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文档简介
分离以尿素为氮源的微生物 作业一、单选题1下列有关生物工程与技术的叙述不正确的是apcr技术可用于目的基因的获取b选择单核居中期向单核靠边期过渡的花粉进行离体培养成功率高c在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落一定是尿素分解菌d“三北防护林”建设中,应遵循协调与平衡原理和物种多样性原理【答案】c【解析】试题分析:pcr可以用于外源目的基因的大量扩增,故a正确。在花粉选择进行离体培养时应选择单核靠边期的成功率高,故b正确。在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落有可能是尿素分解菌也有可能是以氮气为主的细菌,还要加入酚红指示剂进行鉴别,故c错误。“三北防护林”建设中,应遵循协调与平衡和物种多样性原理,故d正确。考点:本题考查现代生物技术相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。2下图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是a. 培养基都应以尿素为唯一氮源b. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌c. -过程是梯度稀释,稀释溶剂是无菌水d. 可用酚红染料鉴定,菌落周围是否出现红色圈【答案】c【解析】尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解,从而能利用尿素,其它微生物不能,因此要分离纯化尿素分解菌,培养基都应以尿素为唯一氮源,a正确;对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法,b正确;-过程是梯度稀释,该过程用来选择培养尿素分解菌,因此稀释溶剂应该是含有尿素为唯一氮源的培养基,而不是无菌水,c错误;分解尿素的菌能将尿素转化成氨气,使培养基碱性增强,ph升高,酚红指示剂会变红,因此可用酚红染料鉴定,菌落周围是否出现红色圈来鉴定,d正确。3在做分离分解尿素的细菌实验时,a同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。产生a同学结果的原因可能有( ) 土样不同 培养基污染 操作失误 没有设置对照a. b. c. d. 【答案】d【解析】同一稀释浓度下菌落数不同,产生a同学结果的可能的原因可能是土样不同、培养基污染,或者操作失误,未达到相应的稀释倍数。4下列有关微生物培养与应用的说法,正确的是a. 天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基b. 接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理c. 大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段d. 分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源【答案】d【解析】天然培养基是指成分明确的培养基,a错误;接种前需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌,实验操作者的双手等进行消毒处理;b错误;大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段;c正确;分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源,尿素和葡萄糖是碳源;d错误【考点定位】 微生物的分离和培养;以尿素为氮源,测定能生长的细菌的数量【名师点睛】1、培养基按成分分为天然培养基和合成培养基2、微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染,故实验室培养时需严格无菌操作,对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌,接种环用灼烧灭菌,实验者的双手用酒精擦拭消毒处理3、微生物的纯培养包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段4、要分离某种微生物,必须在特定的条件下进行,利用选择培养基进行培养5下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法,错误的是a平板划线法只能用于微生物的分离,不能用于计数b牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落c如果得到了3个或3个以上菌落数目在30300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数d测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素细菌的数量,选用的稀释范围不同【答案】b【解析】平板划线法只能用于微生物的分离,不能用于计数,a正确;牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目应该明显多于选择培养基的数目,b错误;如果得到了3个或3个以上菌落数目在30300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,c正确;测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素细菌的数量,选用的稀释范围不同,d正确。【考点定位】 微生物的分离与计数6某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理,下列相关实验过程正确的是( )a培养基分装到培养皿后进行灭菌b接种前需灼烧接种环并冷却c接种后的培养皿需放在光照培养箱中培养d培养过程中每隔一周观察一次【答案】b【解析】试题分析:分装前要对培养基和培养皿分别进行灭菌,a错误;接种前需灼烧接种环并冷却,然后蘸取菌种进行接种,b正确;接种后的培养皿需放恒温箱中培养,c错误;培养过程中不观察,培养结束后取出观察,d错误。考点:本题考查微生物培养的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。7请选出下列正确的操作步骤( )土壤取样称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中吸取0.1ml进行平板涂布依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度【答案】c【解析】试题分析:土壤取样溶解梯度稀释涂布平板,故c正确。考点:稀释涂布平板法是微生物实验室分离的重要方法,考生需要识记相关操作过程,做到心中有数。8某些土壤细菌可将尿素(ch4n2o)分解为co2和nh3供植物吸收和利用,但分解产物co2不能为该菌提供营养。下列关于配置分离这一菌种的选择培养基的成分符合要求的是a. 仅尿素 b. 尿素+葡萄糖 c. 仅葡萄糖 d. 牛肉膏蛋白胨【答案】b【解析】从土壤中分离筛选能分解尿素的细菌时,其培养基中应以尿素为唯一氮源,此外还应有提供碳源的葡萄糖等营养成分;牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素。综上分析,b正确,a、c、d均错误。