹血糖、HCY和AGEs水平分别合并成三个指标，然后再进行相关性分析，结果发现空腹血糖和AGEs呈正相关（r为0203，P005），而与HCY无相关性（r=0049，P005)，HCY和AGEs水平之间呈正相关（r=0195，P005）。表1 正常对照组及各患者组空腹血糖、血清HCY和AGEs水平(略)近年来，随着研究的深入，多数研究5，6支持HCY与糖尿病的微血管病变具有相关性，认为高HCY具有血管内皮细胞毒性，能够产生大量自由基和过氧化氢，损害内皮细胞功能，并加剧低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰，促进血管平滑肌的增生，同时，高HCY还可促进动脉粥样硬化斑块的形成，影响凝血纤溶系统，加速血栓形成。 AGEs是蛋白质的氨基与糖的醛基之间非酶性糖化氧化反应的终产物，它可通过不同的机制加速动脉硬化的形成过程，可以分为非受体介导型和受体依赖型。首先，糖尿病患者在高糖状态下，AGEs产生增加，对载脂蛋白B和LDL的磷脂成分进行非酶性的糖基化，扰乱其正常功能。其次，AGEs和细胞表面的AGE特异性受体（RAGE）在内皮细胞的相互作用，导致氧化压力和随后的转录因子κB、血管细胞黏附分子的产生，从而启动了炎症细胞进入内膜下的过程，因此AGEs和RAGE相互作用可以介导动脉硬化事件的启动。另外，氧化应激增强和蛋白激酶C激活也是动脉粥样斑块形成的重要病理生理环节7，8。本实验的结果显示，糖尿病及其慢性并发症各组HCY和AGEs水平均显著高于正常对照组，且并发症各组中血清HCY水平明显高于糖尿病组，说明HCY和AGEs与2型糖尿病患者的血管病变有密切关系。由于患者空腹血糖与AGEs水平呈正相关，提示患者在血糖浓度增高的情况下，体内AGEs的形成明显加快，导致体内AGEs蓄积增多，启动和加速动脉粥样硬化的发生和发展。本实验结果也证明了这一点，空腹血糖较高的糖尿病合并冠心病组及糖尿病合并脑梗死组患者血清AGEs水平明显偏高。相关分析还表明，患者血清HCY水平与空腹血糖无明显相关性，进一步证明了高HCY血症是糖尿病及其慢性并发症的独立危险因素。 HCY和AGEs在血管病变中均起着十分重要的作用，Hofmann等研究发现，HCY和AGEs均不能单独使培养的血管内皮细胞的一种内皮损伤标志蛋白——血栓调节蛋白(Thrombomodulin,TM)分泌增加，而HCY可使预先经AGEs作用后致TM分泌增加，可见两者在致血管内皮损伤中具有协同作用。另外，易斌9等的研究也表明HCY和AGEs对血管内皮细胞凋亡的影响具有协同效用。本研究对所有患者血清HCY水平和AGEs水平进行相关性分析，结果发现两者呈正相关，这种相关性在致血管病变的机制中有何意义，尚需进一步研究。【参考文献】 1 周灵丽，卢纹凯2型糖尿病患者血浆总同型半胱氨酸水平与大血管病变的关系J中国糖尿病杂志，2003；11（4）：36572 吴忠均，先德风，杨正钦，等冠心病患者血浆氧化低密度脂蛋白和同型半胱氨酸与循环内皮细胞和内皮素相关性研究J中华心血管病杂志，2003：31(1)：4683 张林，孙子林糖基化终产物与2型糖尿病及其慢性并发症的关系调查J实用预防医学，2006；13（5）：114014 孙子林，刘乃丰，王基平，等运用流动注射分析技术检测血清糖基化终产物肽水平J中华内分泌代谢杂志，2000；16（4）：25035 郭清华，陆菊明，潘长玉同型半胱氨酸与糖尿病及其微血管并发症J中国糖尿病杂志，2001；9:24586 陆宏红，李明珍,华江高同型半胱氨酸血症与2型糖尿病慢性并发症的关系J中国糖尿病杂志，2003；11:357607 Lopez LR,Hurley BL,Simpson DF,et alOxidized lowdensity lipoprotein/beta(2)glycoprotein i complexes and autoantibodies in patients with type 2 diabetes mellitusJAnn NY Acad Sci,2005;1051:971038 Libby PInflammat