浙科版选修1 第一部分 第1课时 大肠杆菌的培养和分离 课件（62张）.pptx

第1课时大肠杆菌的培养和分离 第一部分微生物的利用 选修1生物技术实践 一 微生物培养的基本条件 二 细菌的培养与分离 达标检测 内容索引 一 微生物培养的基本条件 2 分类 病毒界 放线菌蓝细菌 生物界 真菌界原生动物原生植物 原生生物界 1 微生物 1 特点 简单 形体的单细胞 多细胞或没有的低等生物 新知导学 结构 微小 细胞结构 病毒 细菌 原核 真菌 3 用途 许多种来源于放线菌和霉菌 酒由发酵产生 由红曲霉和毛霉发酵制成 微生物能用于治理 在新能源领域也将发挥巨大作用 抗生素 酵母 腐乳 环境污染 2 培养基 1 概念 培养基是微生物生存的环境和 2 分类 培养基按物理性质常可分为和 一般都含有水 氮源和无机盐四类营养物质 另外还需满足微生物生长对ph 特殊营养物质和氧气的要求 通常细菌培养基要用和 来配制 还要加入一定量的氯化钠以维持一定的 霉菌培养基一般用配制或添加的豆芽汁即可 3 酸碱性 细菌通常要求在的环境中生长 霉菌要求在 的环境中生长 因此 在制备培养基时需调节培养基的酸碱度 营养物质 固体培养基 液体培养基 碳源 蛋白胨 酵母 提取物 渗透压 无机物 蔗糖 中性偏碱 中性偏 酸 有关培养微生物所需营养的三点提醒 1 不同微生物对营养的需求不同 所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同 2 对异养微生物来说 含c h o n的有机物既是碳源又是氮源 能源 3 培养微生物时营养物质要协调 营养物质过少不能满足微生物的营养需要 过多对微生物的生长有抑制作用 3 灭菌操作 1 常见灭菌方法 对于培养皿 试管 三角瓶 镊子等常采用法灭菌 对于不能加热灭菌的化合物 如尿素等 只能用过滤 但玻璃砂漏斗使用前也要在121 下用纸包好灭菌 实验操作过程中 一般采用的方法对接种环进行灭菌 高压蒸汽灭菌 g6玻璃砂漏斗 灼烧 2 高压蒸汽灭菌操作的要求 灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好 在 下灭菌15min 实验过程中不能用 因为其易吸水 吸水后容易引起污染 如培养基中有 为防止其分解碳化 要用g cm2压力 90 以上 灭菌30min 121 脱脂棉 葡萄糖 500 探究1 图示解读结合所学知识 完成下图横线上大肠杆菌的结构名称 然后思考 互动探究 核糖体 荚膜 细胞壁 类核区 dna 鞭毛 1 大肠杆菌与酵母菌相比 在结构上最主要的区别是什么 答案 答案大肠杆菌是原核生物 与酵母菌相比 最主要的区别是没有由核膜包被的细胞核 2 大肠杆菌是革兰氏性 的肠道杆菌 在肠道中一般对人 但也有一些菌株对人体是的 可以侵袭并产生 但是 任何大肠杆菌如果进入人的系统 都会对人体产生危害 3 应用 大肠杆菌是技术中被广泛采用的工具 阴 兼性厌氧 有害 肠黏膜 毒素 无害 泌尿 基因工程 探究2 归纳概括1 培养基的成分 2 培养基的类型 探究3 比较异同1 比较消毒和灭菌的不同之处 2 几种消毒和灭菌方法及其适用范围 煮沸消毒 巴氏消毒 紫外线 接种工具 试管口 干热灭菌 耐高温 高压蒸汽灭菌 1 灭菌与消毒的原理是相同的 仅仅是作用的条件不同 抑菌和灭菌的程度不同 2 对培养基ph的调节 需在灭菌之前进行 例1 2017 绍兴高二月考 下列有关大肠杆菌的叙述 正确的是a 大肠杆菌细胞内的dna全部位于拟核区b 大肠杆菌是原核生物 属于兼性厌氧菌c 大肠杆菌的细胞壁与植物细胞的细胞壁的结构 功能非常相近d 大肠杆菌对人类无害 答案 解析 解析大肠杆菌是原核生物 属于兼性厌氧菌 b项正确 大肠杆菌的小型环状dna分子 质粒 位于细胞质中 a项错误 大肠杆菌的细胞壁的成分和功能与植物细胞的细胞壁不同 c项错误 任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统 都会对人体产生危害 d项错误 例2 2017 温州高二检测 下列关于灭菌的叙述 正确的是a 用于细菌等微生物培养的培养基都必须用高压蒸汽灭菌锅灭菌b 锥形瓶 培养皿 移液管等器具的高压蒸汽灭菌时间一般为15min 121 条件下 c 超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min即可d 灭菌后的培养基 器具就已经达到了完全无菌 答案 解析 解析培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌 若培养基中有碳酸氢钠 尿素等高温易分解的成分 就不能用此方法 a项错误 超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min 同时还需打开过滤风 c项错误 灭菌后的培养基 器具不一定达到了完全无菌 而且要防止二次污染 d项错误 三种常用灭菌方法的比较 二 细菌的培养与分离 1 细菌的培养 1 繁殖方式 细菌以的方式繁殖 分裂速度很快 约分裂一次 2 人们在培养细菌时 需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中 一般用转移带菌的培养物 大肠杆菌的培养和分离实验中采用扩大培养大肠杆菌 