动物细胞工程.doc

（）动物细胞工程1（04年全国卷5）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 *B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体2（06年全国卷3）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体 B.培养中的人B细胞能够产生无限地增殖C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 *D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞3（07年天津卷5）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞*D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断出病毒感染者4（08年全国卷5）下列关于细胞工程的叙述错误的是A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体*D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同5（09年江苏卷8）下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是A.卵裂中胚胎细胞数目和有机物总量在增加B.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割C.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点*D.胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取6.（10年浙江卷4）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 *D恶性细胞系的细胞可进行传代培养8.（10年山东卷35）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_；从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用。（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持_。（3）图中过程A称为_，它在胚胎工程中的意义在于_。（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_；获得转基因母牛后，如果_即说明目的基因已经表达。参考答案：（1）使卵母细胞成熟（或：使卵母细胞获得受精能力）； 获能（2）CO2 ； 培养液（基）的pH（3）胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率。（4）显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素（或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素）9（10年四川卷5）某实验室做了下图所示的实验研究。下列相关叙述，正确的是 诱导基因 甲小鼠的纤维母细胞诱导干细胞肝细胞、神经细胞、上皮细胞等 X细胞 Z细胞单抗 将H1N1病毒外壳蛋白注入乙小鼠 Y细胞 A与纤维母细胞相比，过程形成的诱导干细胞的全能性较低B过程是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程C每个Y细胞只产生一种抗体，故过程不需要选择性培养基进行筛选*D过程产生的单抗，不需要细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外10（10年江苏卷16）下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述，错误的是A对受体母羊进行同期发情处理*B人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割C利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎D一次给受体母羊植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例11（10年重庆卷30）（3）克隆羊多利是将多塞特母羊的乳腺细胞核注入苏格兰羊的去核卵细胞中，将此融合卵细胞培养后植入母羊体内发育而成。 比较三种细胞内的X染色体数：多塞特羊交配后产生的正常受精卵_多利羊的体细胞_苏格兰羊的次级卵母细胞（填“”、“”、“”、“”或“”）已知哺乳动物的端粒（由DNA组成的染色体末端结构）在个体发育开始后，随细胞分裂不断缩短，因此多利的端粒长度应比普通同龄绵羊的_参考答案：（3） 短12（10年海南卷26）请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、_、_以及在母体中发育和产出等过程。（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_，另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期可在显微镜下可观察到次级卵母细胞和_。（3）通常奶牛每次排出一枚卵细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵细胞，常使用的激素是_。（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是_、基因表达载体的构建、_和 _，若要使获得的转基因牛分泌的乳汁含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、_、_ 、_和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是_ （显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是_（受精卵、乳腺细胞）参考答案：（1）早期胚胎培养 胚胎移植 （2）获能 第一极体（3）促性腺激素 （4）获取目的基因 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与表达 人干扰素基因（或目的基因） 终止子 标记基因 显微注射法 受精卵13（08年宁夏卷38）回答下列有关动物细胞工培养的问题：（1） 在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。（2） 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白（糖蛋白）的量 。（3） 现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。（4） 检查某种毒物是否能改变细胞染色体数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。（5） 在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。（6） 给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。参考答案：（1） 相互接触 接触抑制 单层（或一层） 胰蛋白酶 （2） 衰老甚至死亡 不死亡 降低 减少 （3） 由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色） （4） 中 （5）冷冻（或超低温、液氮） 酶 新陈代谢 （6）抗原14（07年宁夏卷）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出 注入B品种牛的 卵细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为 ，将该胚胎移入代孕母牛的 中，通过培育可达到目的。（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵细胞的数量 ，为解决这一问题，可以用 激素处理B品种牛。（3）克隆牛的产生说明具 有全能性。克隆牛的性状主要表现 品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自 个亲本，细胞质来自 性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成 （相同、不同）。参考答案：（1）细胞核 去核 重组胚胎 子宫 （2）不足 促性腺 （3）动物体细胞核 A 两 雌 不同15（09年四川卷30）.将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为M细胞），再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后测定小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚 胎后一般用酶将其分散成单个细胞。（2）根据实验结果可以判定M细胞已具有 细胞的功能。说明判定的理由：（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下