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酶的固定化一、单选题1固定化酶技术常采用( )。a包埋法 b化学结合法和物理吸附法c凝胶法 d微胶囊法【答案】b【解析】酶的体积较小,容易从包埋材料中漏出来,所以一般采用化学结合和物理吸附法固定。2下列有关制备固定化酵母细胞的叙述,正确的是 ( )a. 利用5%的海藻酸钠溶液比蒸馏水活化酵母细胞效果更好b. 采用酒精灯小火间断加热使海藻酸钠溶化后还需要注意定容处理c. 将溶化后的海藻酸钠立即与活化的酵母细胞等量混合并充分混匀d. 以恒定的速度将注射器中的胶液滴加到适宜的cacl2溶液中即可获得规则的凝胶珠【答案】b【解析】海藻酸钠溶液会胞埋酵母细胞,活化酵母细胞效果会更差,a错误;溶化海藻酸钠应采用酒精灯小火或间断加热,防止海藻酸钠焦糊,溶化后还需要及时定容,b正确;将海藻酸钠溶液与酵母细胞混合时,需将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞,以避免温度过高杀死酵母细胞,c错误;以恒定的速度将注射器中的胶液滴加到适宜的cacl2溶液中,慢慢会形成规则的凝胶珠,d错误。【点睛】解答本题要注意以下几点:1、用蒸馏水活化酵母细胞。2、溶化海藻酸钠应采用小火或间断加热。3、溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,才能加入已活化的酵母细胞。3下列不属于固定化酶作用的特点的是 ( )a有利于酶与产物分解b可以被反复利用c能自由出入依附的载体d一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应【答案】c【解析】试题分析:固定化酶既能与反应物接触,又能与反应物分离,还可以重复利用,a正确;固定化酶可以被反复利用,b正确;固定化酶固定在载体上,不能自由出入载体,c错误;固定化细胞的优点是能催化一系列的酶促反应,d正确。考点:本题考查固定化酶的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。4下列关于固定化酶的说法,错误的是( )a. 固定化酶不足之处是不能催化一系列反应b. 固定化酶可再次利用,降低了生产成本c. 固定后的酶既能与反应物接触,又能与反应物分离d. 固定化酶易溶于水【答案】d【解析】试题分析:由于酶具有专一性,因此固定化酶不能催化一系列反应,a正确;固定化酶可反复利用,降低了生产成本,b正确;固定后的酶既能与反应物接触,又能与反应物分离,c正确;固定化酶不易溶于水,易与反应物分离,d错误。考点:本题考查固定化酶技术和细胞固定化技术的相关知识,意在考查学生的识记能力和判断能力,运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。5固定化酶的优点是()a有利于提高酶活性 b有利于提高反应速度c有利于产物的纯化 d有利于酶发挥作用【答案】c【解析】试题分析:固定化酶的优点是能让酶和产物分开,有利于产物的纯化,故c正确。考点:本题主要考查固定化酶的优点,意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。6关于酶工程的叙述,正确的是( )a酶的分离提纯要依次经过过滤、层析、沉淀、提纯等步骤b利用枯草杆菌生产的-淀粉酶可用于降解水体中的某些污染物c加酶洗衣粉能提高去污能力是因为运用了酶的固定化技术d尿糖试纸中含有葡萄糖羧化酶和过氧化氢酶【答案】b【解析】层析是利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法层析后不需要沉淀,a错误;利用枯草杆菌生成的-淀粉酶可用于降解水体中的某些污染物,b正确;加酶洗衣粉能提高去污能力是利用酶的催化作用,c错误;尿糖试纸中含有葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶,d错误。【考点定位】固相化酶的应用价值;制备和应用固相化酶【名师点睛】本题主要考查酶工程的相关知识酶工程就是将酶或者微生物细胞、动植物细胞、细胞器等在一定的生物反应装置中,利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术它包括酶制剂的制备,酶的固定化,酶的修饰与改造及酶反应器等方面内容酶工程的应用,主要集中于食品工业,轻工业以及医药工业中。7下列有关酶应用的叙述,不正确的是( )加酶洗衣粉能提高一些衣物的洗涤效果,但不适于丝、毛衣物的洗涤营养学家建议适量吃含纤维素食品,因为人消化道中有纤维素酶嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,用于牛肉烹调时可先用开水溶解溶菌酶含片有消炎作用,含蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的多酶片可助消化a. b. c. d. 