人教版选修1血红蛋白的提取与分离 作业.docx

血红蛋白的提取与分离一、单选题1下列关于dna和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是（ ）a. 可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到dna和蛋白质b. 用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna可除去部分杂质c. 透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜d. 凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法【答案】a【解析】猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出dna。2在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡存在的原因是a. 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果b. 气泡阻碍蛋白质的运动c. 气泡能与蛋白质发生化学反应d. 气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密【答案】a【解析】装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则其会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而影响分离效果，a正确，b、c、d均错误。3利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是( )a蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小b蛋白质相对分子质量的大小c蛋白质所带电荷的多少d蛋白质溶解度的大小【答案】b【解析】试题分析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。考点：本题主要考查凝胶色谱法的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。4以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是a. 红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水，重复洗涤三次b. 将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9的nacl溶液透析12小时c. 凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在d. 蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢【答案】c【解析】红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水，缓慢搅拌，低速短时离心，如此并重复洗涤3次，目的是除去杂蛋白，a错误；透析时使用物质的量浓度为20mmol/l的磷酸缓冲液，而不是用0.9%的nacl溶液，b错误；在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，c正确；蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的在凝胶外部移动，移动速度快，d错误。5红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是a.血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理粗分离纯化纯度鉴定”的顺序进行b.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液c.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质d.可经sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定【答案】b【解析】试题分析：凝胶应用蒸馏水充分溶胀来配制凝胶悬浮液，b错误。考点：本题考查蛋白质的提取和分离。6将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ ）a.无色透明的甲苯层 b.脂溶性物质的沉淀层c.血红蛋白的水溶液 d.其他杂质的暗红色沉淀物【答案】c【解析】试题分析：第1层是无色透明的甲苯层，第2层是白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层，第3层是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物，故c正确。考点：本题考查血红蛋白的提取和分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记掌握程度。77下面说法不正确的是（ ）a. 在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响，维持ph基本不变b. 缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成c. 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程d. 透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内【答案】d【解析】试题分析：缓冲溶液通常有一种弱酸和一种相应的强碱盐组成，能对酸性物质和碱性物质起到一定的中和作用，但其调节能力有一定的限度，a项正确；缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成，b项正确；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，c项正确；透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，d项错误。考点：本题考查缓冲溶液、电泳和透析的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。8血红蛋白提取分离实验中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，长时高速离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中从上向下数第3层是a血红蛋白的水溶液 b无色透明的甲苯层c脂溶性物质的沉淀层 d其他杂质的暗红色沉淀物【答案】a【解析】试题分析：血红蛋白的分离结果是：从上向下依次是有机溶剂、脂溶性物质、血红蛋白的水溶液和其他杂质的暗红色沉淀物，故a正确。考点：本题主要考查蛋白质的分离实验，意在考查考生能理解所学知识要点的能力。9下列关于蛋白质提取的措施中，不正确的是( )。a酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取b水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取c脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取d碱性蛋白质可用强酸性溶液提取【答案】d【解析】提取蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂后，使蛋白质溶于试剂中而提取蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。10可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有a分离各种细胞器 bdna的粗提取c分离并纯化血红蛋白 d进行细胞培养【答案】c【解析】试题分析：哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器，不能用来分离各种细胞器，a项错误；哺乳动物成熟的红细胞没有dna，不能用于dna的粗提取，b项错误；哺乳动物成熟的红细胞含有血红蛋白，可以用来分离并纯化血红蛋白，c项正确；哺乳动物成熟的红细胞没有分裂能力，不能制成细胞悬浮液进行细胞培养，d项错误。考点：本题考查哺乳动物成熟的红细胞的组成成分和结构、细胞增殖的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，运用所学知识做出准确判断的能力。