9用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为104的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是( )a涂布了1个平板,统计的菌落数是230b涂布了2个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238c涂布了3个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163d涂布了3个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233【答案】d【解析】试题分析:检测土壤中细菌总数,可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时,在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板,选择菌落数在30300的进行记数,求起平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数解:用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时,在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板,确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的进行记数,求起平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数故选:d考点:测定某种微生物的数量10下列关于分离技术或方法的叙述,错误的是a.将细胞匀浆放入离心管中进行差速离心可分离各种细胞器b.用含有刚果红的培养基可分离出能分解尿素的微生物c.利用dna和其它杂质在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同的特性分离出dnad.使用凝胶色谱法可以分离不同相对分子质量的蛋白质【答案】b【解析】试题分析:分离各种细胞器的常用方法是差速离心法,a项正确;加入酚红指示剂可用来鉴定分解尿素的细菌,b项错误;利用dna和蛋白质等其它成分在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同,利用这一特性,选择适当的盐浓度可分离出dna,c项正确;凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,d项正确。考点:本题考查分离细胞器的方法、微生物的培养与应用、dna和蛋白质技术的相关知识,意在考查学生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。11下列有关微生物的叙述正确的是( )a不同的微生物对营养物质的需要不完全相同b以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的c检验某培养基具有选择作用应在该种培养基中加入等量蒸馏水作空白对照d利用平板划线法或稀释涂布平板法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数【答案】a【解析】微生物代谢类型不同,对营养物质的需要也不完全相同,a正确;尿素分解菌的氮源是尿素,其他不能利用尿素的菌就不能生长,所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌,尿素分解菌可以将尿素分解为氨,可以使酚红指示剂变红,来鉴定该微生物,因此两者的目的不同,b错误;检验某培养基具有选择作用,应另用一个完全培养基进行对照,c错误;释涂布平板法才可以对微生物进行计数,d错误。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】1微生物的分离利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”,专门在培养基中加入该营养物质,使该微生物大量增殖这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源,如纤维素可用来富集纤维素分解微生物,尿素可用来富集尿素分解微生物。利用该分离对象对某种抑制物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物质,经培养后,由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制,而分离对象却可趁机大量增殖,使之在数量上占优势如筛选酵母菌和霉菌,在培养基中加入青霉素,因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成,从而抑制两类微生物的生长,而酵母菌和霉菌正常生长增殖。2、微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。12欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,下列实验操作中不正确的是( )a将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释b用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌c同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板d可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照【答案】b【解析】试题分析:要土壤中分离出能分解尿素的细菌,可先将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释,a正确;用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解纤维素的细菌,用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌,b错误;同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板,计数时取其平均值,c正确;可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照,d正确。考点:本题考查分解尿素的细菌分离,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。13在做分离分解尿素的细菌实验时,a同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。a同学的结果产生原因不可能有()a. 由于土样不同 b. 由于培养基污染c. 由于操作失误 d. 没有设置对照【答案】d【解析】根据生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则分析,已知a同学的实验结果可能是培养基污染造成的,还可能是a同学实验操作过程中污染造成的,也可能是与其他同学所取土壤样品不同造成的,关键是设法排除影响结果的因素,所以实验应该设计对照组,但是实验结果的出现并不是没有设置对照组导致的。所以d选项是正确的14若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为80,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 ml,稀释液的稀释倍数为106,则每克样品中的活菌数约为()a. 8108 b. 8107 c. 8105 d. 8106【答案】a【解析】根据每克样品中的菌株数=(cv)m,1克土样中的菌株数=(800.1)106=8108个,所以a选项是正确的。