【答案】d【解析】加酶洗衣粉能提高一些衣物的洗涤效果,但不适于丝、毛衣物的洗涤,因为蛋白酶会水解蛋白质类的丝绸,正确;营养学家建议适量吃含纤维素食品,是为了促进肠道蠕动,促进消化,人消化道中没有纤维素酶,错误;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,酶在高温下会彻底失活,不宜用开水,错误;溶菌酶含片能溶解细菌的细胞壁,具有消炎作用,含蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的多酶片可助消化,正确;8关于酵母细胞的活化,下列说法错误的是a. 活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态b. 酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要0.51hc. 酵母细胞活化时,体积会变小d. 将干酵母放人盛水的小烧杯中,不断搅拌成糊状,放置在适宜的条件下即可活化【答案】c【解析】活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态,a正确;酵母细胞活化的时间较短,一般需要0.51h,b正确;酵母细胞活化时,体积变大,c错误;将干酵母细胞放入盛水的小烧杯中,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,使其活化,d正确。9下列制备固定化酵母细胞的步骤正确的是细胞的活化配制物质的量浓度为0.05 mol/l的cacl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞a. b. c. d. 【答案】d【解析】制备固定化酵母细胞的步骤是:细胞的活化、配制物质的量浓度为0.05mol/l的cacl2溶液、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合、固定化酵母细胞;所以d选项是正确的。10科研人员研究了氯化钙溶液浓度对固定化啤酒酵母发酵性能的影响,结果如下图所示。下列相关叙述正确的是a. 实验中氯化钙溶液的主要功能是为酵母细胞的生长增殖提供营养b. 氯化钙溶液浓度在2.0moll-1左右时,凝胶珠硬度最大c. 研究表明,酵母固定化的适宜氯化钙溶液浓度为2.4 moll-1左右d. 凝胶珠硬度过大时,发酵产生的酒精反而减少的原因是固定化阻止了酵母细胞与外界的物质交换【答案】d【解析】实验中氯化钙溶液的主要功能是使海藻酸钠聚沉,形成稳定多孔的含酵母菌的凝胶珠,a项错误;据图可知,氯化钙溶液浓度在2.4moll-1左右时,凝胶珠硬度最大,b项错误;研究表明,酵母固定化的适宜氯化钙溶液浓度为2.0 moll-1左右,当氯化钙浓度过高时,凝胶柱机械强度大,通透性降低,会影响糖进入颗粒内部,c项错误;凝胶珠硬度过大时,发酵产生的酒精反而减少的原因是固定化阻止了酵母细胞与外界的物质交换,d项正确。【点睛】本题着重考查了制备和应用固相化酶的相关知识,考生要能够从曲线图中获得解题的相关信息;识记游离态酶和固相化酶的优缺点,以及制备海藻酸钠溶液的过程和注意点等。分析图解可知,本实验的自变量为氯化钙浓度,因变量包括硬度、酒精度、凝胶珠完整率随着氯化钙浓度的增加,硬度在氯化钙浓度为2.0mol/l时达到最低,而酒精度此时最高;但是凝胶珠完整率在不断升高。11水是实验中经常使用的试剂之一。下列叙述正确的是a从鸡的血细胞中提取dna过程至少需三次使用蒸馏水b经苏丹iii染色后的花生子叶切片需用清水洗去浮色c制备固定化酵母细胞时,需将凝胶珠在蒸馏水中浸泡30mind观察植物细胞有丝分裂实验中,解离后的根尖需用清水漂洗【答案】d【解析】从鸡的血细胞中提取dna过程至少需二次使用蒸馏水,a错误;经苏丹染色后的花生子叶切片需用50%的酒精洗去浮色,b错误;凝胶珠在cacl2溶液中浸泡30min左右,c错误;观察植物细胞有丝分裂实验中解离后的根尖需用清水漂洗,d正确。【考点定位】观察细胞的有丝分裂;检测脂肪的实验;dna的粗提取和鉴定;制备和应用固相化酶【名师点睛】相关实验的关键点:1、在dna的粗提取和鉴定中,第一次加蒸馏水使细胞吸水涨破,释放dna;第二次加蒸馏水是降低氯化钠浓度,使dna析出。2、经苏丹染色后的花生子叶切片,需用50%酒精洗去浮色。3、观察细胞有丝分裂实验的步骤:解离(解离液由盐酸和酒精组成,目的是使细胞分散开来)、漂洗(洗去解离液,便于染色)、染色(用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染料)、制片(该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层,使之不相互重叠影响观察)和观察(先低倍镜观察,后高倍镜观察)。12下列对生物技术实践的相关实验的叙述中,不正确的是a. 用平板划线法接种微生物时,每次划线前后都要对接种环进行灭菌b. 制备凝胶珠时,cacl2溶液的作用是使胶体聚沉c. 为了确定选择培养基是否具有选择作用,应设计一个不接种的培养基作对照d. 