人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业.docxVIP

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、单选题1在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是 ( )a加入唯一氮源作为选择培养基，加入酚红指示剂作为鉴别培养基。b加入唯一氮源作为鉴别培养基，加入酚红指示剂作为选择培养基。c加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源作为鉴别培养基。 d加入酚红指示剂作为选择培养基，加入唯一碳源作为鉴别培养基 【答案】a【解析】试题分析：在分解尿素菌的分离和鉴定中，先加入以尿素为唯一氮源的选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基，如果培养基变红，说明培养基中已得到能降解尿素的细菌。考点：本题主要考查微生物的分离与鉴定的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。2有关生物技术的操作过程或应用的叙述，错误的是 (双选)a. 测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液b. 利用凝胶色谱柱分离蛋白质时，相对分子质量小的蛋白质早一些从层析柱中洗脱出来c. 胚胎分割技术可看做是动物无性繁殖的方法d. 以尿素作为唯一碳源的培养基用于鉴别细菌【答案】bd【解析】试题分析：测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液，观察亚硝酸盐溶液颜色的梯度变化，故a正确。利用凝胶色谱柱分离蛋白质时，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，分离较慢；相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，较快分离，故b错。胚胎分割技术是将动物早期胚胎分割为几等份，利用细胞全能性，移植获得同卵多胎，为无性繁殖，故c正确。以尿素作为唯一氮源的培养基用于筛选分解尿素的细菌，故d错。考点：本题考查生物技术相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力。3在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红的目的是a分离出能分解尿素的细菌b给分解尿素的细菌提供营养c对分离的菌种作进一步的鉴定d维持正常ph抑制杂菌的生长繁殖【答案】c【解析】试题分析：尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨，使ph升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌，故选c。考点：尿素分解菌的鉴别【名师点睛】尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨，使ph升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌。4某些土壤细菌可将尿素（ch4n2o）分解为co2和nh3供植物吸收和利用，但分解产物co2不能为该菌提供营养。下列关于配置分离这一菌种的选择培养基的成分符合要求的是a. 仅尿素 b. 尿素+葡萄糖 c. 仅葡萄糖 d. 牛肉膏蛋白胨【答案】b【解析】从土壤中分离筛选能分解尿素的细菌时，其培养基中应以尿素为唯一氮源，此外还应有提供碳源的葡萄糖等营养成分；牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素。综上分析，b正确，a、c、d均错误。5下列有关微生物的叙述正确的是（ ）a不同的微生物对营养物质的需要不完全相同b以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的c检验某培养基具有选择作用应在该种培养基中加入等量蒸馏水作空白对照d利用平板划线法或稀释涂布平板法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数【答案】a【解析】微生物代谢类型不同，对营养物质的需要也不完全相同，a正确；尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生长，所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌，尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，来鉴定该微生物，因此两者的目的不同，b错误；检验某培养基具有选择作用，应另用一个完全培养基进行对照，c错误；释涂布平板法才可以对微生物进行计数，d错误。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】1微生物的分离利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”，专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。2、微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。6关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（ ）a. 在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液b. 在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养zxxkc. 检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功d. 检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带）【答案】a【解析】在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液，a正确；在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基放在恒温箱中培养一段时间，b错误；在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，这是对分离的菌种作进一步鉴定的步骤，c错误；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的扩散速度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带），d错误。考点：本题考查生物技术的相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。7下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（ ）a以尿素作为唯一碳源b能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶c环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性d以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红【答案】d【解析】试题分析：由于只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以分离分解尿素的细菌时以尿素作为唯一氮源，a项错误；分解尿素的细菌能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，b项错误；该细菌产生脲酶是受基因控制的，而不是环境中的尿素诱导的，c项错误；细菌合成的脲酶将尿素分解成的氨会使培养基的碱性增强，ph升高，所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养该细菌后会使酚红指示剂变红，但如果培养基中添加了酸碱缓冲剂，则不会使酚红指示剂变红，d项正确。考点：本题考查分解尿素的细菌的分离的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。8下列叙述不正确的是 ( )a因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离b测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同c如果得到了多个菌落数目在30300的平板，则说明稀释操作比较成功d牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落【答案】d【解析】试题分析：牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，d错误 。考点：本题考查土壤中各类微生物的分离，意在考查考生对知识的掌握情况。9利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是 ()a. 要得到微生物a，最好选择富含纤维素的土壤采集土样b. 图中过程常用的微生物b是酵母菌c. 微生物a和微生物b可利用的碳源相同d. 可用纤维素酶制剂代替微生物a起作用【答案】c【解析】试题分析：根据图解可知，微生物a的碳源是纤维素，故要想获得微生物a最好选择富含纤维素的土壤采集，a项正确；图中过程表示生产乙醇的过程，常用微生物是酵母菌，b项正确；微生物a所用碳源为纤维素，微生物b所用碳源为纤维素降解物，c项错误；微生物a之所以能利用纤维质原料是因为其含有纤维素酶，故可用纤维素酶制剂代替微生物a起作用，d项正确。考点：本题考查生产乙醇的过程中的原料，微生物的种类等知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。10下列关于细菌菌落的叙述，正确的是（ ）a每个菌落由大量的各种细菌组成b在液体培养基中可以形成各种菌落c不同菌种的菌落特征不同d菌落是不能用肉眼观察到的【答案】c【解析】试题分析：a、每个菌落由大量的一种细菌组成，a错误；b、细菌在固体培养基上才可以形成菌落，b错误；c、不同菌种的菌落特征不同，c正确；d、菌落是能用肉眼观察到的，d错误故选：c11下列有关生物学研究的叙述，正确的有a. “35s标记的t2噬菌体侵染细菌”的实验中，若未经搅拌就进行离心，则上清液放射性低b. “探究细胞大小与物质运输效率的关系”的实验中，naoh扩散速度是因变量c. 在电子显微镜下拍摄到的叶绿体的结构照片属于物理模型d. 