15产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )a. 一个细菌、液体培养基 b. 许多细菌、液体培养基c. 一个细菌、固体培养基 d. 许多细菌、固体培养基【答案】c【解析】菌落是一个细菌的子细胞群体,在固体培养基上,有一定的形态结构,肉眼可见(液体培养基中肉眼不可见),菌落可作为菌种鉴别的重要依据。16下列叙述正确的是a果醋制作时需要经过先通气发酵后密封发酵两个主要阶段b对细菌分离和计数时,划线法、稀释涂布平板法都可以c凝胶色谱法分离血红蛋白时,首先收集到的物质的分子量较血红蛋白小d稀释涂布平板法测定土壤浸出液中活菌数目时,测定值可能比实际值小【答案】d【解析】试题分析:制作果醋的菌种是醋酸杆菌,是好氧菌,需要一直通气,a错误;平板划线法是用于分离菌落的,稀释涂布平板法是用于计数的,b错误;凝胶色谱法分离血红蛋白时,首先收集到的物质的分子量较血红蛋白大,c错误;稀释涂布平板法测定土壤浸出液中活菌数目时,测定值可能比实际值小,d正确。考点:本题主要考查生物技术的相关知识,意在考查考生对相关知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。17下列有关微生物筛选的叙述中,不正确的是a. 利用高温条件筛选耐热的taq细菌b. 加入高浓度食盐可以筛选出金黄色葡萄球菌c. 含酚红的尿素培养基初步鉴别出分解尿素的细菌d. 筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质【答案】d【解析】耐热的taq细菌可以生存在高温环境中,所以可以利用高温条件筛选耐热的taq细菌,a正确;金黄色葡萄球能够生活在高渗环境下,利用添加高浓度食盐的培养基可实现对金黄色葡萄球菌的筛选,b正确;尿素分解菌可以将尿素分解成氨使酚红指示剂呈红色,c正确;筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源,也要加其他营养物质,d错误。18下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )a利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数b接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落c以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌d用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少【答案】a【解析】试题分析:稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数,在稀释涂布平板法计数时,选择“菌落数在30-300的实验组平板进行计数”以减少实验误差,a错误;接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落,b正确;尿素分解菌的氮源是尿素,其他不能利用尿素的菌就不能生长,所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌,尿素分解菌可以将尿素分解为氨,可以使酚红指示剂变红,故c正确;大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少,d正确考点:微生物的分离和培养;微生物的利用【名师点睛】 1微生物的分离利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”,专门在培养基中加入该营养物质,使该微生物大量增殖这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源,如纤维素可用来富集纤维素分解微生物,尿素可用来富集尿素分解微生物利用该分离对象对某种抑制物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物质,经培养后,由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制,而分离对象却可趁机大量增殖,使之在数量上占优势如筛选酵母菌和霉菌,在培养基中加入青霉素,因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成,从而抑制两类微生物的生长,而酵母菌和霉菌正常生长增殖2、接种方法平板划线法和稀释涂布平板法3、计数方法显微镜直接计数和稀释涂布平板法19可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()a. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂b. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂c. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂d. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂【答案】a【解析】在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的ph升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。综上所述,a项正确,b、c、d三项均错误。20下列关于统计菌落数目的方法的叙述,不正确的是( )a采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数b当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落c平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌,但前者不能用来计数d在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果【答案】a【解析】试题分析:a、采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的,所以往往少于实际的活菌数,a不正确;b、当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落,b正确;c、平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌,但前者不能用来计数,c正确;d、在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果以减小实验误差,d正确考点:菌落数目的统计二、非选择题21在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中,配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用_方法灭菌,冷却后加入用g6玻璃纱漏斗过滤的尿素溶液。玻璃纱漏斗角后需用适宜浓度的_浸泡,再用_冲洗,干燥后保存。【答案】 高压蒸汽灭菌 hcl 蒸馏水【解析】试题分析:消毒和灭菌:根据以上分析可知,微生物的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌;玻璃纱漏斗角后需用适宜浓度的hcl浸泡,再用蒸馏水冲洗,干燥后保存。22幽门螺旋菌(hp)感染是急慢性胃炎和消
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