在其它条件适宜时,果胶酶量增加到某个值后果汁体积不能再提高,则该酶量为此条件下的最适用量【答案】c【解析】用平板划线法接种时,每次划线后都要对接种环进行灭菌,在酒精灯火焰旁冷却后再进行下次划线,a正确;制备凝胶珠时,cacl2溶液的作用是使胶体聚沉,b正确;选择培养基的作用是目的菌能够正常在其上生存,其他微生物不能正常生存,为了确定选择培养基是否具有选择作用,应设计一个在完全培养基上接种的培养皿作对照,c错误;在其他条件适宜时,果胶酶量增加到某个值后果汁体积不能再提高,说明酶量已经到达饱和,则该酶量为此条件下的最适用量,d正确。13下列关于酶和固定化酶的研究与应用的叙述,正确的是a作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药b尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用c固定化后的淀粉酶可以连续水解废水中的淀粉为葡萄糖,因而可用于保护环境d“加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关,与污物或衣物的性质无关【答案】a【解析】试题分析:作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药,a正确;试纸法检测尿糖的原理是利用试纸上的葡萄糖氧化酶将葡萄糖分解成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢又与试纸上的苯酚等无色物质反应形成红色物质,将其与标准比色卡比对,即可知道尿样中葡萄糖的含量,b错误;固定化后的淀粉酶可以连续水解废水中的淀粉为麦芽糖和葡萄糖,因而可用于保护环境,c错误;“加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关,与污物或衣物的性质也有关,d错误。考点:本题考查酶和固定化酶的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力。14下面制备固定化酵母细胞的正确步骤是( )配制cacl2溶液 海藻酸钠溶化 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 酵母细胞活化 固定化酵母细胞abcd【答案】b【解析】试题分析:制备固定化酵母细胞的步骤是:酵母细胞活化配制cacl2溶液海藻酸钠溶化海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞,b正确。考点:本题考查制备固定化酵母细胞的过程。15下列有关制备固定化酵母细胞叙述正确的是a在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞b溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温,才能加入细胞c溶解海藻酸钠,最好采用小火,或者持续加热的方法d在固定化酵母细胞的过程中,要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的cacl2溶液中 【答案】abd【解析】试题分析:向溶化的海藻酸钠溶液中加入的是活化的酵母细胞,故a正确。溶化好的海藻酸钠溶液需要冷却到室温才能加入细胞,否则细胞可能失去活性,故b正确。溶解海藻酸钠需用小火,或者间断加热,故c错误。固定化酵母细胞过程中,需要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的cacl2溶液中,故d正确。因此应选abd。考点:本题考查酵母细胞的固定化相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。16下列有关固定化技术的叙述错误的是 ( )a从操作角度来考虑,固定化细胞比固定化酶更容易b固定化细胞比固定化酶对酶活性的影响更小c固定化细胞固定的是一种酶d固定化酶和固定化细胞的共同优点之一就是可以重复使用【答案】c【解析】试题分析:固定化细胞比固定化酶操作更容易,故a正确;细胞内部的酶比在外界环境中受到的影响更小,故b正确;固定化细胞固定的是一系列酶,而不是一种酶,故c错误;固定化酶和固定化细胞都可以重复利用,故d正确。考点:本题考查酶的研究和应用的有关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。17在以下酶的固定方法的模式图中,依次是( )a. 包埋法、载体结合法、载体结合法、交联法b. 包埋法、包埋法、载体结合法、交联法c. 载体结合法、包埋法、载体结合法、交联法d. 交联法、包埋法、载体结合法、载体结合法【答案】b【解析】表示包埋法,将酶包埋在细微网格内;表示包埋法,将酶包埋在微胶囊中;表示载体结合法,将酶吸附在载体表面;表示化学结合法(交联法),将酶互换连接起来;所以b选项是正确的。18下列关于实验操作的叙述,错误的是a. 