对酵母菌计数时，应吸取培养液滴满血细胞计数板的计数室，然后再盖上盖玻片并镜检【答案】a【解析】试题分析：35s标记t2噬菌体蛋白质外壳，没有进入细菌，吸附在细菌表面，如果没有搅拌就进行离心，会与细菌一同在下层，则沉淀物放射性较高，故a正确。naoh扩散/整个琼脂块体积比值为因变量，故b错。以实物或者图画直观表达认识对象特征，为物理模型，拍摄照片不是，故c错。.对酵母菌计数时，先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴与盖玻片边缘，让培养液自行渗入，待酵母菌沉降到计数室底部再计数，故d错。考点：本题考查生物学研究和实验相关知识，意在考查考生）关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件能力；能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。12稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中,取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术?（ ）a. 灭菌、灭菌 b. 消毒、消毒c. 灭菌、消毒 d. 消毒、灭菌【答案】d【解析】在稀释涂布平板法中，将涂布器保存在体积分数为70%的酒精中的目的是为了消毒；将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却810s再用，目的是为了灭菌，故选d。13在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有（ ）土样不同培养基污染操作失误没有设置对照a. b. c. d. 【答案】a【解析】土样不同可能导致计数偏差，正确；培养基污染，会导致菌落增多，正确；操作失误可能增加微生物的数量和种类，菌落会增多，正确；没有设置对照不会影响菌落数目，错误。14下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是a分离土壤中不同种类的微生物，要采用不同的稀释度b利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助显微镜c提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法接种d可从落叶丰富的土壤中筛选出能分解纤维素的微生物【答案】b【解析】试题分析：由于涂布平板法最终是通过观察细菌形成的菌落，而菌落是肉眼可见的，所以不需要用显微镜，b选项是错误的。考点：微生物分离和培养【名师点睛】稀释涂布平板法注意事项（1）稀释操作时：每支试管及其中的9 ml水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰12 cm 处。（2）涂布平板时：涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃；不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精；酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。15在做分离“分解尿素的细菌”实验时，a同学从对应106培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落下列有关叙述不正确的是（）a. a同学出现这种结果的原因可能是土样不同b. 可以将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染c. 让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一样，则可证明a同学无误d. b选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，而c选项的没有【答案】d【解析】甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，a正确；a同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，b正确；如果是a同学实验操作过程中污染造成的，让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一样，则可证明a同学无误，c正确；b选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而c选项的也有对照实验，d错误。【点睛】本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化学生微生物实验操作遵循的原则及其运用，生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。二、非选择题16（15分）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。（1）大肠杆菌的同化类型为_，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_。（2）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_，因此需对培养基和培养皿进行_（填“消毒”或“灭菌”），操作者的双手需要进行清洗和_。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使_，还能破坏dna的结构。（3）根据用途划分，该培养基属于_（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_换成_，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成_。（4）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是_和_。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为_。（5）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是 （多选）。a制作果酒 b由果酒制作果醋 c制作泡菜 d制作腐乳【答案】（15分）（1）异养型 分解者（2）防止外来杂菌的入侵 灭菌 消毒 蛋白质变性（3）鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂（4）平板划线法 稀释涂布平板法 菌落（5）bc（2分）【解析】试题分析：（1）大肠杆菌需要从培养基中获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；大肠杆菌在生态系统的成分中充当分解者。（2）微生物培养时，关键是防止外来杂菌的感染；对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理，操作者的双手需要消毒处理；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，同时还能破坏dna的结构。（3）培养基配方中的伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此，从用途上划分，该培养基属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂。（4）微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；由一个细菌繁殖产生的子细胞群体，称为菌落。（5）制备果酒使用的微生物是酵母菌；制作果醋使用的微生物是醋酸菌；制作泡菜使用的微生物是乳酸菌；制作腐乳的微生物是毛霉。酵母菌和毛霉属于真核生物，醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌都属于原核生物。考点：本题考查微生物的培养和发酵的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。【答案】（1）有机质 接近中性（2）氯化汞（或次氯酸钙、升汞） 高压蒸汽灭菌 dna的结构将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生（3）吸附在葡萄皮上的野生酵母菌 有氧 乙醛（4）平板划线法 稀释涂布平板法（5）当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（6）选择 酚红 红【解析】（1）微生物主要分布在富含有机质的土壤表层；不同微生物对ph的要求不同，细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。（2）在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和氯化汞进行消毒在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤dna的结构，要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。（3）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，在有氧和糖原充足时，将糖分解成醋酸；当缺少糖原时醋酸菌将乙醇转变成乙醛，再转变成醋酸。（4）常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。（5）根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（6）检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，观察是否变红。如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色。【考点定位】微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量；酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；植物的组织培养【名师点睛】微生物的分离是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要环节。土壤中的微生物很多，本题中要从土壤中获得分解纤维素的菌。接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。用途：一般多用于从菌种的纯化；稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的