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文档简介

复习 控制微生物生长的方法都有哪些 实验目的实验原理实验器材实验方法注意事项思考题 技能训练8高压蒸汽灭菌 了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围 熟练掌握高压蒸汽灭菌的操作方法 一 实验目的 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加热灭菌锅内 通过加热 使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽 待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽 然后关闭排气阀 继续加热 此时由于蒸气不能溢出 而增加了灭菌器内的压力 从而使沸点增高 得到高于100 的温度 导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的 在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时 灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要 因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压 所以 当水蒸汽中含有空气时 在同一压力下 含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度 二 实验原理 灭菌锅内留有不同分量空气时 压力与温度的关系 牛肉膏蛋白胨培养基培养皿 试管 三角瓶 移液管手提式高压蒸汽灭菌锅等 三 实验器材 1 加水 将内层锅取出 再向外层锅内加入适量的水使水面与三角搁架相平为宜 四 实验方法 2 装锅 放回内层锅 并装入待灭菌物品 3 加盖 并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内 再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓 使螺栓松紧一致 勿使漏气 4 加热 排气打开放气阀 同时接通电源 进行加热 待锅内水沸腾并有大量水蒸气自放气阀冒出时 维持3 5min以排除锅内的冷空气 待冷空气完全排尽后 关上放气阀 让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升 5 保温保压当锅内压力升到所需压力时 控制热源 维持压力至所需时间 6 出锅灭菌所需的时间到后 关闭电源 让灭菌锅内温度自然下降 当压力表降至 0 时 打开放气阀 旋松螺栓 打开盖子 取出灭菌物品 7 保养灭菌完毕取出物品后 将锅内余水倒出 以保持内壁及内胆干燥 盖好锅盖 8 无菌检查将取出的灭菌培养基放入37 温箱培养24h 经检查若无杂菌生长 即可待用 1 切勿忘记加水 同时加水量不可过少 以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故 2 压力一定要降到 0 时 才能打开排气阀 开盖取物 否则就会因锅内压力突然下降 使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口 造成棉塞沾染培养基而发生污染 甚至灼伤操作者 注意事项 1 高压蒸汽灭菌开始之前 为什么要将锅内冷空气排尽 灭菌完毕后 为什么要待压力降低为 0 时才能打开排气
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