新知导学 分裂 20min 接种环 lb液体培养基 2 细菌的分离方法 1 划线分离法 通过在固体培养基表面连续的操作 由于划线过程中 接种环上的菌液逐渐减少 因此划线的细菌间距离加大 经过培养可获得 2 涂布分离法 用此法分离时 需要先将培养的菌液 通常稀释10 5 10 7倍 取ml稀释度不同的菌液 加在培养皿的培养基上 用涂布在培养基平面上 然后进行培养 通常以每个培养皿中有个以内的单菌落最为合适 3 两种分离法的比较 分离法 方法简单 分离法 单菌落更易分开 但操作复杂些 接种环 划线 最后部分 单菌落 稀释 0 1 固体 玻璃刮刀 20 划线 涂布 3 大肠杆菌的培养和分离 1 实验内容 将大肠杆菌扩大培养和划线分离 即用培养基扩大培养大肠杆菌 培养后再在培养基上划线进行分离 随后培养基上就会形成一个个单独的菌落 lb液体 lb固体平面 2 实验步骤 高压蒸 汽 倒平板 接种 三角瓶 连续划线 单个菌落 单菌落 划线 4 探究1 图示解读固体培养基经高压蒸汽灭菌后 待培养基冷却到60 时 需搁置斜面 图甲 或倒平板 图乙 请回答下列问题 互动探究 1 如何确定制备的培养基灭菌是否合格 答案将未接种的培养基在适宜的温度下放置一定时间 观察培养基上是否有菌产生 2 在固体培养基凝固前搁置斜面的目的是什么 答案增大接种面积 3 平板冷凝后 为什么要将平板倒置 答案平板冷凝后 皿盖上会凝结水珠 凝固后的培养基表面的湿度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 答案 1 请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程 2 甲 乙 丙中的灭菌方法是 3 丁中的操作需要等待才能进行 4 观察甲 乙 丙 丁四幅图 熟悉倒平板的操作流程 请填空 灼烧灭菌 丙 乙 甲 丁 平板冷却凝固 探究2 科学探究1 平板划线及培养结果接种环在固体培养基表面连续划线 将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面 下图为平板划线示意图 a 及培养后菌落分布示意图 b 1 a图中 填图中序号 区域为起始处 在图中 填图中字母 区域更易获得单菌落 a b 每一次划线后都要将接种环灼烧 除第一次划线外 每一次划线的起点都是第一次划线的末端 2 下图中甲为划线分离法中最重要的环节 乙为操作的结果 判断下列正误 2 划线分离的注意事项 1 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环 2 灼烧接种环 待其冷却后才能伸入菌液 以免温度太高杀死菌种 3 划线时 只能蘸取一次菌液 每次划线以上次划线的末端为起点 划线最后一区不要与第一区相连 4 划线用力大小要适当 防止用力过大将培养基划破 划线分离过程中每次灼烧接种环的目的不同 探究3 科学探究1 涂布分离法用涂布分离法分离细菌时 需要先将培养的菌液稀释 通常稀释10 5 10 7倍 取0 1ml稀释度不同的菌液 加在培养皿的固体培养基上 用玻璃刮刀涂布在培养基平面上 然后进行培养 涂布操作如图所示 a 将浸在盛有酒精的烧杯中 b 取不超过0 1ml的 滴加到培养基表面 c 将蘸有少量酒精的玻璃刮刀在火焰上引燃 待酒精燃尽后 冷却8 10s d 用玻璃刮刀将菌液均匀地涂布在培养基表面 涂布时可转动培养皿 使菌液分布均匀 玻璃刮刀 菌液 2 两种分离方法的比较如图是采用分离微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图 请思考并回答下列问题 1 获得图a效果和图b效果的接种方法分别是什么 答案获得图a效果的接种方法为涂布分离法 获得图b效果的接种方法为划线分离法 答案 2 某同学在分离土壤中的细菌时 发现培养基上的菌落连成了一片 最可能的原因是什么 应当怎样操作才可避免此种现象 答案最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌 应采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌 答案 a 接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌b 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落c 接种过程中至少需要对接种环灼烧5次d 甲中a区域为划线的起始位置 例3 2017 浙江效实中学检测 在分离 纯化大肠杆菌实验中 划线接种 甲 培养结果 乙 如图所示 有关叙述错误的是 答案 解析 解析培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌 a项正确 菌液经过连续划线 菌液中的菌体越来越少 最后容易形成单菌落 b项正确 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌 因此按照图中划线顺序 d c b a 整个划线过程中至少需要对接种环灼烧5次 c项正确 每次划线的菌种来自上一区域的末端 因此划线的起始区域菌落多 由图乙可知 甲中d区域菌落多 为划线的起始位置 d项错误 1 