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文档简介
1. 1. 简述蛋白质表达调控的5个层次。 5个层次:基因结构的激活、起始转录、加工转录物、运输到细胞质和mRNA的翻译。基因有两种结构,基因表达时都处于激活态;处于激活态的基因,其起始转录受起始阶段控制,它是RNA聚合酶与启动子相互作用决定,这这是一个主要的调节点,很有可能是最基本的调节水平;初级的转录物经常被修饰,形成5端的帽子和3端的polyA。转录物上的内含子必需从断断续续的基因中切除。成熟RNA从细胞核被运送到细胞质;细胞质中mRNA的翻译也能被特异的调节。1 出芽和融合(budding and fusion)答:出芽是指在膜的一块区域上进行包被蛋白的组装,并最终使得它以独立的囊泡形式释放出去。融合指包被蛋白被除去,暴露出膜表面并与目标膜融合。2 分类信号(sorting signal)答:分类信号是蛋白质的一个超二级结构(短氨基酸序列或是其共价修饰),引导其载入到达特定的目的地的囊泡。3 逆向转运(retrograde transport)答:逆向转运是在细胞内膜系统中蛋白质向相反方向运输的过程,如从高尔基体到内质网系统。4 受体介导的胞吞作用(receptor-mediated endocytosis)答:在细胞表面有一些受体,在结合一个配基后它们将变得易受到细胞的吞噬作用而将结合的配基带入细胞内。囊泡移动到早期胞饮体并与其融合,这个过程叫做受体介导的胞吞作用。5 转细胞作用(transcytosis)答:一个受体和配基的结合体在一个细胞表面被吸收,被输送到胞饮体,然后被释放为了可以传输到更远的细胞表面。这称为转细胞作用。1 简述顺向转运的囊泡模型和潴泡成熟理论模型。答:顺向转运的囊泡模型认为高尔基潴泡是一种固定的结构,通过囊泡的不断融合和出芽实现蛋白质的转移和运输。潴泡成熟理论认为高尔基潴泡不是一种固定的结构,而是在不断地从顺式面向反式面移动的,同时其蛋白组分发生改变而趋向与反式面化。2 简述SNARE假说答:当一个囊泡在一个特定的膜上产生后,它也将向一个特定的目标移去。SNARE假说认为目标识别的机制来源于囊泡携带的s-SNARE膜蛋白与目标膜上的t-SNARE膜蛋白的相互作用。3 简述在受体介导的胞吞作用中,蛋白质的几种代谢途径。答:胞饮体在进入细胞内与溶酶体结合,其转载的受体与配基的蛋白质复合物有四种可能的代谢途径: 受体载入从溶酶体分离的囊泡,循环回到质膜表面的包被小窝,而配基留在溶酶体中被降解。 受体和配基都循环回质膜表面,这个过程转运的是配基上结合的一些小分子或是传递信号。 受体和配基都被溶酶体降解。 受体和配基从溶酶体中重新载入囊泡,被传递到细胞的其它地方。一、 论述题:简述蛋白质分类、转运的过程。答:将驻留在细胞内膜系统中的或是将分泌出细胞的蛋白质在粗糙内质网上合成,它们通过共翻译转移从核糖体上直接进入ER。蛋白质的定向是由蛋白质本身的超二级结构所决定的,表现为一段短氨基酸序列或是在内质网(或/和高尔基体)中对其所作的共价修饰(脂类和糖类组分的添加)。这些特定的信号使它们保留在某一系统中或转移向其他系统。蛋白质的转运通过囊泡进行的。囊泡是有蛋白包被的膜封闭结构,从特定的膜表面出发,移向不同的膜表面并与其融合。囊泡也有特异性,对应于不同转运途径中的囊泡类型有不同种类的胞被蛋白。蛋白上的特定的信号会直接或是间接的与囊泡的胞被作用,以决定是驻留还是载入囊泡,以即将载入哪一种囊泡,这样便实现了蛋白质的分类。囊泡包被上的v-SNARE与目标膜上的t-SNARE特异性的结合,形成了的囊泡转运的定向识别机制。这样通过特定的囊泡,便将特定的蛋白质转运向了特定的目的地。1. 什么是信号传导?信号传导的方式有哪些?答:信号传导涉及到细胞外配体与在膜两侧都有结构域的跨膜蛋白受体的相互作用,与配体的结合使受体从失活状态转换成激活状态,这种相互作用的基本原理是配体与细胞外侧结构域的结合影响细胞质侧结构域的活性。这个过程被称作信号传导,其结果使信号通过细胞膜被传递进去。信号传导提供了一个放大初始信号的途经。两种主要的信号传导方式如下:(1)受体的蛋白质结构域有蛋白激酶的活性,当配体结合到受体的胞外结构域时,这种激酶的活性被激活,使其胞内结构域磷酸化。这种自磷酸化,使得受体能结合并激活目标蛋白,而目标蛋白又继续作用于细胞内新的底物。(2)受体可以同内膜上结合的G蛋白相互作用。当受体与配体结合后,对G蛋白发生作用,G蛋白分解形成一个带有GTP的单体和其它两个亚基形成的一个二聚体,然后单聚体或二聚体作用于一个通常也是膜联的目标蛋白。接下来这个目标蛋白与胞质内的目标物产生反应。