不同食品载体对乳酸菌总数影响的原因.doc

不同食品载体对乳酸菌总数影响的原因目 录题目摘要及关键词1前言11.1 乳酸菌11. 2 乳酸菌的作用11. 3 培养基21.4 菌落总数测定32 .实验材料32.1 实验仪器32.2实验材料42.2.1 实验样品42.2.2 实验药品42.2.3 实验试剂的配制43 实验步骤53.1样品初步菌种检测53.1.1 革兰氏染色反映53.1.2 H2O2实验（过氧化氢酶检测）63.1.3 初步梯度实验63.2酸奶的菌落总数测定73.2.1 样品的稀释73.2.2 菌落计数83.2.3 镜检形态83.3 五种不同食物的平行实验84 实验结果分析84.1 平皿计数结果84.2 菌落总数计数结果105 结论12参考文献13致谢14 不同食品载体对乳酸菌总数影响的原因不同食品载体对乳酸菌总数影响的原因 摘 要：乳酸菌是一类能利用可发酵糖类产生大量乳酸的细菌的统称。目前已被国内外生物学家所证实，乳酸菌与健康长寿有着非常密切的直接关系。针对不同食品载体对乳酸菌数量的影响进行菌株的培养条件优化及计数。通过在不同培养基上对不同食品进行乳酸菌的培养，以乳酸菌在不同固体培养基中的菌落数及溶钙圈大小为检测指标，以确定乳酸菌最优固体培养基，在此基础上,对其固体形式中的生长情况进行研究比较,发现MRS（DeMan Rogosa-Sharpe.这三个人是开发MRS培养基的人，取其三人的英文名中的字母，组成MRS，其为一种乳酸菌的基础培养基）固体培养更适于乳酸菌生长。通过对乳酸菌生长状况、pH范围的分析,了解乳酸菌的生长特性。从而研究找出含乳酸菌数量最多的食品，以此造福于人类。关 键 词：乳酸菌；食品载体；菌落总数；计数The influence of different food carrier on the total number of lactic acid bacteriaAbstract：Lactic acid bacteria is a kind of can use fermentable sugars to produce large amounts of lactic acid bacteria. Has been confirmed by biologists at home and abroad at present, lactic acid bacteria directly with health and longevity has a very close relationship. According to different food carriers impact on the number of lactic acid bacteria strains of culture conditions optimization and counting. Through different foods with lactic acid bacteria on different culture medium, by lactic acid bacteria in the different solid medium of colony count and soluble calcium circle size as testing indexes, to determine the optimal solid culture medium of lactic acid bacteria, on this basis, the study of the form of the solid growth situation, found that MRS (DeMan Rogosa - Sharpe. These three people is to develop MRS culture medium, take the third persons English name in the letter, MRS, as a kind of basic culture medium of lactic acid bacteria) solid culture is more suitable for the growth of lactic acid bacteria. Through the analysis of the growth condition of lactic acid bacteria, pH range, understand the growth characteristics of lactic acid bacteria. To research to find out with the largest number of lactic acid bacteria food, to the benefit of mankind. Keywords: Lactic acid bacteria; Food carrier; The total number of colonies; count I1前 言近年来有关乳酸菌对人体健康的影响作用的研究日益受到重视，已普遍适用于各类食品中，如乳酸链球菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、保加利亚乳杆菌等益生菌的研究已有较多的报告。