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专题二 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 随堂基础巩固1下列关于土壤取样的叙述,错误的是()a土壤取样时,应选取肥沃、湿润的土壤b先铲去表层土3 cm左右,再取样c取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌d应在酒精灯火焰旁称取土壤解析:选c在“分解尿素的细菌的分离与计数”实验中,必须在含微生物丰富的湿润、肥沃土壤中取样,所用小铁铲和信封必须灭菌。2测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释液,其原因是()a细菌个体小,真菌个体大b细菌易稀释,真菌不易稀释c细菌在土壤中的含量比真菌高d随机的,没有原因解析:选c细菌在土壤中的含量多于真菌,因此稀释涂 布时,细菌的稀释倍数要大于真菌的稀释倍数,这样才能 使平板上培养出的菌落清晰易辨。3下列属于菌落特征的是() 菌落的形状菌落的大小菌落的多少隆起 程度颜色有无荚膜abc d解析:选b菌落特征包括菌落的形状、大小、隆起程度 和颜色等。4下列能分离出分解尿素的细菌的培养基是()akh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、尿素、琼脂、水bkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、琼脂、水ckh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、尿素、琼脂、水dkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析:选a要想分离尿素分解菌,应把尿素作为培养基中的唯一氮源,而b项中无氮源,c项中无碳源,d项中牛肉膏、蛋白胨都可作为氮源。5用来判断选择培养基是否起到了选择作用,需要设置的对照是()a未接种的选择培养基b未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d接种了的选择培养基解析:选c将菌液稀释相同的倍数并接种,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目,因此,应选择接种菌种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则是单一变量原则。6某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别为2 760、295和16,则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 ml)()a2.76104个/ml b2.95105个/mlc4.6104个/ml d3.755104个/ml解析:选b菌落计数法是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30300之间的平板,以该平均菌落数与体积之比乘以稀释倍数即为该样品的细菌总数。若所有稀释倍数的菌落数均不在30300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数进行计算。7下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题: 实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。 材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9 ml无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布 器、无菌培养皿、盛有90 ml无菌水的锥形瓶、恒温箱。(1)方法步骤:倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在_操作。制备土壤稀释液:取土样10 g加入盛有90 ml无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 ml,转至盛有9 ml的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。涂布:按照由107103稀释度的顺序分别吸取0.1 ml进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布_个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布_个平板。培养:放入恒温箱内,在2830 下培养34 d。细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在_的平板进行计数。如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是_。(稀释度是105)(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数_(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是_。解析:(1)在酒精灯火焰旁倒平板,可以避免杂菌的污染。为了保证实验结果准确,一般设置35个平板,选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值,则每克样品中的菌株数为(500.1)1055107个。(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,以消除无关变量对实验结果的影响,该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存

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