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微生物遗传与育种复习资料一、填空题1. 在DNA链上的碱基序列中一个碱基被另一个碱基代替的现象称为 置换。这其中嘌呤与嘌呤之间或嘧啶与嘧啶之间发生互换称为 转换 。一个嘌呤替换一个嘧啶或一个嘧啶替换一个嘌呤称为 颠换。 2. 基因突变可以分为 碱基置换 、 移码突变 和 易位突变 。3. 指的是通过病毒将一个宿主的DNA转移到另一个宿主的细胞中而引起的基因重组现象。 指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞,并使其获得新的表型的过程。在原核生物中有些DNA片段能够转移到其他位置从而导致微生物的基因突变,这种片段称 。4. 育种过程中,为了抑制DNA基因突变的修复,所以菌体中加入 和 可以抑制修复。5. 通常用 、 、 、 等抗生素来标记质粒载体。 6. 微生物菌种保藏是要为菌体创造 、 、 和 条件。7. 用作微生物化学诱变剂的5-溴尿嘧啶为_的结构类似物;具有超级化学诱变剂之称的是 。8. 根据突变的表型效应,突变型的种类有 、 、 和 等。9. 富集培养是创造有利于目标菌种的生长,一般采用的方法有 、 和 等。10. 在微生物基因工程中,目前应用最多的载体是_和_。11. 营养缺陷型菌株诱变育种中,为了便于营养缺陷型菌株的检出,尽量淘汰野生型细胞,常用的方法有_、_和_。12. 杂交育种过程中常用的遗传标记包括 、 、 等。13. 原生质体融合育种中,用来除去细菌和放线菌细胞壁常用的酶是 ;除去真菌类细胞壁的酶是 ;原生质体融合最常用到的化学融合剂是 。14. 原生质体再生育种过程中培养皿中的冷凝水需要去除,其原因是 。二、选择题1在培养基中加入 可以抑制细胞壁的生物合成,获得原生质体。A. 溶菌酶 B. 青霉素 C.蜗牛消化酶 D. 纤维素酶2由牛肉膏、蛋白胨和氯化钠组成的培养基,属于 。A. 有限培养基 B.补充培养基 C.完全培养基 D. 基本培养基3. 紫外线对微生物有很好的诱发突变作用,其中最有效波长为 。A. 200nm B.254nm C.274nm D. 300nm4分支途径中末端产物单独存在时仍有微弱的抑制作用,当几个末端产物共同存在时,其抑制作用作用大于几个单独存在时的和,这种反馈抑制属 。A. 协同反馈抑制 B. 累积反馈抑制 C.顺序反馈抑制 D. 合作反馈抑制5以下哪个方法不是放线菌杂交常用的方法 。A. 混合培养法 B. 浓度梯度法 C.玻璃纸法 D. 平板杂交法6在营养缺陷型菌株的鉴定中,将所缺乏的因子分成四大类(氨基酸类 包含所有营养因子的酵母浸出液 维生素混合物 核酸碱基混合液体),采用生长圈法来测定。以下的图中,属于维生素缺陷型的是 。7菌种保藏过程中,采用哪个温度 效果最好?A. 冰箱冷藏(4) B. 冰箱冷冻(-20) C.干冰(-70) D. 液氮(-195)8. 具有掺入诱变剂之称的是 。A. 烷化剂 B. 碱基类似物 C.脱氨酸剂 D. 吖啶类9以下物理诱变剂中,属于非电离辐射的是 。A. 紫外线;B. X射线;C. 射线;D. 快中子。10已知DNA的碱基序列为CATCAT,如突变为CACCAT,属于的突变类型是 。A. 缺失;B. 插入;C. 颠换;D. 转换。11具有掺入诱变剂之称的是 。A. 烷化剂;B. 碱基类似物;C. 吖啶类;D. 脱氨酸剂。12一株大肠杆菌(E.coli)的突变株,不同于野生型菌株,它不能合成精氨酸,这一突变株称为 。A. 营养缺陷型;B. 温度依赖型;C. 原养型;D. 抗性突变型。13. 原生质体融合育种时,为了提高原生质体的再生能力,以下不能作用作稳定剂来配制高渗溶液的是 。A. NaCl;B. KCl;C. 蛋白胨;D. 蔗糖。三、名词解释1. 原生质体:脱去细胞壁的细胞。2. 原生质体再生育种:微生物制备原生质体后直接再生,从再生的菌落中分离筛选变异菌株,最终得到优良性状提高的正变菌株。3. 组成型突变株:指操纵基因或调节基因突变引起酶合成诱导机制失灵,菌株不经诱导也能合成酶,或不受终产物阻遏的调节突变型。4. 营养缺陷型:指只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长的菌株。