1.1乳酸菌乳酸细菌(Lactobacter)是一类能利用可发酵糖类产生大量乳酸的细菌的统称1。乳酸菌的细胞形态为杆状或球状，接触酶阴性，革兰氏染色阳性，耐氧或微需氧，厌氧或兼性厌氧，有复杂的营养需要，代谢方式为同型乳酸发酵或异型乳酸发酵，都能发酵葡萄糖产生乳酸，适宜在微氧或无氧条件下生长，一般在固体培养基平板上有氧条件也能生长2-4。观察乳酸菌的个体形态常采用革兰氏染色法和甲苯胺兰染色法。后者是近年来的改进方法，特别适合于脱脂乳试管培养物的观察。由于菌体呈蓝色，背景牛奶基质呈无色，可以避免牛奶成分对染色的干扰。但缺点是冰醋酸脱色稍有过度，菌体的蓝色变浅而影响观察。人们利用它产生乳酸的特点，发酵生产某些食品使其产生令人满意的芳香味或使产品质地发生改变，以提高产品的适口性或延长保藏期。在普通酸奶与干酪、保健型酸奶与微生态制剂、乳酒与酸奶油等生产中，乳酸菌均起主要作用5。例如，利用德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌制作普通酸奶，利用嗜酸乳杆菌和乳酸乳球菌乳脂亚种制作保健型酸奶，利用嗜酸乳杆菌6生产乳酸菌素片，甚至利用乳酸菌发酵生产乳制品（如酸乳、干酪、开菲尔等）和植物食品（如泡菜、酸菜等）。目前我国已成功利用嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种与长双歧杆菌4种菌组合，或将嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌与双歧杆菌4种菌组合，混合发酵生产益生菌酸奶。而制作干酪的常用菌种为嗜热链球菌、乳酸乳球菌、乳酸乳球菌乳脂亚种和干酪乳杆菌7。因此，从自然界中有目的地分离纯化和鉴定某些乳酸菌，对于开发新产品、提高发酵食品质量具有实际应用价值。1.2乳酸菌的作用乳酸菌对胃肠道的益处： 例如：有些人一喝牛奶就会拉肚子，正是因为体内缺乏一种专门代谢牛奶中乳糖的酵素所致；但是，经过发酵的牛奶，其中的乳糖就已经被乳酸菌分解了，而不会引起腹泻，更利于肠胃对牛奶中钙质的吸收，所以不能喝牛奶的人，可以多吃优格或发酵乳。 同时，在我们的胃肠道中，原本也有许多细菌，有些有益、有些有害；乳酸菌则能够使其中的有益菌增加，并且抑制有害菌的生长，以减少毒素产生，进而强化胃肠道机能、预防慢性疾病。此外，乳酸菌还具有促进胃肠蠕动的功能，因此有利于改善中、老年人习惯性便秘的现象。再加上乳酸菌在肠内发酵后，会产生B群维生素，更是有益健康。乳酸菌能增进肠内菌群品质的作用机理可能是(1)生产有机酸、降低肠道的pH(2)和有害菌竞争养分(3)附着于肠黏膜上皮，减少有害菌增殖场所(4)产生抗菌物质等。 乳酸菌要发挥整肠效果，想当然的必须要能定着于肠道。目前有许多发酵乳或整肠用乳酸菌制剂的使用是由人肠道中分离出来的乳酸菌，以求提升其在人体内的定着性。许多临床实验也证实这类乳酸菌确实有不错的整肠效果，也会降低肠内不宜的菌群数量。 1.3培养基由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的牛肉膏蛋白胨培养基难以满足其生长要求。要提高检出率，关键是选用特定良好的选择性培养基这样才能将样品中所有活的乳酸菌检测出来。目前国内仍在沿用MRS培养基活菌计数乳酸菌，而国外自20世纪80年代即利用先进的改良chalmers培养基，用于发酵乳和乳酸菌饮料中乳酸菌计数。据有关文献报道，改良chalmers培养基的乳酸菌检出率（或选择率）达100%，可以选择性地快速、准确检测乳酸菌的数量，多数G+菌、酵母菌和霉菌形成的菌落与乳酸菌典型菌落容易辨别。而MRS培养基检测率达82.6%。这是因为MRS培养基较适合于乳酸杆菌的生长，而对乳酸球菌则长势较弱。M17培养基较适合于乳酸球菌的培养，在检测时可同时使用多个培养基作比较，以免某些乳酸菌在个别培养基上生长效果不良7。改良chalmers培养基成分中牛肉膏、酵母膏含量较高，具有丰富的氨基酸、维生素、核酸等，并用国产大豆蛋白胨替代鱼肉蛋白胨，能刺激所有乳酸菌的生长；培养基中CaCO3的使用量也很大，有利于显示乳酸菌产生的高酸，通过菌落周围乳酸溶解CaCO3形成的透明圈识别乳酸菌。因此，改良chalmers培养基，可用于快速检测活性酸奶及其发酵剂中的各种乳酸菌的数量，尤其适用于发酵乳制品被杂菌污染情况下的乳酸菌计数。由于牛乳是多数乳酸菌的良好培养基，因而常用脱脂乳培养基活化和保藏试管菌种。乳酸菌的平板培养基常采用乳清、番茄汁、改良MRS、M17琼脂培养基。通常乳清培养基和溴甲酚绿(BCG)牛乳培养基适合于多数乳酸杆菌和乳酸球菌生长，改良MRS培养基适合于对数乳酸杆菌生长，而番茄汁培养基和M17琼脂培养基适合于多数乳酸球菌生长。由于乳酸菌在平板培养基上长势较弱，因此接种平板之前要用脱脂乳或MRS液体培养基进行活化，采用活力较高的菌种作平板培养。通常市售酸奶和复合菌种发酵剂中含有两种或两种以上的乳酸菌种，因此测定乳酸菌活力之前，需先进行平板分离和纯化培养得到纯粹培养物，再以制备的单一菌种扩大培养物测定其活力。如果是单一菌种发酵剂可直接测定乳酸菌活力，无需平板分离和纯化培养7。