最终灭菌注射剂的质量控制.ppt

最终灭菌注射剂质量控制 污染微生物的来源 内源性的影响因素空气净化系统水工艺过程物料外源性的影响因素人员 芽孢是关键控制点 G G 微生物无处不在气源性微生物革兰氏阳性菌较多它们可形成芽孢 难以杀灭因此 药品生产需要HVAC水源性则革兰氏阴性菌居多不会生成孢子但会形成细菌内毒素 一 什么是芽孢 当某些细菌遇到不良生存环境条件时 为保护自身 在细胞内形成一外壁厚而坚硬的体眠体 该体眠体即称芽孢 Spore 或孢子 由于其对不良环境的耐受性远高于生长态细胞 常被用于挑战灭菌工艺 以确认被灭菌物品无菌的可靠性 芽孢的特性 主要产生于Gram 细菌的两个属芽孢杆菌属Bacillus梭菌属Clostridium能抵御各种恶劣环境 可存活上百万年 因为它有厚的皮层结构仅含核酸及少量萌发必需物含水量极低休眠体 内生孢子 不可再生 每个细胞只产生一个芽孢 真菌孢子属于分生孢子 不具上述特性 细菌芽胞 孢 的形成及其特性 热对活细胞的作用 有一种可引发克雅氏综合症 Creutzfekldt Jakob 的普里昴 prion 病原体 在132 下加一小时才可完全杀灭 克雅氏综合症 俗称人体疯牛病 需氧菌中的芽孢杆菌属 Bacillus 和厌氧菌中的梭状芽孢杆菌属 Clostridium 耐热性较强它们能产生内源性孢子 芽孢 或胞间休眠体 对热 干燥及化学消毒剂的耐受性大大增强这类芽孢的干热灭菌温度一般在100 170 湿热灭菌的温度则在80 129 之间 从 欣弗 事件谈灭菌工艺 欣弗事件的发生2006年7月安徽华源克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液不良事件报告81例 涉及10个省份 欣弗到底怎么了 克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查 克林霉素磷酸酯氯化钠注射 100ml 0 6g 采用半无菌工艺生产灭菌条件100 7分钟贮存条件阴凉有效期1年有些企业的处方中含有苯甲醇稳定性考察有一批留样的有关物质为7 9 有关物质总杂不得过8 0 单杂不得过5 0 克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查 克林霉素磷酸酯注射液 2ml 0 3g 灭菌条件100 3 10分钟贮存条件遮光 密闭保存有效期2年处方中含有苯甲醇有关物质总杂不得过6 0 2004年底改为8 0 单杂不得过4 0 从上述调查看国内灭菌注射剂生产的缺陷 对灭菌的认识不正确产品研发未考虑灭菌工艺的可行性忽视工艺的可行性 盲目跟风报批注射剂用原料药的杂质控制不严忽视产品的安全性 中国医药报 2007年1月4日A6版 无菌药品常用灭菌工艺的比较 影响湿热灭菌效果的因素 待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的装载方式和装载数量湿热灭菌工艺条件湿热灭菌设备 无菌保证水平SAL 无菌保证水平 SterilityAssuranceLevel 表示物品被灭菌后的无菌状态按国际标准 湿热灭菌法的无菌保证值不得低于10 6 即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一 灭菌工艺验证的必要性 灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验 而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺 严格的GMP管理和良好的无菌保证体系灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺经过验证后 方可正式用于生产 国内企业灭菌工艺验证常见缺陷 无包装规格无装载方式未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证采用留点温度计监测温度无温度探头校准记录验证的灭菌工艺与实际工艺不一致未验证最差灭菌条件设定的验证合格标准达不到无菌保证水平 SAL 10 6生物指示剂使用不规范 灭菌工艺检查要点 生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数量研究和监控待灭菌产品的包装形式 装载方式和装载数量灭菌工艺条件灭菌设备关键控制参数的控制和记录仪表的校准设备维护和维修灭菌的记录灭菌工艺的验证选用的生物指示剂热分布试验 找出最冷点位置无菌检验样品的取样 无菌检查 无菌检查的局限性 无菌的定义理论上 无菌 没有任何活的微生物实际上 我们无法证明产品中没有活微生物存在无法对整批产品进行100 检验无菌检验的结果只是一个基于 可能性 的判断无菌检验用培养基有其局限性只进行细菌和真菌的检验对实验结果的判定是基于 是否在培养基中生长 培养条件 如温度和时间 是有限的我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态 美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果 试验目的 不合格的可能性 试验批量 60 000支试验方法 按美国药典无菌测试方法 上述无菌测试结果的启示 含有少量微生物污染产品的批次也有可能 通过 无菌检验一批产品的染菌率越低 根据无菌检验的结果来判定整批产品的无菌 其风险就越大 如何用无菌检验来证明整批产品无菌 要求有一个取样计划来涵盖整个批号有足够的取样量和检验量选择适用的培养基采用经验证的无菌检验方法良好的环境监控 检验标准制定依据 2003验证指南QC 751E注射剂药液过滤前含菌量测定M 00061A注射剂灭菌前药液污染水平及耐热性检查 大容量注射剂举例 灭菌前药液的含微生物的计算过程 根据 2003版药品上产验证指南 lgP lgN F0 D121 P 灭菌后产品内微生物存活概率N 灭菌前药液的含耐热孢子的量D121 微生物耐热参数 系指一定温度下将微生物杀灭90 或使之下降一个对数单位所需的时间 分 lgN lgP F0 D121 lgP FT DT N值与FT成正比 与DT成反比 该产品 葡萄糖 采用115 灭菌32min 产品灭菌的F0 8 为更严格的控制灭菌前产品的生物负载 F0取8计算 大容量注射剂举例 DT与生产环境 以及过滤截留得到的微生物有关 需要确认污染微生物的耐热性 在未检测到耐热微生物时 DT通常按 1计算 为更严格的控制灭菌前产品的生物负载 取DT为1计算 lgN lg10 6 8 1N 100CFU 袋 产品规格为250ml N 40CFU 100ml 检测重点 污染水平微生物耐热性 取样 灭菌前药液直接取样 每个样品取样大容量注射剂 两个最小包装 最少各100mL 小容量注射剂两份 最少各100mL 灭菌后取样大容量注射剂各约50mL 检测方法 污染水平检查先用灭菌的含5 吐温80的pH7 0氯化钠蛋白胨润湿0 45 m滤膜 然后过滤100mL灭菌前药液 有抑菌性的药液需用已验证量的缓冲液冲洗滤膜 以消除药液的抑菌性 再以无菌方式将滤膜菌面朝上贴于准备好的胰酪胨大豆琼脂培养基 TSA 上 同时做1个阴性对照 胰酪胨大豆琼脂培养基在30