人教版选修1微生物的实验室培 养 作业.docx

微生物的实验室培养一、单选题1下列关于微生物培养的叙述，不正确的是a获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵b接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落c倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 d划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落【答案】d【解析】a、获得纯净培养物的关键是无菌操作,防止外来杂菌入侵;a正确.b、接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落;b正确.c、倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落，防止污染培养基;c正确.d、划线分离菌落在培养基上的分布是不均匀的,在划线的最后区域可以得到的单菌落;d错误. 【考点定位】微生物实验室培养【名师点睛】纯化细菌的方法纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤是接种。常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。本题是关于微生物实验室培养技术的题目,根据选项涉及的具体内容,梳理相关知识点,然后分析判断选项.2关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是a. 操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌b. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c. 待培养基冷却至40左右时进行倒平板d. 待平板冷却凝固约510s后将平板倒过来放置【答案】b【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，a错误；将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，b正确；待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，c正确；待平板冷却凝固约510min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，d正确。3制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，错误的是 （ ）a操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板b将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸c灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解d将培养基冷却到约50 时，在酒精灯火焰附近倒平板【答案】c【解析】试题分析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序：计算、称量、熔化、灭菌、倒平板,a正确；牛肉膏容易吸潮所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸，b正确；待培养基冷却至50，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态在酒精等附近进行倒平板，保证无菌环境；平板冷却几分钟后还需倒置。考点：本题考查培养基的制作流程。培养基的制作需要注意的事项是倒平板之前要进行灭菌。本题意在考查学生对相关知识的掌握情况。4下列关于纤维素酶的说法，错误的是 （ ）a纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分b纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖c纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁d葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖【答案】d【解析】试题分析：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种酶,即c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶，所以a正确；前两种酶可以把纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶可把纤维二糖分解成葡萄糖，所以b正确；纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁，因其成分主要是纤维素，所以c正确；不经过c1酶、cx酶的分解，葡萄糖苷酶不能把纤维素分解成葡萄糖，所以d错误。考点：本题考查纤维素酶的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。5下列有关微生物培养与应用的说法正确的是a分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源b大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段c微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的单个细菌d接种前需要对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行消毒处理【答案】b【解析】a.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源；错误。b.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段；正确。c.微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的菌落；错误。d.接种前需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌，实验操作者的双手等进行消毒处理；错误。 【考点定位】微生物的利用【名师点睛】选择培养基的制作方法(1)在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的co2制造有机物生存。(3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。(4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。【答案】c【解析】此题为常识题，1983年澳洲医师马歇尔发现，并于2005年获得诺贝尔生理医学奖，研究结果证实幽门螺旋杆菌会造成胃溃疡7含c、h、o、n的大分子化合物可以作为a异养微生物的氮源、能源b异养微生物的碳源、氮源c自养微生物的氮源、能源、碳源d异养微生物的氮源、能源、碳源【答案】d【解析】根据题干信息可知该大分子化合物含有c、h、o、n元素，可能是蛋白质类的物质，可以为异养的微生物提供碳源、氮源和能源，ab错误、d正确；自养微生物不需要碳源，c错误。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，对于自养型微生物一般使用无机碳源，对于异养型微生物要添加有机碳源。8下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是 a发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸 b发酵时常采用的培养基为液体天然培养基c从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产d当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量【答案】c【解析】略9关于生物技术的叙述，不正确的是（）a泡菜制作的过程中所利用的微生物主要是乳酸菌b植物组织培养中，培养基和外植体均要灭菌c用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌d获得纯净培养物的关键是防止外杂菌的入侵【答案】b【解析】试题分析：制泡菜要用乳酸菌，利用乳酸菌发酵产生乳酸，a正确；植物组织培养中，培养基要灭菌，外植体要用酒精等消毒，b错误；用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌，c正确；防止外杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键，d正确。考点：本题考查微生物培养与利用的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。10有关倒平板的操作错误的是a. 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上b. 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰c. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上d. 等待平板冷却凝固后需要倒过来放【答案】c【解析】倒平板操作时，将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，a正确；将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰，b正确；倒平板操作过程中，皿盖始终不能离开培养皿，c错误；等待平板冷却凝固后需要将其倒过来放置，d正确。