5. 分解代谢阻遏:有两种碳源(或氮源)分解底物存在时,细胞利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的低物的有关分解酶合成的现象。6. 补充培养基:凡只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养。7. 基本培养基:仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基。8. 移码突变:DNA分子中的每一个碱基都是三联密码中的一个成员,而且遗传信息被DNA链上排列成特定序列的密码子所控制,在这种碱基序列中有一个或几个碱基增加或减少而产生的变异称移码突变。9. 光修复:细菌经波长220-300nm的紫外线照射后,接着经波长310-460nm的可见光照射,与不经可见光照射的对照相比,其存活率大幅度提高,突变率相应地下降,此现象称光修复。四、简答题1. 什么是表型延迟?为什么诱变后要进行后培养(中间培养)再分离?表型延迟:指微生物通过自发突变或人工诱变而产生新的基因型个体所表现出来的遗传特性不能在当代出现,其表型的出现必须经过两代以上的繁殖复制。因为基因突变频率较低,诱变后所含需要的突变细胞较少,若不进行扩大培养而直接分离,可能得不到想要的细胞。所以, 一般都是先用合适的培养液进行培养,使各种类型的细胞增殖,然后再进行分离。2. 反馈阻遏和反馈抑制的区别。反馈阻遏是对酶合成的阻遏,是基因转录水平上的代谢调节,效果不及反馈抑制那样迅速。反馈抑制是通过调节变构酶的活力得以实现,因为不涉及蛋白质的合成过程,调节的效果比较直接而快速。3. 微生物原生质体育种主要包括哪四种手段?微生物原生质体再生育种;微生物原生质体诱变育种;微生物原生质体转化育种;微生物原生质体融合育种4. 简述基因工程的原理和基本步骤。基因工程是用人为的方法将所需的某一供体生物的遗传物质DNA分子提取出来,在离体条件下进行“切割”,获得代表某一性状的目的基因,把该目的基因与作为载体的DNA分子连接起来,然后导入某一受体细胞中,让外来的目的基因在受体细胞中进行正常的复制和表达,从而获得目的产物。目的基因的获得;载体的选择与准备;目的基因与载体连接成重组DNA;重组体的筛选。5. 常用的工业微生物菌种保藏技术有哪些?各有何优点?6. 试述筛选营养缺陷型菌株的步骤以及它们的微生物育种中的应用。营养缺陷型的诱变;淘汰野生型菌株;营养缺陷型的检出;营养缺陷型的鉴定。应用:工业育种:协助解除代谢反馈调控机制,从而达到大量积累产物的目的。 遗传标记:菌种杂交、重组育种时作为遗传标记。7. 工业微生物菌株应具备的基本要求有哪些(写出6点以上即可)? 在遗传上必须是稳定的;易于产生许多营养细胞、孢子或其它繁殖体;必须是纯种,不应带有其他杂菌及噬菌体;种子的生长必须旺盛、迅速;产生所需要的产物时间短;比较容易分离提纯;有自身保护机制,抵抗杂菌污染能力强;能保持较长的良好经济性能。五、问答题1. 微生物诱变中,初筛和复筛的要求有什么不同?初筛是从大量分离到的微生物中将具有合成目的产物的微生物筛选出来的过程。复筛是对初筛选出的菌株再进一步进行重复鉴定。所以初筛在于多,复筛则在于精。2. 紫外线对枯草芽孢杆菌诱变育种的基本原理、步骤和注意事项? 基本原理:紫外线是一种最常用的物理诱变因素,它的主要作用是使DNA双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶间形成二聚体,阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对,从而引起突变。步骤:菌悬液的制备;平板制作;紫外线处理;稀释;涂平板;培养;计数;观察诱变效应注意事项:紫外线诱变时,一定要在红光下进行,在暗环境下培养,避免光修复。 紫外线诱变时,要打开皿盖,紫外线穿透力差。3. 列举5种以上常用的工业微生物菌种保藏方法,并简要说明各自的优缺点?斜面保藏方法;液体石蜡油保藏法;滤纸条保藏法;沙土管保藏法;液氮超
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