1.4菌落总数测定（1）菌落计数可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。1 选取菌落数在30 cfu300 cfu之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 cfu的平板记录具体菌落数，大于300 cfu的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。2 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数9。计算公式：每克样品中的菌株数=（C/V）*MC：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V：涂布平板时所用的稀释液的体积（mL）M：稀释倍数 （2）若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式（1）计算： （1）式中：N样品中菌落数；C平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d稀释因子（第一稀释度）2 实验材料2.1实验仪器（1）恒温生化培养箱：361 SHP-250型 上海精宏实验设备有限公司 301 LRH-150B型 广东省医疗器械厂（2）数显恒温水浴箱：461 HH-4型 国平电器有限公司（3）分析天平：感量0.0001 g FA-2104型 上海民桥精密科学仪器有限公司（4）电子天平：感量0.01 g SL202K型 上海民桥精密科学仪器有限公司（5）冰箱：4（6）恒温振荡器：SHZ-82 常州国华电器有限公司（7）显微镜、载玻片、精密pH试纸、接菌环2.2实验材料2.2.1实验样品辉山酸牛奶样品名称：辉山老口味酸奶（凝固型） 净含量：175 g配料：鲜牛奶、白砂糖、蜂蜜、食品添加剂（安赛蜜）、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌产品标准号：GB2746 生产日期：2014.11.11保质期：26 14天乳饮料保质期：26冷藏，21天 生产日期：2014.11.24伊利QQ星儿童成长奶酪保质期：9个月，28冷藏存放 生产日期：2014.11.21酱油：保质期：12个月，18以下阴凉处储存 生产日期：2014.10.12泡菜：12个月，常温 生产日期：2014.11.23酒糟样品名称：老龙口酒糟 生产日期：2014.12.23 2.2.2实验药品CaCO3粉末（干热灭菌）、3%的H2O2溶液、革兰氏染色液、葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、乙酸钠、MgSO4 7H2O、MnSO4 4H2O、吐温-80、琼脂、酵母浸膏、牛肉浸膏、乳糖、K2HPO4、醋酸钠、氯化钠等2.2.3实验试剂的配制1 无菌水：蒸馏水分装成9 mL和90 mL两种，9 mL装于试管中，90 mL装于锥形瓶中（并在瓶中添加适量的玻璃珠），塞入棉塞，包扎，121 高压灭菌20 min(灭菌后做无菌实验，待用)。2 无菌生理盐水称取8.5 g氯化钠溶于1000 mL蒸馏水中，分装成9 mL和90 mL两种，9 mL装于试管中，90mL装于锥形瓶中(并在瓶中添加适量的玻璃珠)，塞入棉花，包扎，121 高压灭菌20 min(灭菌后做无菌实验，待用)。3 MRS培养基成分：葡萄糖 10 g，蛋白胨10 g，牛肉膏10 g，酵母膏5 g，柠檬酸二铵2 g，磷酸氢二钾2 g，乙酸钠5 g，MgSO4 7H2O 0.2 g，MnSO44H2O 0.05 g，吐温-80 1ml，琼脂 15 g，蒸馏水1000 mL，pH6.26.4（若培养乳酸球菌则应调节pH至6.87.0）。制法：将MgSO4、MnSO4、葡萄糖、吐温-80以外的各成分溶解，冷却至50，以醋酸调节pH6.26.4或pH6.87.0，而后加入MgSO4与MnSO4，最后加入葡萄糖和吐温-80，按量加入1.5%琼脂，煮沸使其溶解，分装三角瓶中（每个锥形瓶装入100 ml），塞棉塞，包扎，0.07Mpa灭菌20min备用10(灭菌后做无菌实验，待用)。4 改良TJA培养基成分：番茄汁50 mL、酵母浸膏5 g、牛肉浸膏5 g、乳糖20 g、葡萄糖 2 g、 K2HPO4 2 g、吐温-80 1 g、醋酸钠5 g、琼脂 15 g、蒸馏水1000 mL（pH6.80.2）（新鲜番茄切碎4冰箱412h纱布过滤高压灭菌（121，15-20min）制法：准确称取上述成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，冷却后调节pH值为6.80.2，而后装入锥形瓶中，塞入棉花，包扎，121 高压灭菌20 min备用6(灭菌后做无菌实验，待用)。5 革兰氏（Grams）染液结晶紫液（1）结晶紫 2克 95%酒精 20 mL （2）草酸铵 0.8克 蒸馏水 80 mL 使用前将（1）、（2）液相混，静置48小时后使用。 碘液碘 1克 碘化钾 2克 蒸馏水 300 mL 将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀释至300 mL95%酒精溶液 番红花红液2.5%番红花红酒精溶液 10 mL 蒸馏水 100 mL3 实验步骤每次进行实验时都先将无菌室进行紫外灭菌30 min。