不宜将刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板倒过来放置b. dna的粗提取与鉴定实验中,提取时若搅拌速度过快,鉴定时蓝色会偏浅c. 稀释涂布平板法用于微生物的分离计数,统计结果比实际值可能偏小d. 制备固定化酵母细胞时,向刚溶化的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母【答案】d【解析】在酒精灯火焰附近刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板,其培养基温度约为50左右,呈液态,需待其冷却凝固(大约需要510min)后,才能将平板倒过来放置,即不宜将刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板倒过来放置,a正确;dna的粗提取与鉴定实验中,提取时若搅拌速度过快,会加剧dna分子的断裂,导致析出的dna分子少或不能形成絮状沉淀,鉴定时蓝色会偏浅,b正确;稀释涂布平板法用于微生物的分离计数,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以统计结果比实际值可能偏小,c正确;制备固定化酵母细胞时,溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温,才能加入已活化的酵母菌,d错误。19如图所示的固定化方式中,适宜固定化酶的方法是 ( )a b c d【答案】【解析】据图分析,表示化学结合法,将酶互相连接起来;表示包埋法,将酶包埋在细微网格内;表示物理吸附法,将酶吸附在体表面由于酶分子较小,不适用包埋法,用化学结合法和物理吸附法。【考点定位】本题主要考查固定化酶技术。20下列关于制备固定化酵母菌细胞的过程,错误的是()a. 酵母菌细胞活化时,其吸水方式为渗透作用b. 将疑胶珠在氯化钙中浸泡c. 固定好的凝胶珠用蒸馏水冲洗3次d. 固定化酵母菌细胞的发酵成本较低【答案】a【解析】酵母菌细胞活化时,干酵母的吸水方式为吸胀作用,a项错误;将凝胶珠在氯化钙中浸泡,b项正确;固定好的凝胶珠需要用蒸馏水冲洗3次,c项正确;固定化的酵母菌细胞可以多次重复使用,发酵成本较低,d项正确。21下面是制备固定化酵母细胞的步骤,正确的是配制cacl2溶液 海藻酸钠溶化 海藻酸钠与酵母细胞混合 酵母细胞活化 固定化酵母细胞ab. c. d. 【答案】d【解析】试题分析:制备固定化酵母细胞的步骤是:酵母细胞活化配制0.05mol/l的cacl2溶液海藻酸钠溶化海藻酸钠与酵母细胞混合固定化酵母细胞,所以选d。考点:本题考查制备固定化酵母细胞的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点。22图12中符合固定化酶特征的是 ( )【答案】d【解析】试题分析:固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法固定化酶优点是使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被反复利用在装置中酶是固定不动的,反应物是动的。考点:本题考查制备和应用固定化酶,要求考生识记固定化酶的优点、实例、操作过程等基础知识,能结合所学的知识作出准确的判断,属于考纲识记层次的考查。23下列有关制备固定化酵母细胞的叙述,正确的是a. 取1g干酵母,放入50ml烧杯中,加满蒸馏水,使其活化b. 配制海藻酸钠时,加热用大火,直到海藻酸钠溶化为止c. 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞d. 将新制得的固定化酵母凝胶珠用清水反复冲洗,以防止杂菌污染【答案】c【解析】取1g干酵母,放入50ml烧杯中,加10ml蒸馏水,以利于搅拌,使其活化,a项错误;配制海藻酸钠时,加热用小火,防止焦糊,b项错误;将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞,c项正确;将新制得的固定化酵母凝胶珠用蒸馏水反复冲洗,d项错误。24下列有关生物技术实践相关实验的叙述,正确的是a. 制作果酒的温度一般要略高于果醋的制作温度b. 制作固定化酵母细胞实验中,需将凝胶珠置于cacl2溶液中处理适宜的时间c. 制作固定化酶的最佳方法是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定d. 腐乳制作的全过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用【答案】b【解析】果酒制作所需最适温度约为20,果醋所需最适温度为30至35,a错误;制作固定化酵母细胞实验中,需将凝胶珠置于cacl2溶液中处理适宜的时间,b正确;制作固定化酶的方法之一是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定,但不一定是最佳方法,c错误;腐乳制作的中间过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用,但不前期和末期不需要毛霉,d错误。