「细胞培养技术【学习资料】」.ppt

细胞培养技术 冯晓桃广西中医药科学实验中心 1 学习资料 一 细胞培养概念 从机体内取出组织或细胞 在体外模拟体内的生理环境 在无菌 适当温度和一定营养条件下进行孵育培养 使之生存 生长 并维持其结构和功能的方法 2 学习资料 细胞培养特点 1 条件可控 研究影响因素2 体外 可用各种手段研究3 长期 遗传性状4 大量提供条件相同的细胞 3 学习资料 细胞培养目的和作用 1 科学研究药物研究与开发新药筛选 如化学合成药物药效研究 中药有效成分筛选与鉴定等 疫苗研究与开发 如病毒性疫苗的研究与开发 肝炎病毒疫苗 艾滋病疫苗等 肿瘤疫苗 多肽疫苗 等 基因工程药物研究与开发 如干扰素研究与开发 细胞生长因子研究与开发等 细胞工程药物研究与开发 生物活性多肽研究与开发 人参皂甙 紫杉醇等生物活性成分研究与开发 单克隆抗体制备 包括诊断用单克隆抗体 治疗用单克隆抗体 4 学习资料 细胞培养目的和作用 基础研究 1 药物作用机理 2 基因功能 3 疾病发生机理 2 生物制药疫苗生产 如病毒性疫苗 肝炎病毒疫苗 艾滋病疫苗等 肿瘤疫苗 多肽疫苗 等 基因工程药物生产 如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素 粒细胞生长因子 胸腺肽等 诊断用和药用单克隆抗体生产 细胞工程药物生产 生物细胞内的一些生物活性多肽 生物活性物质等 5 学习资料 二 培养细胞相关条件 一 实验室准备1 无菌操作实验室无菌操作间 缓冲间 更衣室等 2 生物安全柜 超净工作台 生物安全柜是为操作原代培养物 菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时 用来保护操作者本人 实验室环境以及实验材料 使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的 6 学习资料 二 培养细胞相关条件 生物安全柜分类一级 可保护工作人员和环境而不保护样品 目前已很少用 二级 提供工作人员 环境和产品的保护 A A1和A2 B B1和B2 三级 生物安全3 4级实验室用 7 学习资料 生物安全柜 ESCOAC2 4S1 8 学习资料 生物安全柜 9 学习资料 三级生物安全柜 10 学习资料 3 相关仪器设备 1 CO2培养箱 2 倒置显微镜 普通显微镜及照相系统 3 冰箱 4度 20度 80度 4 超纯水系统 电阻率 18 2M cm 5 细胞存储器 液氮罐 深低温冰箱 80度冰箱 6 高温高压灭菌装置 清洗装置 7 滤菌相关仪器 针式滤器 泵加压过滤 8 离心机 天平 pH仪 移液枪等 二 培养细胞相关条件 11 学习资料 二 培养用品 1 培养瓶 25 75cm3 培养板 96 48 24 12 6孔 培养皿 各种直径规格 二 培养细胞相关条件 12 学习资料 二 培养用品 2 离心管 15 50ml 3 移液管 吸管 4 冻存管 EP管 5 试剂瓶等 二 培养细胞相关条件 13 学习资料 三 细胞培养用试剂 1 培养基MEM DMEM RPMI16404 保存 避免光照 用前放在37 温热 二 培养细胞相关条件 14 学习资料 三 细胞培养用试剂 1 培养基水无机盐氨基酸维生素其他成分 葡萄糖 酚红 HEPES 丙酮酸钠 二 培养细胞相关条件 15 学习资料 16 学习资料 17 学习资料 三 细胞培养用试剂 1 培养基培