3.1样品初步菌种检测3.1.1革兰氏染色反应革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising agent）和复染液（counterstain）。初染液一般是结晶紫（crystal violet）；媒染剂是碘（iodine）；脱色剂是95%的酒精（ethanol），复染液常用番红。细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G-）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍显蓝紫色，阴性菌则被染上红色7。流程：涂片干燥固定草酸铵结晶紫初染（12min）水洗碘液媒染（1min）水洗95%乙醇脱色（30s）水洗沙黄复染（12min）水洗滤纸吸干镜检3.1.2H2O2实验（过氧化氢酶检测）过氧化氢酶检测是微生物学家鉴定细菌种类的主要的三种检测手段之一，即用过氧化氢来检测过氧化氢酶是否存在。假如细菌中含有过氧化氢酶，则在过氧化氢溶液中加入少量细菌提取物就能观察到氧气气泡生成。 有气泡生成，则该菌被认为是呈“过氧化氢酶阳性”。如staphylococcus和micrococcus。没有，则该菌被认为是呈“过氧化氢酶阴性”。如streptococcus和enterococcus。 虽然过氧化氢酶检测无法鉴定特定生物体，但与其他检测方法结合，它可以有效地帮助诊断。 此外细菌中是否存在过氧化氢酶，还取决于细胞生长条件和所使用的培养基。操作触酶试验应尽量避免用铂金取菌环（针）在H2O2上涂菌，而应先涂菌，在滴H2O2，步骤不能颠倒。因为铂金可以和H2O2产生假阳性反应。H2O2必须新鲜，若放置过久或暴露于光线下容易分解，必须保存于4冰箱。实验所用菌须大量，不可挑到琼脂，会产生假阳性。玻片法仅为筛选实验8。3.1.3初步梯度实验样品稀释：实验前，无菌室进行紫外杀菌30 min。以无菌吸管吸取10 mL牛奶置盛有90 mL生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，放入振荡器中，振荡15分钟。制成1:10的样品匀液。用无菌吸管吸取1:10样品匀液，沿管壁缓慢注入盛有9 mL无菌生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及生理盐水液面），振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打至混合均匀，制成1:100的样品匀液。选择10-110-7的稀释度，每个稀释度分别吸取1 mL匀液加入到无菌平皿内（每一个稀释要更换一个移液管）。倾注法接种平板：及时将1520 mL冷却至50的平板计数培养基（可放置于601恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，在倾注平皿之前，加入CaCO3到培养基中摇匀后使用。做两种培养基，每个稀释度做两个平板，并做空白对照（每次操作在30min内完成）。培养和计数：琼脂凝固后，将平板翻转，361培养482h9。表2.1 样品的浓度对菌落计数的影响样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数原液10-110-210-310-410-510-610-7多不可记多不可记多不可记多不可记多不可记103613717多不可记多不可记多不可记多不可记多不可记106213321多不可记多不可记多不可记多不可记多不可记128017720多不可记多不可记多不可记多不可记多不可记101619028镜检形态 取上述平板凝固培养物1环，进行涂片、革兰氏染色，油镜观察细胞呈杆状或链球状，革兰氏染色阳性；同时挑取1环培养液与载玻片上的3% H2O2混匀，视产气泡情况（不产气泡为过氧化氢阴性）。3.2酸奶的菌落总数测定样品的稀释：操作步骤与上述相同，但稀释度不同，稀释度为10-5、10-6、10-7。及时将1520 mL冷却至50的平板计数培养基（可放置于601恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，在倾注平皿之前，向培养基中加入CaCO3，摇匀后使用。做两种培养基，每个稀释度做两个平板，并做空白对照（每次操作在30 min内完成）。培养：琼脂凝固后，将平板翻转，361培养482h。3.2.1样品的稀释在无菌室中，将酸奶的外包装用酒精棉擦拭消毒，然后打开包装，以10mL无菌移液管移取10mL样品置于有90 mL生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。用1 mL无菌吸管吸取1：10样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中（注意移液管尖端不要接触及稀释液面），振摇试管使其混合均匀，制成1：100的样品匀液10。按操作程序，制备稀释度为10-3、10-4、10-5、10-6、10-7的样品匀液。