【考点定位】果醋和果酒的制作、腐乳的制作、酵母细胞的固定化25下图表示某同学进行的澄清苹果汁生产实验,下列相关叙述正确的是()a. 实验中所用的固定化果胶酶由海藻酸钠直接包埋获得b. 为防止杂菌污染,图示装置制作完毕后应瞬间高温灭菌c. 通过控制阀调节苹果汁流出的速率,保证反应充分进行d. 固定化果胶酶不可重复使用,每次生产前应重新填装反应柱【答案】c【解析】酶的分子较小,一般不用包埋法固定,a项错误;瞬间高温灭菌会使固定化酶失去活性,b项错误;加入苹果汁后可关闭控制阀一段时间,再通过减慢苹果汁流出的速率,让底物与酶充分接触,使反应充分进行,c项正确;固定化果胶酶可重复使用,d项错误。【点睛】酶和细胞的固定有包埋法、物理吸附法、化学结合法,但细胞一般用包埋法,酶适合物理吸附法和化学结合法。这是因为酶分子小,容易从包埋物中脱离;而细胞体积大,不便于吸附和结合。26下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析,错误的是a. 干酵母细胞处于休眠状态,需置于蒸馏水中活化b. 配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热,以防海藻酸钠焦糊c. 若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色,固定的细胞数目过少d. 固定化酵母菌利用葡萄糖的效率比游离的酵母菌要高【答案】d【解析】干酵母细胞处于休眠状态,需置于蒸馏水中用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀成糊状,放置1h左右,使其活化,a项正确;为防海藻酸钠焦糊,配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止,b项正确;若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色,固定的细胞数目过少,c项正确;固定化酵母菌利用葡萄糖的效率比游离的酵母菌要低,d项错误。27下列关于酶和固定化酶的研究与应用的叙述,正确的是a. 从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响大b. 作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药c. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用d. 固定化酶与直接使用酶相比,其优点是可以催化一系列的反应【答案】b【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果,而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构,a错误;消化酶在消化道内起作用,则蛋白酶制剂以口服方式给药,b正确;尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开,所以不能再次使用,c错误;固定化细胞可以催化一系列的反应,d错误。28酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛应用于各个领域,下列叙述正确的是( )a.用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶,但嚼服后会失去疗效b.固定化酵母细胞的常用方法是吸附法,这种方法对酵母细胞活性影响最小c.固定化酶的应用中,要控制好ph、温度、溶解氧和营养条件d.固定化细胞用于生产胞外酶和分泌到胞外的产物【答案】a【解析】试题分析:a.消化酶的本质是蛋白质,能被消化道中的水解酶水解,正确;b.固定化酶和固定化细胞利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法,b错误;c.固定化酶的应用中,不需要营养条件,要控制好ph、温度,但和溶解氧无关,c错误;d.固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用,无分泌到胞外的产物,d错误。故选a。考点:此题考查固定化酶和固定化细胞,考查学生对基础知识的掌握和应用能力,解题的关键是理解固定化技术的相关知识。29下列关于生物技术实践的叙述中,正确的是 ( )a.用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀b.参与制作果酒、果醋和腐乳的菌种中只有毛霉是真核生物c.海藻酸铀溶液浓度过高会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色d.用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是充分研磨和瓦解细胞膜【答案】a【解析】试题分析:用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀,故a正确。