11下面说法不正确的是 ()a在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响，维持ph基本不变b缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成c蛋白质通过凝胶时，相对分子量小的容易进入凝胶内部，路程较长，移动速度较慢d透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内【答案】d【解析】试题分析：当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液ph变化的作用，称为缓冲作用，这样的溶液叫做缓冲溶液，a正确；缓冲溶液是一种能在加入少量酸或碱和水时大大减低ph变动的溶液， b正确；蛋白质通过凝胶时，相对分子量小的容易进入凝胶内部，路程较长，移动速度较慢，c正确；透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，d错误。考点：本题考查有关实验的知识，意在考查考生对课本知识的掌握情况。12相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为下图中的哪一个( )。【答案】b【解析】试题分析：凝胶色谱法是根据蛋白质相对分子质量大小来分离蛋白质的。相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，移动较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，只能在凝胶外移动，路程短，移动较快。图b表示正确。考点：本题考查蛋白质分离技术凝胶色谱法的原理，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。13下列操作正确的是a. 分离红细胞时采用低速长时间离心b. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可c. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心d. 透析时要用20 mmol/l的磷酸缓冲液，透析12 h【答案】d【解析】试题分析：分离红细胞时采用低速短时间离心，a错误；红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水和甲苯，b错误；分离血红蛋白溶液是快速短时间离心，c错误；透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液，透析12h，d正确。考点：本题考查蛋白质分离的相关操作。14有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是a. 它们都是分离蛋白质的重要方法b. 它们的原理相同c. 使用凝胶色谱法需要用缓冲溶液而电泳不需要d. 以上说法都正确【答案】a【解析】试题分析：凝胶色谱法和电泳法都是分离蛋白质的重要方法，a正确；凝胶色谱法和电泳法的原理不同，凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的，而电泳法的原理：待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离，b错误；凝胶色谱法和电泳法都要用缓冲溶液来调节溶液的酸碱度，c错误；由a、b和c选项可知，b和c都错误，d错误。考点：本题考查蛋白质的提取和分离，解答本题的关键是理解和掌握凝胶色谱法和电泳法的原理，再结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。15下列叙述正确的是a果醋制作时需要经过先通气发酵后密封发酵两个主要阶段b对细菌分离和计数时，划线法、稀释涂布平板法都可以c凝胶色谱法分离血红蛋白时，首先收集到的物质的分子量较血红蛋白小d稀释涂布平板法测定土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小【答案】d【解析】试题分析：制作果醋的菌种是醋酸杆菌，是好氧菌，需要一直通气，a错误；平板划线法是用于分离菌落的，稀释涂布平板法是用于计数的，b错误；凝胶色谱法分离血红蛋白时，首先收集到的物质的分子量较血红蛋白大，c错误；稀释涂布平板法测定土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小，d正确。考点：本题主要考查生物技术的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。二、非选择题16回答有关蛋白质分离和纯化的问题（1） 要获得血清蛋白的粗制品，必须将含有柠檬酸钠的血液进行_处理，然后将_装入透析袋中除去_。（2） 要获得血红蛋白，应如何破碎红细胞？_。（3）下图为血清蛋白通过醋酸纤维薄膜的电泳图谱，你认为含量最多的蛋白质是_，含负电荷最多的球蛋白是_，相对分子质量最大的球蛋白是_。（4）电泳是目前应用最为普遍的_蛋白质的方法。【答案】 离心 上清液 小分子物质 加蒸馏水使其胀破 清蛋白 a1-球蛋白 -球蛋白 （分离）纯化【解析】试题分析：血红蛋白的提取和分离一般的一般步骤是样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，凝胶色谱法纯化蛋白质的原理是相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶柱时移动的速度不同，相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外移动，路程短，移动速度快，先被洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道，通过凝胶柱的路程长，移动速度慢，洗脱的次序靠后。（1）要获得血清蛋白的粗制品，必须将含有柠檬酸钠的血液进行离心处理，然后将上清液装入透析袋中除去小分子物质。（2）要获得血红蛋白，应加蒸馏水使红细胞胀破。（3）含量最多的蛋白质，即最宽的，是血清蛋白；a1-球蛋白离点样处最远，故含负电荷最多的球蛋白是a1-球蛋白；-球蛋白的条带最宽，故相对分子质量最大的球蛋白是-球蛋白。（4）电泳是目前应用最为普遍的（分离）纯化蛋白质的方法。【点睛】本题考查的内容比较抽象，根据图中电泳图谱中条带的宽度和距离判断不同蛋白质的含量和带电荷情况，是解答本题的关键。17材料 饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生_，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内_表示。(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：中的主要成分为_；中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。_。(3)为制备基因工程菌，可用pcr等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。pcr反应包含多次循环，每次循环包括三步：_。反应过程中打开模板dna双链的方法是_。【答案】(1)透明圈 植酸钠的消耗量(醇和磷酸的生成量)(2)小分子杂质 电泳法：根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化(3)高温变性、低温复性和中温延伸 加热【解析】(1)选择目的菌株，可采用选择培养基来操作。通过在培养基中添加特定成分，使其他微生物死亡或不能呈现特定现象来筛选。含有植酸酶基因的菌株可产生植酸酶分解培养基中的植酸钙，产生透明圈。(2)题干中的生产流程为酶纯化的过程。含酶的发酵液通过透析，即以半透膜过滤发酵液，使一些小分子物质被过滤掉，再通过电泳法或凝胶色谱法分离纯化混合的酶液，获取纯的植酸酶。18图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题：(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有_功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_。(2)甲装置中，b是血红蛋白溶液，则a是_；乙装置中，c溶液的作用是_。(3)甲装置用于_，目的是_。用乙装置分离蛋白质的方法叫_，是根据_分离蛋白质的有效方法。在操作中加样(下图)的正确顺序是_。(4)最后经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳进行_。【答案】(1)运输 防止血液凝