这一反应链常激发第二信使的产生。 2. 离子跨膜转运有哪些方式?答:离子跨膜转运有两种方式:(1)转运蛋白在膜的一侧跟溶质结合,然后经过构象的变化将溶质运输到另一侧,在另一侧释放,完成了溶质的跨膜转运。有单向转运蛋白,同向转运蛋白,逆向转运蛋白等类型。转运蛋白可能被用于被动运输或消耗能源进行主动运输。(2)离子通道在膜上形成水溶性的穿孔。它的活性通过对通道的“开”“闭”的调节来控制,通道开放时,离子能在电化学梯度的驱动下被动扩散,离子通道只能允许被动运输,离子通道关闭时处于休息状态,而控制通道活性的“闸门”通常是在对特殊的信号产生反应时处于短暂的开放状态。有配体门控通道,电压门控通道,第二信号门控通道等类型。3 转运蛋白和通道的结构有什么特点?答:它们都是跨膜蛋白,有多个跨膜的结构域,每个结构域都含有一串疏水性残基使得它们能存在于磷酯双分子层之间,然而在这些疏水区之间,有一个高度选择性、并充满水的通道,它能允许离子通过膜。其跨膜区域的结构,含有一些极性氨基酸序列,以兼性螺旋组织在一起,螺旋的疏水侧面对磷酯双分子层,而极性侧则相互连接形成通道。4G蛋白在信号传导的过程种是如何起作用的? 答: G蛋白是一个三聚体,在三聚体状态下,G蛋白是没有活性的。它的功能依赖于它解离为一个单体和一个二聚体的能力,这种解离是靠与之相作用的受体的激活来触发的。配体结合到它的特定位点后,引起受体的构象发生变化,从而诱导亚基发生构象变化,导致GDP的释放,因为细胞质中GTP的浓度远高于GDP的浓度,空的核甘酸结合位点被GTP占据,与GTP的结合导致了亚基从受体和复合体上解离出来。受体和G蛋白的相互作用是酶催化的,一个G蛋白从激活的受体上解离之后,受体又跟另一个无活性的三聚体结合,新的循环重新开始。这样一个配体受体复合体能在短的时间内激活很多G蛋白分子,从而将最初的信号放大。亚基与二聚体都可以与效应物发生作用,从而将信号向胞内传导。细胞外的信号是如何传导通过膜?答:理解信号是如何传导通过膜的一个关键问题是配体跟细胞外结构域的结合是如何导致细胞质内的催化结构域被激活的。普遍的机制是配体的结合导致受体的构象发生变化从而影响整个受体的组织结构。侧向运动在信息从膜的一侧传到另一侧的过程中起着重要的作用。结合配体导致第一类受体N端结构域发生构象变化,从而导致胞外结构域的二聚化。二聚可以采取几种形式。一个配体单独与一个单体或同时与两个单体结合从而诱导它们发生二聚化,或者一个二价配体与两个单体结合导致其二聚,或者配体与二聚受体结合(此二聚受体的两个亚基被细胞外二硫键固定)导致其分子内的构象变化。1. cAMP信号通路细胞外信号与相应受体结合,导致细胞内第二信使Camp的水平变化而引起细胞反应的信号通路。这一信号通路的首要效应酶是腺苷酸环化酶,通过腺苷酸环化酶调节细胞内cAMP的水平。cAMP可被磷酸二脂酶限制性的降解清除。这是真核细胞应答激素反应的主要机制。2. 说出G蛋白耦联受体所介导的细胞信号通路cAMP信号通路和磷脂酰肌醇信号通路3. 列举细胞表面与酶耦联的受体受体酪氨酸激酶受体丝氨酸/苏氨酸激酶受体酪氨酸磷酸酯酶4. 简单介绍Ras蛋白Ras蛋白是RTK介导的信号通路中的关键部分,是一种GTP结合蛋白,具有GTP酶活性。结合GTP为活化状态,结合GDP为失活状态。因此Ras具有开关活性。5. JAK-STAT和TGF通路与Ras-MAPK通路之间的重要区别是什么?JAK-STAT和TGF通路的一个重要特征是它们与Ras-MAPK通路相比,在组织上的简单性。这些通路的简单性依赖于组成膜的组分的变异首先是JAK-STATs的不同组合,其次是不同的Smad蛋白。6. TGF如何通过smads进行信号传导?TGF受体的活化引起Smad蛋白的磷酸化,该蛋白被转入细胞核以激活转录。2.试述有丝分裂期细胞的重组中相关事件:Answer: 染色质浓缩形成可以识别的染色体;核内膜的溶解和核膜的破坏。薄膜溶解成独立的薄层亚单位,并且核外膜、内质网膜和高尔基体破坏成小的膜状囊泡。(细胞核的溶解是动物细胞的典型特征,但并不是总发生,例如在酵母细胞中,S.cervisiae和S.pombe,它们的有丝分裂涉及到核的分裂。)微管结构的溶解和重新构建形成纺锤体。微管溶解成管状双分子,它们重新组装成微管,这从有丝分裂微管组成中心开始持续。肌动蛋白丝状结构重组代替了有收缩性的环形成的网状结构,这种环在胞质分裂时会使子细胞受到挤压。3.试述细胞凋亡的简要过程。Answer: 凋亡可以被多种刺激触发。一个普遍的途径包括通过一个激活的表面受体寡聚来
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