果酒与酵母菌相关,果醋和醋酸菌相关,腐乳与多种霉菌相关,只有醋酸菌是原核生物,其他是真核生物,故b错。海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色,固定的酵母细胞少,故c错。用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是溶解dna和瓦解细胞膜,故d错。考点:本题考查生物技术实践相关知识,意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力。二、非选择题3030下面是某同学所做的生成啤酒酿造实验,请根据其实验过程,回答相关问题:实验原理:利用固定化酵母菌分解麦芽汁,生成啤酒。实验步骤:第一步:酵母细胞活化。取一克干酵母,放入50 ml的小烧杯中,加蒸馏水10 ml,用玻璃棒搅拌均匀,放置一小时,使其活化。第二步:配制海藻酸钠溶液。取0.7 g海藻酸钠,放入另一只50 ml的小烧杯中,加蒸馏水10 ml,并搅拌,直至溶化,用蒸馏水定容至10 ml。加热时,注意火候。第三步:海藻酸钠与酵母细胞混合。将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化的酵母细胞,充分搅拌均匀。第四步:用注射器以恒定的速度将上述混合液滴加到0.05 mol/l的cacl2溶液。制成凝胶珠。第五步:倒去cacl2溶液,加无菌水洗涤三次后,将凝胶珠放入500 ml三角瓶中,加入300 ml麦芽汁溶液,置于25 下封口,发酵五天后,倒出发酵后的麦芽汁即为啤酒,品尝其口味。(1)酵母细胞活化的作用是_。第二步中注意火候指的是_。第三步中为什么要等海藻酸钠溶液冷却至室温,再加入活化的酵母细胞?_。 (2)凝胶珠的组成是海藻酸钠与_。海藻酸钠的主要作用是_。(3)上述固定化细胞的方法称为_,形成的凝胶珠颜色为_色。如果形成的凝胶珠颜色过浅,则配制的海藻酸钠溶液浓度_,如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则配制的海藻酸钠浓度_。(4)与固定化酶相比,该方法的优点是_。(5)要想反复使用固定化酵母细胞,实验过程要在严格的_条件下进行,同时要控制适宜的_和_。【答案】 让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态 用小火或间断加热 防止高温杀死酵母细胞 酵母细胞 固定酵母细胞 包埋法 浅黄 过低 过高 成本更低,操作更容易;省去酶的分离、提纯等工序,同时酶的活性更稳定 无菌 温度 ph【解析】试题分析:(1)酵母细胞活化的作用是让休眠状态的酵母细胞恢复到正常生活状态。第二步中注意火候指的是用小火或间断加热,防止海藻酸钠焦糊。为防止高温杀死酵母细胞,第三步中要等海藻酸钠溶液冷却至室温,再加入活化的酵母细胞。(2)凝胶珠的组成是海藻酸钠与酵母细胞。海藻酸钠的主要作用是固定酵母细胞。(3)上述固定化细胞的方法称为包埋法,形成的凝胶珠颜色为浅黄色色。如果形成的凝胶珠颜色过浅,则配制的海藻酸钠溶液浓度过低,如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则配制的海藻酸钠浓度过高。(4)与固定化酶相比,固定化细胞的优点是成本更低,操作更容易;省去酶的分离、提纯等工序,同时酶的活性更稳定。(5)要想反复使用固定化酵母细胞,实验过程要在严格的无菌条件下进行,同时要控制适宜的温度和ph,以保证酵母细胞的活性。考点:本题考查酵母细胞固定化的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。31某科研小组采用80水浴熔化海藻酸钠,固定黑曲霉孢子(含-葡萄糖苷酶),并进行相关催化实验,请分析回答问题。(1)此实验过程中采用80水浴代替小火或者间断加热法熔化海藻酸钠,其优点是_。熔化的海藻酸钠加入黑曲霉孢子悬浮液前一定要进行_处理,海藻酸钠的最终质量分 数需控制在3%,原因是_。(2)实验过程中,初形成的凝胶珠放在cacl2溶液中静置30min,目的是_。(3)-葡萄糖苷酶能催化大豆苷水解为大豆苷元,ph和温度对游离孢子和固定化凝胶珠中-葡萄糖苷酶活性影响的结果如下页左图所示,由图可知:研究ph和温度对葡萄糖苷酶活性影响时,温度和ph应分别控制为_、_;与游离孢子相比,固定化凝胶珠中-葡萄糖苷酶的ph适宜范围_,热稳定性_。处理温度/转化率游离孢子固定化凝胶珠3010010040991005098996065987029928055090010转化率=反应前大豆苷含量-反应后大豆苷含量反应前大豆苷含量100%【答案】 80 水浴加热能准确控制温度,熔化过程不会出现焦糊,且溶化时间短 冷却 海藻酸钠浓度太高不易形成凝胶珠,浓度太低包埋的黑曲霉孢子少 形成稳定的网状凝胶结构 30(3040) 4.8 增大 提高【解析】试题分析:熟记并理解固定化细胞技术的含义、实验操作的流程、注意事项等相关基础知识,形成清晰的知识网络。