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组织切片的心得范文 石蜡切片心得 1、固定具有凝固或沉淀组织蛋白的作用，因此能抑制酵解酶类的活动和细菌的繁殖，从而呈现对组织的固定作用 （1）10%福尔马林液1份甲醛液+9份蒸馏水市场上出售的甲醛液约含37-40%的甲醛，10%福尔马林液实际上仅含3.7-4.0%的甲醛适用范围各种组织。 但是经10%福尔马林液固定的组织，细胞核染色较好，而细胞质染色较差处理组织块一般固定24h以上，长时间亦可，甚至可用来长期保存组织块。 短时间固定的组织块不需水洗，可直接转入70%酒精脱水 （2）Bouin氏液苦味酸饱和水溶液（1.22%）75ml甲醛液25ml冰醋酸5ml适用范围各种动物组织及植物组织的根尖，是动物组织良好的固定液处理固定24h，也可在此液长期保存。 流水冲洗或不经水洗直接入70%酒精脱水。 2、冲洗材料自固定液中取出后，需立即冲洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨碍染色有些固定液，如10%福尔马林液、Bouin氏液固定的材料，若时间较短的话可不必冲洗。 但时间过长亦需冲洗 3、脱水（37度恒温箱）所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入，这一过程称为脱水。 脱水是否彻底，直接关系到组织是否能充分透明脱水过度（原因是组织在纯酒精内时间过久，发生组织质地发生变化）容易造成组织发脆。 造成组织发脆的原因还有加温（温度超过36）、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡中二甲苯过多等等。 一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关，而忽视了与低浓度的酒精关系，其实低浓度的酒精具有强大的穿透力，比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水，组织如果在低浓度酒精里充分脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此，仅需短时间就可完成，如果这时不缩短纯酒精的时间，便会引起组织发脆；如果脱水时加温，使用丙酮，还可引起组织收缩，并影响免疫组织化学的标记。 4、透明（56-60度恒温箱）为了使石蜡浸入到组织块内，必须经过一种既能与脱水剂混合，又能与石蜡相溶的媒介物质，这个过程称透明。 目前最好的透明剂是二甲苯，在常温下，如果不是时间过长（超过4小时以上）二甲苯并不会引起组织过份发脆，相反会使某些组织结构比较质韧的组织比如子宫肌瘤等相当好切），但是当二甲苯温度超过40以后，极易引起组织发脆。 5、透蜡（56-60度恒温箱中）（4-5步骤）80%酒精（1h）95%酒精（1h）100%酒精 （1） （2）（45-100min）1/2二甲苯+1/2酒精（30min）二甲苯（35min+30min）1/2二甲
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