生姜的提取与应用毕业论文.ppt

答辩人 叶秋萍导师 张忠山 生姜多糖的提取与研究 姜是药食兼用的常用中药 不但具有广泛的药理作用 而且具有来源广泛 价格低廉的特点 姜含有姜辣素 姜精油等多种具有生物活性的物质 使得姜具有药理作用 姜是人们生活中不可缺少的一种调味品 因其广泛的营养和医用价值 已经被应用于食品 医药 工业等较多领域 有着良好的开发前景 本文通过单因素试验 对生姜多糖的提取工艺条件进行了探讨 为生姜多糖提取的工业化生产提供了重要理论依据 并为生姜多糖的生理活性试验提供了基础原料 研究的目的与意义 生姜多糖提取的实验研究生姜多糖提取的单因素实验生姜多糖脱蛋白方法的比较生姜多糖制备的工艺流程生姜多糖实验室制备 研究内容 一 生姜多糖提取的实验研究 1 生姜多糖的提取方法生姜多糖的提取方法 有很多种 如索式提取法 水提醇沉法 乙醇回流提取法 根据前人的一个研究 水提醇沉法避免了花费时间长 溶剂用量大 效率不高等缺点 我的这个实验采用的是水提醇提法 水提醇沉法 水提醇沉法 水醇法 系指在中药水提浓缩液中 加入乙醇使达不同含醇量 某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀 固液分离后使水提液得以精制的方法 二 生姜多糖提取的单因素试验准确称取经预处理的生姜粉20 000g 对料液比 提取温度和提取时间进行单因素提取试验 定容后离心 4000r min 15min 取2mL上清液 加入6mL无水乙醇沉降 离心 4000r min 15min 去上清液 重复上述步骤2次 再加入2mL蒸馏水溶解后进行比色 计算多糖的含量 每组做3个重复 求平均值 1 提取温度对生姜多糖得率的影响在料液比和提取时间相同的前提下 采用5个不同温度 75 80 85 90 和95 对生姜多糖进行提取试验 多糖提取的最适温度不同实验温度对生姜多糖的影响如图2 1 由图2 1可知 随着温度的升高 生蒸姜多糖的得率逐渐增大 90 时生姜多糖的得率达到最高 4 23 在60 80 之间曲线的斜率逐渐增大 而后曲线斜率逐渐减小 这是由于温度的升高加速了生姜多糖分子的扩散和运动而利于生姜多糖分子克服生姜内分子间约束而溶胀于水中 当温度升至90 时生姜多糖的得率也达到了4 32 因此 选取80一95 作为生姜多糖提取试验的温度范围较为合理 2提取时间对生姜多糖得率的影响在90 的条件下 按料液比l 14 采用6个不同提取时间 60min 90min 120min 150min 180rnin和210min 对生姜多糖进行提取试验 不同提取时间对生姜多糖提取率的影响如图2 2 由图2 2可知 随着提取时间的延长 生姜多糖的得率呈现增大趋势 从多糖得率曲线的斜率可以看出 150min以前生姜多糖得率曲线的斜率逐渐增大 特别是在120 150min内的变化尤为明显 而后斜率逐渐减少 这是由于生姜多糖在水溶液中溶解和扩散达到了平衡而使多糖得率变化趋缓 因此从提取效率考虑 选用150 210min作为生姜多糖提取试验的时间范围较为合适 3 料液比对生姜多糖得率的影响在90 和180min的条件下 采用5个不同的料液比 1 8 1 10 1 12 l 14 1 16 对生姜多糖进行提取试验 不同料液比对生姜多糖提取率的影响如图2 3 由图2 3可知 随着提取试验料液比的增大 生姜多糖得率也随之增大 在料液比 1 10 一 1 14 之间生姜多糖的得率变化比较明显 而料液比大于l 14时 生姜多糖的得率变化则不明显 因此从生姜多糖提取的得率和效率来考虑 以料液比l 14左右作为生姜多糖提取试验的料液比范围较为合理 三 生姜多糖提取物的脱蛋白 不同脱蛋白方法具体操作 1 Sevag法 利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点 将提取液与Sevage试剂 氯仿 正丁醇 5 1 V V 混合 振荡 离心 变性后的蛋白质介于提取液与Sevage试剂交界处 重复上述过程5次 2 三氯乙酸法 将真空干燥后的粗多糖用少量蒸馏水溶解 在多糖水溶液中滴加3 三氯乙酸直至溶液不再继续混浊为止 在5 10 冰箱中放置过夜 离心去除沉淀即得无蛋白质的多糖溶液 3 鞣酸法 将真空干燥后的粗多糖用少量蒸馏水溶解 在溶液中加5 鞣酸 搅拌 静止过夜不再继续混浊为止 分别对其用蒸馏水 无水乙醇洗涤2次 干燥得成品 结果 对生姜多糖溶液进在200 300nm处进行UV扫描的实验结果如图3 1所示得 由图3 2可知 生姜多糖溶液中含蛋白质和核酸 因而需对提取液进行脱蛋白处理 不同脱蛋白方法对蛋白脱除率及多糖损失率的影响见图3 2 图3 2系列1为蛋白质脱除率系列2为多糖损失率 四 实验工艺流程 生姜洗净切碎 生姜粗粉 固体粉末称重 滤渣 浓缩滤液 滤液 滤渣 滤渣 粗品 烘干 沉淀 滤渣 滤液 60 烘干 按1 5加入无水乙醇 80 回流2h后过滤 加乙醇回流2h过滤 同上重复提取一次 加无水乙醇 使最后浓度为80 1 生姜多糖的制备 滤液 按照一定条件 滤液进行旋转蒸发 烘干 生姜多糖的纯化 2 生姜多糖的纯化 五 生姜多糖实验室制备全流程 5 1生姜的预处理称去老姜湿重0 730千克将原材料进行清洗然后切小块 过后放入烘箱60度烘干 磨碎过筛 计算水分含量为92 9 5 2脱脂肪 色素按1 5加入无水乙醇80 回流2h 重复2次 过滤后风干备用 5 3提取准确称取生姜多糖粉末40克按照确定的料液比 1 14 温度 90 和时间 2 5小时在圆底烧瓶中反应 5 4沉淀将提取液加入一定量的无水乙醇 使最后乙醇浓度达到80 同时加入1 氯化钾溶液 生成白色沉淀后过滤烘干称重 19克 5 5纯化将粗生姜多糖溶于乙醇中 生姜多糖的醇沉溶液如图5 1所示 按照三氯乙酸脱蛋白法方法是 称取生姜多糖19g 加水使其充分溶解 加入三氯乙酸 放置过夜 离心 除去胶状沉淀 上清液苯酚一硫酸反应呈阳性 茚三酮反应呈阴性 紫外分光光度计280nm波长处测定吸光度 A 0 028 上清液放置过夜 抽滤 得精制生姜多糖6 935g 收率36 5 5 6结果将上述糖液加乙醇沉淀 步骤同上4 烘干得样品为6 7g 计算得率为34 75 致谢 本实验是在张忠山老师的悉心指导下完成的 张老师对本实验提出了许多的修改意见 并指导实验的整个步骤 从最初的论文选题到实验工作乃至论文的写作都倾注了