图甲是利用法进行微生物接种 图乙是利用法进行微生物接种 解析分析图示可知 图甲为用划线分离法进行微生物接种 图乙是利用涂布分离法进行微生物接种 例4 2017 嘉兴高二检测 图甲 图乙是微生物接种常用的两种方法 请回答相关问题 答案 解析 划线分离 涂布分离 2 这两种方法所用的接种工具分别是和 对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒 解析前者利用的工具是接种环或接种针 后者利用的工具是玻璃刮刀 对于接种环而言 灭菌的操作方法是灼烧 玻璃刮刀通常浸泡在70 的酒精中消毒 答案 解析 接种环 或接种针 玻璃刮刀 灼烧灭菌 3 下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解 其接种方法是 填 图甲 或 图乙 解析题图中 菌落均匀分布 分离效果较好 是涂布分离法操作的结果 答案 解析 图乙 4 下列关于微生物培养和分离的叙述不正确的是 a 利用图乙所示接种法可以分离微生物但不能对微生物进行计数b 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落c 利用图甲所示接种法接种过程中 每次划线前后都要对接种环进行灭菌d 图乙所示接种法中使用的接种工具须保存在70 的酒精中 解析采用涂布分离法 可以通过培养基表面的菌落数 对微生物进行计数 但采用该方法计数通常比实际菌落数偏低 a项错误 答案 解析 划线分离与涂布分离的比较 灭菌 划线分离 涂布分离 学习小结 达标检测 1 2017 杭州高二检测 下列有关大肠杆菌培养 分离的叙述中 错误的是a 用lb液体培养基扩大培养大肠杆菌 再在lb固体培养基的平板上划线分离b lb液体培养基与lb固体培养基成分的差异是有无琼脂c 实验时要设置空白对照实验d 获得大肠杆菌的单细胞形成的菌落 只能用划线分离法分离 答案 解析 解析获得大肠杆菌的单细胞菌落常用的方法有划线分离法和涂布分离法 1 2 3 4 5 a 步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行b 步骤 中 待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖c 步骤 中 每次划线前都需对接种环进行灼烧处理d 划线接种结束后 将图 平板倒置后放入培养箱中培养 2 如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤 下列说法错误的是 答案 解析 1 2 3 4 5 解析由图可知 步骤 是倒平板 步骤 是用接种环蘸取菌液 步骤 是进行平板划线 步骤 是培养 步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 防止被杂菌污染 a项正确 倒完平板后应立即盖上培养皿盖 冷却后将平板倒过来放置 b项错误 每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 使下一次划线时 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端 从而通过划线次数的增加 使每次划线时菌种的数目逐渐减少 以便得到单菌落 c项正确 划线接种结束后 将平板倒置后放入培养箱中培养 有利于培养基表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染 d项正确 1 2 3 4 5 3 2017 浙江余姚期末 下列关于微生物的培养和分离的叙述中 不正确的是a 细菌能在液体培养基中以分裂方式迅速扩增b 噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖c 灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌d 涂布分离法分散细菌得到单菌落的效果更好 解析噬菌体属于病毒 营寄生生活 不能在蛋白胨培养基中增殖 答案 解析 1 2 3 4 5 4 在划线分离法操作中 错误的是a 将接种环放在酒精灯火焰上灼烧 直到接种环烧红b 将烧红的接种环在酒精灯火焰旁边冷却c 接种环在平板上的划线位置是随机的d 在蘸取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰 解析接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰 其目的是为了防止杂菌污染 将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种 因此a b d都是正确的 在平板上划线时 要划三至五条平行线 而不是随机划线 因此c选项错误 答案 解析 1 2 3 4 5 5 2017 萧山中学联考 微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节 下图甲 乙 丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图 请据图回答有关问题 1 2 3 4 5 1 下图甲所示的是制备固体培养基时的实验操