【考点定位】倒平板的要求11下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是()a通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌b从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培养可以省略c该实验用到选择和鉴别培养基d在用刚果红染色法中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，出现透明圈的菌落即所需菌种【答案】d【解析】试题分析：刚果红能鉴别纤维素，可采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌，故a正确；从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培养可以省略，但需要进行鉴别培养，故bc正确；有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，出现透明圈的菌落不一定为所需菌种，故d错误。考点：本题主要考查微生物的筛选，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。12下列关于微生物分离和培养的有关叙述，不正确的是a分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度b测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法c提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法d分离固氮细菌，培养基中不加氮源【答案】b【解析】试题分析：分离土壤中不同的微生物，由于其种类和数量不同，要采用不同的稀释度，a正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法进行计数，b错误；提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法，c正确；分离固氮细菌，培养基中不加氮源，d正确。考点：本题考查微生物分离和培养的有关方法。13抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如下图b。分析结果，得出的结论是甲菌产生了抗生素丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长ab c d【答案】a【解析】从图b中可以看出，乙菌落在距离甲菌处不能生长，说明甲菌产生了抗生素，抑制乙菌的生长。14在划线分离操作中，错误的是()a. 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红b. 将烧红的接种环在火焰旁边冷却c. 接种环在平板上的划线位置是随机的d. 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰【答案】c【解析】将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，a正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，所以要将烧红的接种环在火焰旁边冷却，b正确；在平板划线时，要画3-5条平行线，而不是随机的，c错误；在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰，d正确。【点睛】解答本题的关键是明确在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。15下列表示细菌细胞中的一个反应程序。在这个过程中，一种氨基酸在酶的作用下产生另外的氨基酸。代表不同的氨基酸，vz代表不同的酶。所有氨基酸对生命都是必需的。原始种的细菌在培养时只要有氨基酸就能生长，而细菌变异种培养时只有在有氨基酸、时才能生长。变异种中不存在的酶是vwyzxav、wbw、ycy、zdv、z 【答案】d 【解析】本题考查对酶相关内容的综合应用。由题意可知，所有氨基酸对生命都是必需的，原始种细菌有氨基酸就能生长，说明原始种中有v、w、y、x和z五种酶，这样才符合题干要求，而变异种细菌却需要、时才能生长，说明要想让变异种内缺乏产生、的酶，但是不缺乏其他酶，故答案选d。二、非选择题16为获取可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，研究人员进行了如下实验：制备含3% nacl的固体培养基，以及含3%、5%和7% nacl以高盐度工业废水中有机物为碳源的液体培养基；将高盐度废水采用平板划线法接种只含3% nacl的固体培养基，如图一。然后置于适宜条件下培养一段时间，观察形成的菌落特征；将分离纯化后的菌株接种到固体斜面培养基上，适宜条件下培养适当时间，将试管置于4冰箱中保藏待用；取固体斜面上的菌株制成菌液，取等量菌液，分别加入到步骤中制备的3组液体培养基中摇床培养35小时，定时取样统计活菌数目。测定结果如图二所示。回答下列问题：(1)配制培养基时，灭菌、添加nacl溶液和调节ph的先后顺序是_。(2)步骤平板划线操作过程中，第一次划线前灼烧接种环的目的是防止杂菌污染，第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是_。完成图一所示操作，至少需要灼烧接种环_次。 (3)步骤中常采用 _法统计活菌数目。直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的，正确的操作是_。若每种浓度设3个重复实验，每次统计活菌数目时，需要从 _个培养基中取样。(4)由图二可知，该耐盐菌最适合处理含_（浓度）nacl的废水。用该耐盐菌处理较高盐度工业废水时，需要 _（合理措施），才能达到理想效果。【答案】 添加naci溶液、调节ph、灭菌 杀死上次划线后接种环上残留的菌种（使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端） 6 稀释涂布平板法 将培养液摇匀后取样计数 9 3% 适当延长处理时间（增大接种量）【解析】试题分析：微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kpa，温度为121的条件下，维持1530 min。（1）配制培养基的顺序为：添加nacl溶液、调节ph、灭菌。（2）平板划线操作过程中，每一次第二次及之后的几次划线前都要灼烧接种环，以杀死上次划线后接种环上残留的菌种（使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端）。每次接种前后都要对接种环进行灼烧灭菌，图一中一共划线5次，所以需要灼烧接种环6次。（3）常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法可以用活菌的计数。从静置的培养液中取样计数时，必须将培养液摇匀后取样计数。已知培养液有3个浓度，若每个浓度设计三个重复实验，则共需要设计9组实验，即每次统计活菌数目时，需要从9个培养瓶中取样。（4）由图二可知，该耐盐菌最适合处理含3%nacl的废水。用该耐盐菌处理较高盐度工业废水时，需要适当延长处理时间，才能达到理想效果。【点睛】本题的知识点是平板划线操作划线前后的灭菌及目的，平板划线法接种的结果预期，主要考查学生对平板划线法的掌握程度。17石油污染土壤的微生物修复技术以效率高、治理费用低和现场可操作性强的特点得到广泛研究和应用。回答相关问题：（1）土壤中含有分解石油的多种微生物，向多孔结构的污染土壤中通入空气，可使微生物的_增强，同时由于石油主要含有碳和氢，因此还需加入适量含_元素的物质促进微生物的生长繁殖，进而加快石油污染物的降解。（2）为了得到能够分解石油的单一假单胞菌（细菌的一种），所用的培养基只能以_为唯一碳源；纯化菌株常用_或_法。（3）土壤中分解石油的微生物数量直接影响治理的效果，因此常开展计数工作。实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养，目的是保证获得菌落数为_的平板进行计数，这种方法统计的结果_（填“”或“=”或“”）活菌的实际数目，原因是_。【答案】 代谢（或有氧呼吸） 氮和磷 石油 平板划线法 稀释涂布平板 30300 两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上只能观察到一个菌落【解析】试题分析：本题综合考查学生对微生物的实验室培养、微生物的分离与计数等相关知识点的识记与理解能力。熟记并理解相关的基础知识形成清晰的知识网络，在此基础上从题中提取相关信息解答。在解题中要注意以下问题：微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌落数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落；统计菌落数目的方法：显微镜直接计数法，统计的是细胞的总数，无法区分细胞的死活。间接计数法（活菌计数法），为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。（1）土壤中含有分解石油的多种微生物，向多孔结构的污染土壤中通入空气，可使微生物的代谢（或有氧呼吸）增强，同时由于石油主要含有碳和氢，因此还需加入适量含氮和磷元素的物质促进微生物的生长繁殖，进而加快石油污染物的降解。（2）要得到能够分解石油的单一假单胞菌（细菌的一种），应该用以石油为唯一碳源的选择培养基；纯化菌株常用平板划线法或稀释涂布平板法。（3）实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养，目的是保证获得菌落数为30-300的平板进行计数；由于两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上只能观察到一个菌落，因此采用稀释涂布