Waters-1515-2414-凝胶渗透色谱(GPC)操作规程.docx

Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱（GPC）操作规程一、溶剂和样品准备1. 选择溶剂：尝试和选择对聚合物具有良好溶解性的THF或者DMF 作为溶剂；2. 溶剂处理：采用溶剂过滤系统（真空抽滤）对色谱纯溶剂进行过滤和脱气处理；3. 样品配制：选用处理后的溶剂配置待测样品溶液，样品体积4mL；样品浓度根据估算的分子量确定（Mw103104，浓度为1.52mg/mL；Mw104105，浓度为11.5mg/mL；Mw1055 x 105，浓度为0.51mg/mL；Mw5 x 105106，浓度为0.10.5mg/mL；Mw106，浓度为0.050.1mg/mL）；4. 样品溶解：提供足够时间使聚合物完全溶解（一般在室温下静止过夜）；注：可轻微摇动样品以促进溶解但不可剧烈摇动；5. 样品过滤：样品溶解后，采用一次性微孔滤膜（孔径0.22m）对样品溶液进行过滤，保存滤液待用；注意：每个样品需要准备两个样品瓶（分别用于溶解样品和放置过滤后的溶液）和两个注射器（分别用于过滤和进样）二、仪器启动1. 将经过真空抽滤的溶剂倒入溶剂存贮瓶中；2. 依次打开稳压电源计算机泵柱温箱示差折光检测器开关；3. 启动Breeze软件，输入用户名Breeze；选择1515-2414系统，确定；4. 在Breeze软件系统中点击运行样品点击流量图标设置泵流速0.2mL/min，注意：设置变化时间为2min，即以0.1mL/min缓慢增加流速，使色谱柱所受压力缓慢变化；5. 在示差折光检测器面板上，点击Temp C设置温度40 C（set/control）；再点击HomeShift 1显示Purge图标；此时示差检测器为Purge流路，冲洗示差检测器的样品池及参比池；点击平衡系统/监视基线图标调用PS-purge方法点击平衡/监视器，监控基线；Purge时间为10h；6. 10h后（此时基线已稳定），在运行样品界面点击设置泵流速1mL/min（设置变化时间8min，以0.1mL/min缓慢增加流速），平衡0.5h；7. 在示差折光检测器面板上，点击Shift 1，取消Purge（回到正常测样流路），平衡35min；再依次点击DiagOptimize LED(1617正常) EnterHome；三、样品测试1. 点击Breeze软件系统中的单进样图标输入待测样品名选择功能（宽分布进样）选择方法组PS输入进样体积（20L）及样品测试时间（45min）点击单进样，准备进样；此时窗口显示等待进样；2. 选用1mL注射器，安装色谱专用平头针头，采用过滤后样品溶液润洗进样注射器后，再抽取过滤后的样品溶液；将针口朝上排出气泡（注意针头不要有液珠，否则会污染进样口，必要时用镜头纸擦拭）；将进样阀门拨到Inject位置（即垂直状态），将进样注射器插入进样器内并插到底（不用过于用劲），进样；进样结束后迅速将进样阀门拨到Load位置； 此时窗口显示进样正在运行；注意：进样结束后，使用抽滤后的溶剂及时清洗针头；3. 到设定的运行时间后，仪器自动停止数据采集，此时窗口显示单进样结束；20min后，按步骤1和2进下一个样品；注意：实验过程中及时观察溶剂存贮瓶中溶剂量；如需补加，必须在仪器停止数据采集时（最好在泵流速为0时）添加溶剂，且砂滤头必须在液面下。三、数据处理1. 在Breeze软件系统中点击查询数据；2. 在通道界面选中要处理的宽分布未知样右键点击查看；3. 在查看窗口点击文件打开处理方法（选择最新工作曲线的方法名， THF体系选用33，DMF 体系选用37）点击处理参数图标选择编辑现有的GPC方法并保留校正，确定根据处理区间确定积分区域（其余不变）点击下一步直至完成复制曲线点击工具栏中结果图标查看样品的分子量、分子量分布指数、以及分布图，根据需要复制GPC曲线，以及调取相关数据（TEXT文本格式）；4. 退出时点击文件保存全部；5. 返回到Breeze软件系统中点击查询数据在结果界面点击更新出现刚保存的数据选中该样品点击工具栏中预览报告图标点击文件打印报告相关数据即存储为PDF文件；6. 实验结束后，请使用格式化U盘将相关数据文件及时拷出。四、关机对GPC仪器而言，不要时开时停。为此，建议第二天的测试者在上一位同学测试结束后，将溶剂过滤后加入到溶剂储存瓶中（溶剂量不少于100mL），调整变化时间将泵流量从1mL/min 降至0.1mL/min，走Purge流路。同时还注意：废溶剂接收瓶有足够的空间且两根流路出口管均插入到废溶剂瓶中。如果直接关机，关机步骤如下：1. 在样品测试结束后，必须在1.0mL/min流速下让流动相继续流0.5h；2.