每递增稀释一次，换用一次1 mL无菌移液管。根据对样品菌落生长状况的估计，选择23个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1 mL样品匀液加入四个无菌平皿内。及时将提前活化冷却至50的两种培养基（可放置于601 恒温水浴箱中保温）分别倾注平皿（每个稀释度做两个平板），并转动平皿使其混合均匀。在倾注平皿之前，向培养基中加入CaCO3，摇匀后使用（每次操作在30 min内完成）。（2）培养琼脂凝固后，将平板翻转，361 培养48h2h。如果样品中可能有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层水琼脂培养基（约4 mL），凝固后翻转平板，按条件进行培养。3.2.2菌落计数可用肉眼观察，必须时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。选取菌落数在30 cfu300 cfu之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 cfu的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可记。每个稀释度的菌落总数应采用两个平板的平均数。其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用11，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。3.2.3镜检形态 取上述平板凝固培养物1环，进行涂片、革兰氏染色，油镜观察细胞呈杆状或链球状，革兰氏染色阳性；同时挑取1环培养液与载玻片上的3% H2O2混匀，视产气泡情况（不产气泡为过氧化氢阴性）。3.3五种不同食物的平行实验检样1：辉山酸牛奶、乳饮料、奶酪、酒糟按照2.2中步骤（1）（4）进行实验。检样2：酱油、泡菜在无菌室中，以10mL无菌移液管移取10mL样品置于有90 mL无菌水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当的无菌玻璃珠）中，在振荡器中振荡30 min，制成1：10的样品匀液。其他步骤按照2.2中（1）（4）进行实验。4 实验结果与分析4.1平皿计数结果将样品用两种培养基分别培养，间隔48 h观察结果，连续6次实验。12月14日计数结果见表4.1。表 4.1 酸奶中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-510-610-715681371718361901911601982812821763712月16日计数结果见表4.2。表4.2 奶酪中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-310-410-5115108861499212910714912月24日计数结果见表4.3表4.3 酒糟中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-310-410-5124125503171117012月24日计数结果见表4.4表4.4 乳饮料中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-510-610-725140927755226166715131312月28日计数结果见表4.5表4.5 泡菜中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-510-610-71621720112092112月29日计数结果见表4.6表4.6 酱油中乳酸菌的菌落计数结果样品稀释度 MRS培养基菌落总数 TJA培养基菌落总数10-510-610-71311104012209414.2菌落总数计数结果统计两种培养基的菌落总数，数据见表4.7表 4.7 取平均数方法计算菌落总数日期 稀释度 GB/T4789.2-2008 （MRS） GB/T4789.2-2008 （TJA） 12.14 10-5 酸奶10-6 10-7 12.16 10-3 奶酪 10-4 10-5 12.24 10-3 酒糟10-4 10-5 12.24 10-5 乳饮料10-6 10-7 12.28 10-5 泡菜10-6 10-7 12.29 10-5 酱油 10-6 10-7 4.8六种不同食物的平行实验菌落总数测定结果（cfu/ mL）表 3.8 六种食品平皿计数（稀释度10-5） 样品 MRS TJA辉山酸牛奶乳饮料奶酪泡菜酱油酒糟1.71082.61078.51051.21061.21065.0104 1.21082.11079.01051.01061.11065.01045 总结（1）根据革兰氏染色和过氧化氢试验判断乳酸菌种类，最终证实乳酸菌种类。（2）通过MRS与TJA对6种不同食品中的乳酸菌总数检测对比，试验结果表明：酸奶中乳酸菌较其他食品中的细菌总数高出很多，更适合乳酸菌的生长。采用新国标标准，能提高菌落总数检出率，体现出对产品品质的更严格要求，是对消费者健康的保护，也是对食品制造商提高产品质量的更高要求。乳酸菌是一种存在于人类体内的