在此基础上,从题意、曲线图和表格中提取有效信息并对相关的问题情境进行作答。(1)此实验过程中采用80水浴代替小火或者间断加热法熔化海藻酸钠,其优点是80 水浴加热能准确控制温度,熔化过程不会出现焦糊,且溶化时间短。熔化的海藻酸钠加入黑曲霉孢子悬浮液前一定要进行冷却处理,以免杀死黑曲霉孢子。海藻酸钠的最终质量分数需控制在3%的原因是:海藻酸钠浓度太高不易形成凝胶珠,浓度太低包埋的黑曲霉孢子少。(2)实验过程中,初形成的凝胶珠放在cacl2溶液中静置30min的目的是:形成稳定的网状凝胶结构。(3)表中信息显示:当处理温度为30(或3040)时,游离孢子和固定化凝胶珠的转化率均最高,随温度的升高,游离孢子的转化率降低的幅度较固定化凝胶珠的转化率降低的幅度大;分析曲线的变化趋势可知:当ph为4.8时,游离孢子和固定化凝胶珠的转化率均最高,ph高于或低于4.8时,游离孢子的转化率降低的幅度较固定化凝胶珠的转化率降低的幅度大。可见,研究ph和温度对葡萄糖苷酶活性影响时,温度和ph应分别控制为30(3040)、4.8。与游离孢子相比,固定化凝胶珠中-葡萄糖苷酶的ph适宜范围增大,热稳定性提高。32高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示(1)进行过程的目的是 (2)、号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节ph的先后顺序是 (3)部分嗜热菌在号培养基上生长时可释放 分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈大的菌落,接种到号培养基(4)从用途上来说,号培养基属于 培养基,仅以淀粉作为 源【答案】(1)稀释(2)先调节ph,后灭菌(3)淀粉酶(4)选择 (唯一)碳【解析】试题分析:据图分析:过程是梯度稀释,过程是稀释涂布平板法接种,目的是筛选单菌落从功能上看,号培养基属于选择培养基,从物理状态上来说号培养基属于固体培养基采用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌解:(1)据图分析,过程称为梯度稀释过程(2)培养基制作完成后要调整ph,再灭菌(3)图中,经稀释涂布平板法接种培养后,部分嗜热菌在号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈(4)号培养基按功能分称为选择培养基;该实验的目的是筛选耐高温的淀粉分解菌,需要使用一淀粉为唯一碳源的选择培养基故答案为:(1)稀释(2)先调节ph,后灭菌(3)淀粉酶(4)选择 (唯一)碳考点:微生物的分离和培养33(12分)有如图所示的探究性实验装置共6个,6个装置中分别加入葡萄糖饱和溶液和两个凝胶珠,实验开始时,小液滴都在c点(刻度管足够长,瓶内氧气充足)。6个装置分别置于0 、15 、25 、35 、45 、55 温度下,10 min后记录各个装置中的小液滴位置,并描绘出坐标曲线图(如甲曲线)。(1)实验目的是_。自变量是_。(2)瓶中氢氧化钠溶液的作用是_,小液滴移动的距离表示_。(3)实践上如果通过固定化醋酸菌生产醋酸,那么制备的凝胶珠大小与固定化酵母菌生产酒精相比,应该注意什么问题?为什么?_。(4)如果制备固定化醋酸菌细胞实验中,海藻酸钠浓度过低,请在坐标图中画出实验开始10 min后的曲线乙。(5)工业生产中利用固定化细胞技术进行生产,从哪些方面可以达到延长利用固定化细胞的时间(至少两点)?_。【答案】(1)探究温度与醋酸菌发酵速率之间的关系 温度(2)吸收co2,防止产生的醋酸挥发影响实验结果的准确性 有氧呼吸消耗的氧气量(3)注意固定化醋酸菌的凝胶珠要小一些。因为醋酸菌发酵生产醋酸是一个有氧呼吸的过程,凝胶珠小有利于氧气的供应,增加醋酸产量(4)如图所示(5)无菌操作,控制好温度、ph【解析】该题通过考查酶的应用(固定化细胞技术)、发酵、酶促反应的速率和温度之间的关系,能够全面地考查学生的生物技术实践能力。其中酶的应用(固定化细胞技术)是新考纲中的新内容,应该引起足够重视。小液滴在细管中的移动距离表示有氧呼吸消耗的氧气量;海藻酸钠浓度低会使固定化细胞的数量少,反应速率慢。34生物技术的广泛应用,给社会带来了较大的经济效益,受到社会广泛重视。请回答下列有关问题:(1)制作泡菜需要测定亚硝酸盐含量,其方法是 ;其原理是:在盐酸酸化的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生 反应后,与nl萘基乙二胺盐酸盐结合形成 ,将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(2)1995年,美国科学家mulis因发明了pcr技术而获得了诺贝尔化学奖。pcr和生物体内dna的复制都必需的条件包括dna聚合酶、模板dna、能量、游离脱氧核苷酸和 ;在生物体内dna复

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